中文摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
符号说明 | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-25页 |
1.1 盐害对植物的影响 | 第14页 |
1.2 植物的耐盐机制 | 第14-17页 |
1.2.1 渗透调节 | 第14-15页 |
1.2.2 离子区域化 | 第15-16页 |
1.2.3 活性氧清除机制 | 第16页 |
1.2.4 基因表达的调控 | 第16-17页 |
1.3 钙在盐胁迫中的作用 | 第17-19页 |
1.3.1 钙缓解盐胁迫的机制 | 第18-19页 |
1.3.1.1 细胞壁 | 第18页 |
1.3.1.2 细胞膜 | 第18页 |
1.3.1.3 胞内信号传递 | 第18-19页 |
1.4 SAMDC的研究进展 | 第19-23页 |
1.4.1 多胺在植物体内的作用 | 第19-20页 |
1.4.2 腺苷甲硫氨酸脱羧酶 | 第20-22页 |
1.4.2.1 SAMDC基因的分离 | 第20-21页 |
1.4.2.2 SAMDC的分类 | 第21页 |
1.4.2.3 SAMDC基因的结构特征 | 第21-22页 |
1.4.3 SAMDC与植物耐抗盐性的关系 | 第22-23页 |
1.4.4 多胺抗盐机理 | 第23页 |
1.5 盐胁迫下钙与多胺的关系 | 第23页 |
1.6 研究目的与意义 | 第23-25页 |
第二章 钙及SAMDC对花生盐胁迫的保护作用 | 第25-43页 |
2.1 材料与方法 | 第25-30页 |
2.1.1 实验材料与实验地点 | 第25页 |
2.1.2 主要生化试剂 | 第25页 |
2.1.3 材料处理 | 第25-26页 |
2.1.4 花生叶片过氧化氢含量的测定 | 第26页 |
2.1.5 花生叶片相对电导率的测定 | 第26页 |
2.1.6 花生叶片MDA含量的测定 | 第26-27页 |
2.1.7 花生叶片SOD酶的活性测定 | 第27页 |
2.1.8 花生叶片POD酶的活性测定 | 第27页 |
2.1.9 花生叶片CAT酶的活性测定 | 第27页 |
2.1.10 花生叶片可溶性蛋白含量的测定 | 第27页 |
2.1.11 花生叶片脯氨酸含量的测定 | 第27-28页 |
2.1.12 花生叶片可溶性糖含量的测定 | 第28页 |
2.1.13 SAMDC在花生中Real-time PCR检测 | 第28-30页 |
2.1.13.1 提取花生叶片总RNA | 第28页 |
2.1.13.2 RNA样品的检测 | 第28-29页 |
2.1.13.3 RNA的反转录 | 第29页 |
2.1.13.4 Real-Time PCR | 第29-30页 |
2.1.14 花生叶片多胺含量的测定 | 第30页 |
2.2 结果与分析 | 第30-39页 |
2.2.1 盐胁迫下钙对花生叶片过氧化氢含量的影响 | 第30-31页 |
2.2.2 钙对花生叶片抗氧化酶系统的影响 | 第31-33页 |
2.2.3 盐胁迫下钙对花生叶片细胞膜损伤的影响 | 第33-34页 |
2.2.4 盐胁迫下钙对花生叶片脯氨酸和可溶性糖含量的影响 | 第34-35页 |
2.2.5 盐胁迫下钙对花生叶片可溶性蛋白含量的影响 | 第35-36页 |
2.2.6 盐胁迫下不同处理对花生幼苗AhSAMDC表达水平的影响 | 第36-37页 |
2.2.7 盐胁迫下钙对花生幼苗内源游离多胺含量的影响 | 第37页 |
2.2.8 SAMDC抑制剂MGBG对花生盐胁迫的影响 | 第37-39页 |
2.2.9 盐胁迫下外源多胺对花生叶片MDA含量及抗氧化酶活性的影响 | 第39页 |
2.3 讨论 | 第39-43页 |
2.3.1 钙离子对花生幼苗抗盐性的影响 | 第40-41页 |
2.3.2 多胺对花生幼苗抗盐性的影响 | 第41-43页 |
第三章 转AhSAMDC基因烟草的耐盐性分析 | 第43-65页 |
3.1 实验材料与方法 | 第43-51页 |
3.1.1 实验材料 | 第43-45页 |
