中文摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 前言 | 第10-19页 |
1.1 模式生物秀丽隐杆线虫简介 | 第10-11页 |
1.2 秀丽隐杆线虫在药物毒理和药物代谢方面的研究进展 | 第11-15页 |
1.2.1 秀丽隐杆线虫在药物毒理学方面的应用 | 第11-12页 |
1.2.2 秀丽隐杆线虫细胞色素P450的研究进展 | 第12-14页 |
1.2.3 秀丽隐杆线虫cyp-35 家族基因的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 秀丽隐杆线虫RNA干扰的原理和应用 | 第15-16页 |
1.3.1 秀丽隐杆线虫RNA干扰的原理 | 第15-16页 |
1.3.2 RNA干扰技术在秀丽隐杆线虫的应用 | 第16页 |
1.4 3-溴丙酮酸的研究现状 | 第16-19页 |
1.4.1 3-溴丙酮酸的药物特点和作用机制 | 第16-18页 |
1.4.2 3-溴丙酮酸的研究进展 | 第18-19页 |
第二章 材料和方法 | 第19-32页 |
2.1 实验材料、试剂及仪器 | 第19-21页 |
2.1.1 主要实验材料 | 第19页 |
2.1.2 实验试剂 | 第19页 |
2.1.3 主要培养基和缓冲液的配制 | 第19-20页 |
2.1.4 主要实验仪器和设备 | 第20-21页 |
2.2 试验方法 | 第21-32页 |
2.2.1 秀丽隐杆线虫的培养 | 第21页 |
2.2.2 秀丽隐杆线虫的同步化和保存 | 第21页 |
2.2.3 3-溴丙酮酸作用于秀丽隐杆线虫 | 第21-22页 |
2.2.4 吖啶橙染色药物处理后的秀丽隐杆线虫 | 第22页 |
2.2.5 对药物处理的秀丽隐杆线虫进行脂肪染色 | 第22-23页 |
2.2.6 秀丽隐杆线虫总RNA的提取和反转录 | 第23-24页 |
2.2.7 hxk-1、hxk-2 和hxk-3 引物设计和表达量的测定 | 第24-25页 |
2.2.8 目的基因hxk-1、hxk-2 和hxk-3 基因的克隆 | 第25-28页 |
2.2.9 目的基因hxk-1、hxk-2 和hxk-3 基因的表达 | 第28-29页 |
2.2.10 目的基因hxk-1、hxk-2 和hxk-3 的沉默和RNA干扰效果验证 | 第29页 |
2.2.11 3-溴丙酮酸作用于hxk-1、hxk-2 和hxk-3 基因沉默的线虫 | 第29-30页 |
2.2.12 己糖激酶基因分子进化树的构建及亲缘关系分析 | 第30页 |
2.2.13 cyp-35A1、cyp-35A2、cyp-35A4、cyp-35A5、cyp-35B3和cyp-35C1引物的设计与表达量的测定 | 第30-31页 |
2.2.14 cyp-35A4和cyp-35B3基因沉默线虫的培养 | 第31页 |
2.2.15 3-溴丙酮酸作用于cyp-35A1、cyp-35A2、cyp-35A4和cyp-35B3基因沉默或突变株线虫 | 第31页 |
2.2.16 数据分析 | 第31-32页 |
第三章 结果 | 第32-44页 |
3.1 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫毒性作用观察 | 第32-35页 |
3.1.1 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫毒性作用的形态观察 | 第32页 |
3.1.2 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫急性毒性实验结果 | 第32页 |
3.1.3 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫发育的影响 | 第32-33页 |
3.1.4 3-溴丙酮酸处理秀丽隐杆线虫后细胞凋亡染色结果 | 第33-34页 |
3.1.5 3-溴丙酮酸处理秀丽隐杆线虫后脂肪染色结果 | 第34-35页 |
3.2 3-溴丙酮酸处理秀丽隐杆线虫后己糖激酶基因的表达 | 第35-41页 |
3.2.1 3-溴丙酮酸作用线虫后总RNA的提取 | 第35页 |
3.2.2 hxk-1、hxk-2 和hxk-3 实时荧光定量PCR结果 | 第35-36页 |
3.2.3 目的基因hxk-1、hxk-2 和hxk-3 克隆结果 | 第36-39页 |
3.2.4 hxk-1、hxk-2 和hxk-3 基因RNA干扰效果验证 | 第39页 |
3.2.5 3-溴丙酮酸对hxk基因RNA干扰线虫的毒力结果 | 第39-40页 |
3.2.6 己糖激酶基因遗传进化分析结果 | 第40-41页 |
3.3 秀丽隐杆线虫cyp-35 家族基因对 3-溴丙酮酸代谢的研究 | 第41-44页 |
3.3.1 cyp-35A1、cyp-35A2、cyp-35A4、cyp-35A5、cyp-35B3和cyp-35C1的实时荧光定量PCR结果 | 第41-43页 |
3.3.2 3-溴丙酮酸对不同基因RNA干扰线虫或突变株线虫的毒力结果 | 第43-44页 |
第四章 讨论 | 第44-48页 |
4.1 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫幼虫发育的影响 | 第44页 |
4.2 3-溴丙酮酸对秀丽隐杆线虫毒性机制的探讨 | 第44-45页 |
4.3 cyp-35 家族基因在秀丽隐杆线虫药物代谢机制中的作用 | 第45-48页 |
第五章 结论 | 第48-49页 |
5.1 主要结论 | 第48页 |
5.2 研究展望 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-53页 |
在学期间的研究成果 | 第53-54页 |
附录一 英语缩略词汇表 | 第54-55页 |
致谢 | 第55页 |