| 摘要 | 第6-8页 |
| 英文摘要 | 第8-9页 |
| 英文缩略表 | 第14-15页 |
| 第一章 引言 | 第15-26页 |
| 1.1 植物耐盐性的研究现状 | 第15-18页 |
| 1.1.1 盐胁迫对植物生长的影响 | 第15-16页 |
| 1.1.2 植物对盐胁迫的适应性机制 | 第16-18页 |
| 1.2 植物水通道蛋白 | 第18-24页 |
| 1.2.1 植物水通道蛋白的分类及其多样性 | 第18页 |
| 1.2.2 植物水通道蛋白的结构 | 第18-20页 |
| 1.2.3 植物水通道蛋白的功能 | 第20-22页 |
| 1.2.4 植物水通道蛋白的活性调控 | 第22-23页 |
| 1.2.5 植物AQPs与环境因子 | 第23-24页 |
| 1.3 立题目的与意义 | 第24-25页 |
| 1.4 技术路线 | 第25-26页 |
| 第二章 小盐芥ThPIP1的克隆和生物信息学分析 | 第26-34页 |
| 2.1 试验材料及仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第26页 |
| 2.1.2 菌种及载体 | 第26页 |
| 2.1.3 酶及生化试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 试剂盒 | 第26页 |
| 2.1.5 引物合成及测序 | 第26页 |
| 2.1.6 相关培养基的配制 | 第26页 |
| 2.1.7 主要仪器设备 | 第26-27页 |
| 2.1.8 引物设计和生物信息学分析软件 | 第27页 |
| 2.2 方法 | 第27-28页 |
| 2.2.1 小盐芥总RNA的提取与检测 | 第27页 |
| 2.2.2 反转录合成小盐芥cDNA与ThPIP1的克隆 | 第27-28页 |
| 2.2.3 PCR产物回收、连接与转化 | 第28页 |
| 2.2.4 质粒DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.5 DNA序列测定 | 第28页 |
| 2.3 结果与分析 | 第28-33页 |
| 2.3.1 小盐芥ThPIP1基因的克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.2 ThPIP1基因编码蛋白的理化性质 | 第29页 |
| 2.3.3 ThPIP1基因进化分析及编码蛋白跨膜结构预测 | 第29-31页 |
| 2.3.4 ThPIP1磷酸化位点和疏水性分析及亚细胞定位预测 | 第31-33页 |
| 2.4 小结 | 第33-34页 |
| 第三章 小盐芥ThPIP1的亚细胞定位及ThPIP1基因逆境胁迫下的表达模式 | 第34-42页 |
| 3.1 试验材料 | 第34-35页 |
| 3.1.1 菌种及载体 | 第34页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第34页 |
| 3.1.3 酶、试剂和仪器 | 第34页 |
| 3.1.4 培养基配制 | 第34-35页 |
| 3.1.5 溶液配制 | 第35页 |
| 3.2 方法 | 第35-37页 |
| 3.2.1 亚细胞定位表达载体的构建 | 第35页 |
| 3.2.2 基因枪轰击洋葱表皮亚细胞定位细胞方法与步骤 | 第35页 |
| 3.2.3 PEG介导转化拟南芥原生质体亚细胞定位细胞方法与步骤 | 第35-36页 |
| 3.2.4 野生小盐芥中ThPIP1非生物胁迫下表达模式的分析 | 第36-37页 |
| 3.3 结果与分析 | 第37-41页 |
| 3.3.1 亚细胞定位载体构建 | 第37-39页 |
| 3.3.2 洋葱表皮亚细胞定位的瞬时表达 | 第39页 |
| 3.3.3 ThPIP1蛋白在拟南芥原生质体中的亚细胞定位 | 第39-40页 |
| 3.3.4 小盐芥中ThPIP1基因非生物胁迫下的表达模式 | 第40-41页 |
| 3.4 小结 | 第41-42页 |
| 第四章 构建植物表达载体并转化水稻以及转基因水稻的耐盐性分析 | 第42-57页 |
| 4.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 植物材料 | 第42页 |
| 4.1.2 载体及菌种 | 第42页 |
| 4.1.3 酶及生化试剂 | 第42页 |
| 4.1.4 营养液及实验试剂的配制 | 第42-43页 |
| 4.1.5 主要仪器设备 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-47页 |
| 4.2.1 植物表达载体的构建 | 第43-44页 |
| 4.2.2 农杆菌转化 | 第44-45页 |
| 4.2.3 农杆菌介导转化水稻愈伤组织 | 第45页 |
| 4.2.4 转基因水稻植株的筛选与检测 | 第45页 |
| 4.2.5 转基因水稻的盐处理 | 第45页 |
| 4.2.6 转基因水稻的生理指标测定 | 第45-47页 |
| 4.2.7 试验数据统计分析 | 第47页 |
| 4.3 结果与分析 | 第47-56页 |
| 4.3.1 植物表达载体的构建 | 第47-48页 |
| 4.3.2 转基因水稻植株的筛选与检测 | 第48-49页 |
| 4.3.3 盐胁迫对野生型和转基因拟南芥表型特征的影响 | 第49-50页 |
| 4.3.4 盐胁迫对野生型和转基因水稻生物量和SPAD的影响 | 第50页 |
| 4.3.5 盐胁迫对水稻植物组织含水量和渗透势的影响 | 第50-51页 |
| 4.3.6 盐胁迫下水稻脯氨酸和可溶性糖含量的变化 | 第51-52页 |
| 4.3.7 盐胁迫下水稻丙二醛含量和K+/Na+的变化 | 第52-53页 |
| 4.3.8 盐胁迫下水稻植株离子含量的变化 | 第53-56页 |
| 4.4 小结 | 第56-57页 |
| 第五章 小盐芥ThPIP1水通道蛋白互作蛋白的筛选 | 第57-68页 |
| 5.1 实验材料 | 第57-58页 |
| 5.1.1 载体和菌株 | 第57页 |
| 5.1.2 酶和试剂 | 第57-58页 |
| 5.1.3 溶液配制 | 第58页 |
| 5.1.4 主要仪器设备 | 第58页 |
| 5.2 方法 | 第58-63页 |
| 5.2.1 诱饵蛋白载体的构建 | 第58-59页 |
| 5.2.2 诱饵蛋白载体ThPIP1-pDHB1转化酵母细胞 | 第59-60页 |
| 5.2.3 小盐芥cDNA文库转化携带ThPIP1-pDHB1质粒的酵母细胞 | 第60-61页 |
| 5.2.4 酵母单克隆 β 半乳糖苷酶活性的验证 | 第61页 |
| 5.2.5 阳性克隆序列分析 | 第61-62页 |
| 5.2.6 靶蛋白与ThPIP1蛋白在酵母中的互作验证 | 第62-63页 |
| 5.3 结果与分析 | 第63-67页 |
| 5.3.1 膜酵母双杂交从小盐芥cDNA文库中筛选ThPIP1的互作蛋白 | 第63-64页 |
| 5.3.2 获得的靶蛋白与ThPIP1在酵母中的互作验证 | 第64-65页 |
| 5.3.3 互作蛋白的生物信息学分析 | 第65-67页 |
| 5.4 小结 | 第67-68页 |
| 第六章 全文结论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
| 作者简历 | 第78页 |
