| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第13-21页 |
| 1.1 烟草的重要地位 | 第13页 |
| 1.2 植物应对各种胁迫反应机制 | 第13-15页 |
| 1.2.1 植物应对生物胁迫的机制 | 第13-14页 |
| 1.2.2 植物适应非生物胁迫的机制 | 第14-15页 |
| 1.3 非特异性脂转移蛋白基因 | 第15-17页 |
| 1.3.1 非特异性脂转移蛋白的发现 | 第15-16页 |
| 1.3.2 非特异性脂转移蛋白的分类 | 第16页 |
| 1.3.3 非特异性脂转移蛋白的结构 | 第16-17页 |
| 1.4 非特异性脂转移蛋的功能 | 第17-20页 |
| 1.4.1 蜡质的合成与运输 | 第17-18页 |
| 1.4.2 抗非生物胁迫 | 第18页 |
| 1.4.3 抗生物胁迫 | 第18-19页 |
| 1.4.4 生殖器官发育 | 第19-20页 |
| 1.4.5 其他功能 | 第20页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 菌株与质粒 | 第21页 |
| 2.1.3 酶与各种生化试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 序列测定 | 第21页 |
| 2.1.5 引物 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-37页 |
| 2.2.1 烟草的培养与处理 | 第22-23页 |
| 2.2.2 植物总RNA的提取 | 第23-25页 |
| 2.2.3 植物基因组DNA的提取 | 第25-26页 |
| 2.2.4 cDNA的合成 | 第26页 |
| 2.2.5 PCR扩增 | 第26-27页 |
| 2.2.6 PCR扩增片段的回收 | 第27页 |
| 2.2.7 目的基因和克隆载体的连接 | 第27页 |
| 2.2.8 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
| 2.2.9 质粒DNA的微量提取 | 第28-29页 |
| 2.2.10 酶切验证和回收 | 第29页 |
| 2.2.11 亚细胞定位分析 | 第29-30页 |
| 2.2.12 植物表达载体的构建与转化 | 第30-32页 |
| 2.2.13 转基因烟草鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.14 转基因烟草的抗旱分析 | 第33页 |
| 2.2.15 转基因烟草的抗盐分析 | 第33页 |
| 2.2.16 组织化学染色分析 | 第33-34页 |
| 2.2.17 生理活性物质检测 | 第34页 |
| 2.2.18 转基因烟草的抗病性分析 | 第34-35页 |
| 2.2.19 荧光定量PCR分析 | 第35-36页 |
| 2.2.20 数据库及网络资源 | 第36页 |
| 2.2.21 生物学软件 | 第36-37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-57页 |
| 3.1 烟草NtLTP4基因的分离 | 第37-38页 |
| 3.1.1 烟草RNA的提取及cDNA反转录 | 第37页 |
| 3.1.2 烟草NtLTP4基因的分离 | 第37-38页 |
| 3.2 NtLTP4的序列分析 | 第38-40页 |
| 3.2.1 NtLTP4的全长cDNA序列分析 | 第38页 |
| 3.2.2 NtLTP4蛋白序列比对分析 | 第38-39页 |
| 3.2.3 进化树分析 | 第39-40页 |
| 3.3 NtLTP4蛋白的亚细胞定位分析 | 第40页 |
| 3.4 NtLTP4基因的表达特性分析 | 第40-42页 |
| 3.5 NtLTP4超表达烟草的获得及鉴定 | 第42-44页 |
| 3.5.1 NtLTP4超表达载体的构建及获得 | 第42-44页 |
| 3.5.2 NtLTP4超表达烟草的鉴定 | 第44页 |
| 3.6 NtLTP4超表达植株对高盐胁迫的抗性分析 | 第44-50页 |
| 3.6.1 NtLTP4超表达植株对高盐的抗性分析 | 第44-47页 |
| 3.6.2 NtLTP4超表达植株对高盐的抗氧化分析 | 第47-50页 |
| 3.7 NtLTP4超表达植株对干旱胁迫的抗性分析 | 第50-55页 |
| 3.7.1 NtLTP4超表达植株对干旱的抗性分析 | 第50-52页 |
| 3.7.2 NtLTP4超表达植株对干旱的抗氧化分析 | 第52-55页 |
| 3.8 NtLTP4超表达植株对生物胁迫的抗性分析 | 第55-57页 |
| 4 讨论 | 第57-62页 |
| 5 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
