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茶树AsA代谢相关酶基因的克隆及表达分析

摘要第5-6页
ABSTRACT第6-7页
第一章 文献综述第11-21页
    1.1 引言第11-13页
    1.2 植物体内AsA的代谢第13-15页
        1.2.1 L-半乳糖途径第13页
        1.2.2 古洛糖途径第13页
        1.2.3 半乳糖醛酸途径第13-14页
        1.2.4 肌醇途径第14页
        1.2.5 AsA的再生途径第14-15页
    1.3 调控AsA代谢相关酶基因的研究第15-17页
        1.3.1 AsA合成相关酶第15-16页
        1.3.2 AsA循环再生相关酶第16-17页
    1.4 非生物胁迫对AsA代谢的影响第17-19页
        1.4.1 干旱胁迫与AsA代谢第17页
        1.4.2 温度胁迫与AsA代谢第17-18页
        1.4.3 光照胁迫与AsA代谢第18页
        1.4.4 盐胁迫与AsA代谢第18页
        1.4.5 其他胁迫与AsA代谢第18-19页
    1.5 茶树中AsA研究进展第19页
    1.6 研究内容、目的与意义第19-21页
第二章 茶树AsA合成酶基因的克隆第21-34页
    2.1 材料与试剂第21页
    2.2 实验方法第21-27页
        2.2.1 总RNA的提取和检测第21-22页
        2.2.2 cDNA第一链的合成第22页
        2.2.3 中间片段克隆第22-24页
        2.2.4 cDNA的RACE反应第24-26页
        2.2.5 cDNA全长扩增第26-27页
        2.2.6 序列的生物信息学分析第27页
    2.3 结果与分析第27-32页
        2.3.1 总RNA的提取与检测第27-28页
        2.3.2 基因克隆与序列分析第28-32页
    2.4 讨论第32-34页
        2.4.1 茶树总RNA提取第32页
        2.4.2 基因克隆第32-33页
        2.4.3 生物信息学分析第33-34页
第三章 原核表达第34-39页
    3.1 材料与试剂第34页
    3.2 实验方法第34-36页
        3.2.1 原核表达载体的构建第34-35页
        3.2.2 E.coli HI-Control BL21(DE3)原核表达诱导第35-36页
        3.2.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第36页
    3.3 结果与分析第36-37页
    3.4 讨论第37-39页
第四章 不同叶位与品种中AsA代谢相关酶基因表达分析第39-47页
    4.1 材料与试剂第39页
    4.2 实验方法第39-41页
        4.2.1 Real-Time PCR第39-40页
        4.2.2 AsA和DHA含量的测定第40-41页
    4.3 结果与分析第41-45页
        4.3.1 龙井长叶不同叶位AsA含量及相关基因的表达分析第41-43页
        4.3.2 不同茶树品种AsA含量及相关基因的表达分析第43-45页
    4.4 讨论第45-47页
        4.4.1 Real-Time PCR第45页
        4.4.2 不同叶位AsA合成酶基因表达分析第45-46页
        4.4.3 不同品种AsA合成酶基因表达分析第46-47页
第五章 干旱对水培茶苗叶片AsA合成代谢的影响第47-52页
    5.1 材料与方法第47-48页
        5.1.1 供试材料及预培养第47页
        5.1.2 试验处理第47-48页
        5.1.3 试剂第48页
        5.1.4 AsA和DHA含量的测定第48页
        5.1.5 RNA的提取和荧光定量第48页
        5.1.6 数据处理第48页
    5.2 结果与分析第48-50页
        5.2.1 干旱胁迫对水培茶苗叶片AsA含量的影响第48-49页
        5.2.2 干旱胁迫对水培茶苗叶片AsA合成酶基因表达的影响第49-50页
        5.2.3 干旱胁迫对水培茶苗叶片AsA再生酶基因表达的影响第50页
    5.3 讨论第50-52页
第六章 高盐胁迫对水培茶苗叶片AsA合成代谢的影响第52-56页
    6.1 材料与方法第52页
        6.1.1 供试材料及预培养第52页
        6.1.2 试验处理第52页
        6.1.3 试剂第52页
        6.1.4 AsA和DHA含量的测定第52页
        6.1.5 RNA的提取和荧光定量第52页
        6.1.6 数据处理第52页
    6.2 结果与分析第52-54页
        6.2.1 高盐胁迫对水培茶苗叶片AsA含量的影响第52-53页
        6.2.2 高盐胁迫对水培茶苗叶片AsA合成酶基因表达的影响第53-54页
        6.2.3 高盐胁迫对水培茶苗叶片AsA再生酶基因表达的影响第54页
    6.3 讨论第54-56页
第七章 结论第56-57页
参考文献第57-65页
附录 基因序列第65-67页
致谢第67-68页
作者简介第68页

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