3.1.1.1 植物材料 | 第43页 |
3.1.1.2 酶、质粒与生化试剂 | 第43页 |
3.1.1.3 主要仪器 | 第43页 |
3.1.1.4 培养基的配制 | 第43-45页 |
3.1.2 花生AhSAMDC基因的克隆 | 第45页 |
3.1.2.1 花生叶片总RNA的提取 | 第45页 |
3.1.2.2 花生叶片总RNA的反转录 | 第45页 |
3.1.2.3 AhSAMDC全长的PCR | 第45页 |
3.1.3 植物表达载体的构建 | 第45-46页 |
3.1.4 转化农杆菌 | 第46-48页 |
3.1.4.1 农杆菌感受态的制备 | 第46页 |
3.1.4.2 冻融法转化农杆菌 | 第46-48页 |
3.1.4.3 重组农杆菌阳性鉴定 | 第48页 |
3.1.5 农杆菌介导的叶盘法转化烟草 | 第48-49页 |
3.1.5.1 外植体的侵染及培养 | 第48页 |
3.1.5.2 生根培养及移栽 | 第48-49页 |
3.1.6 转基因烟草的分子生物学检测 | 第49页 |
3.1.6.1 烟草基因组DNA的提取 | 第49页 |
3.1.6.2 转基因植株的PCR检测 | 第49页 |
3.1.6.3 转基因烟草植株的RT-PCR检测 | 第49页 |
3.1.7 转基因烟草的抗盐性分析 | 第49-51页 |
3.1.7.1 盐胁迫下转基因烟草种子的萌发实验 | 第49-50页 |
3.1.7.2 盐胁迫对烟草种子根发育影响的实验 | 第50页 |
3.1.7.3 烟草幼苗的盐胁迫处理 | 第50页 |
3.1.7.4 烟草叶片相对电导率的测定 | 第50页 |
3.1.7.5 烟草叶片MDA含量的测定 | 第50页 |
3.1.7.6 烟草叶片SOD酶的活性测定 | 第50页 |
3.1.7.7 烟草叶片POD酶的活性测定 | 第50页 |
3.1.7.8 烟草叶片CAT酶的活性测定 | 第50页 |
3.1.7.9 烟草叶片脯氨酸含量的测定 | 第50页 |
3.1.7.10 烟草叶片可溶性糖的测定 | 第50-51页 |
3.1.7.11 烟草叶片多胺含量的测定 | 第51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-61页 |
3.2.1 AhSAMDC转化烟草 | 第51-54页 |
3.2.1.1 植物表达载体的构建 | 第51-52页 |
3.2.1.2 转化农杆菌 | 第52页 |
3.2.1.3 LBA-pBI121/samdc转化烟草 | 第52页 |
3.2.1.4 转基因烟草的分子生物学检测及生理形态 | 第52-54页 |
3.2.2 转AhSAMDC基因烟草的抗盐性分析 | 第54-61页 |
3.2.2.1 盐胁迫对各株系烟草种子萌发的影响 | 第54-55页 |
3.2.2.2 盐胁迫对各株系烟草根发育的影响 | 第55-56页 |
3.2.2.3 盐胁迫对各株系烟草叶片抗氧化酶活性的影响 | 第56-57页 |
3.2.2.4 盐胁迫对各株系烟草叶片渗透调节物质的影响 | 第57页 |
3.2.2.5 盐胁迫对各株系烟草叶片膜损伤的影响 | 第57-59页 |
3.2.2.6 盐胁迫对各株系烟草叶片内源多胺含量的影响 | 第59-60页 |
3.2.2.7 钙及其信号抑制剂对各株系烟草盐胁迫下细胞膜损伤的影响 | 第60-61页 |
3.3 讨论 | 第61-65页 |
3.3.1 外源基因表达的分子检测 | 第62页 |
3.3.2 转AhSAMDC基因对烟草植株抗盐性的影响 | 第62-63页 |
3.3.3 钙对烟草抗盐性的影响 | 第63页 |
3.3.4 AhSAMDC基因提高烟草植株抗盐性的可能机制 | 第63-65页 |
第四章 结论 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-75页 |
致谢 | 第75-76页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第76-77页 |
学术论文评阅及答辩情况表 | 第77页 |