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宁夏禽流感流行病学调查及病毒HA基因遗传进化分析

缩略词及符号中英文对照第3-5页
摘要第5-7页
SUMMARY第7-8页
第一章 禽流感及其检测方法的研究进展第14-36页
    1 概述第14页
    2 病原学第14-16页
        2.1 病毒分子特性及分类第14-15页
        2.2 命名原则第15页
        2.3 理化特性第15-16页
            2.3.1 热稳定性第15-16页
            2.3.2 对化学试剂的稳定性第16页
            2.3.3 对紫外线的敏感性第16页
            2.3.4 对酸碱度的稳定性第16页
    3 流感病毒的感染机制第16-17页
    4 临床症状和病理变化第17-20页
        4.1 无致病性禽流感第17页
        4.2 低致病性禽流感第17-18页
        4.3 高致病性禽流感第18-20页
    5 流行病学第20-24页
        5.1 分布第20-22页
        5.2 易感动物第22页
        5.3 感染途径及传播方式第22-23页
        5.4 季节性第23-24页
    6 禽流感诊断方法第24-27页
        6.1 经典的禽流感检测方法第24-25页
            6.1.1 病毒分离第24页
            6.1.2 HA/HI试验第24页
            6.1.3 琼脂糖凝胶扩散试验(Agar gel immunodiffusion,AGP)第24页
            6.1.4 致病性试验第24-25页
            6.1.5 酶联免疫吸附试验第25页
            6.1.6 病毒中和试验第25页
            6.1.7 免疫荧光技术第25页
        6.2 病毒蛋白检测第25-26页
            6.2.1 免疫层析法第25-26页
            6.2.2 抗原捕获免疫测定试验第26页
        6.3 基因检测第26-27页
            6.3.1 反转录PCR(RT第26页
            6.3.2 实时荧光(定量)RT第26页
            6.3.3 环介导等温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)第26-27页
            6.3.4 依赖核酸序列的扩增技术(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA)第27页
            6.3.5 下一代测序技术(Next generation sequencing,NGS)第27页
    7 公共卫生学意义第27-29页
    参考文献第29-36页
第二章 宁夏禽流感流行病学调查及规模场风险因素分析第36-50页
    1 材料与方法第36-40页
        1.1 材料第36-37页
            1.1.1 样品来源第36-37页
            1.1.2 主要试剂第37页
            1.1.3 主要仪器第37页
        1.2 方法第37-39页
            1.2.1 样品的处理第37页
            1.2.2 阿氏液配制第37页
            1.2.31%鸡红细胞液的制备第37-38页
            1.2.4 血凝(HA)和血凝抑制试验(HI)第38页
            1.2.5 病毒RNA的提取第38页
            1.2.6 禽流感病毒荧光RT-PCR检测第38-39页
        1.3 规模场风险因素分析第39-40页
            1.3.1 相关定义第39页
            1.3.2 现场调查第39页
            1.3.3 统计学分析第39-40页
    2 结果第40-46页
        2.1 血清学检测第40-42页
            2.1.1 H5亚型禽流感免疫抗体合格率第40页
            2.1.2 H7亚型禽流感感染抗体阳性率第40-41页
            2.1.3 H9亚型禽流感免疫抗体合格率第41-42页
        2.2 病原学检测第42-44页
            2.2.1 不同类型场点检测第42-43页
            2.2.2 不同季节检测第43页
            2.2.3 不同群体检测第43-44页
            2.2.4 不同地区检测第44页
        2.3 规模场风险因素分析第44-46页
            2.3.1 单因素分析第44-45页
            2.3.2 logistic回归结果第45-46页
    3 讨论第46-50页
        3.1 不同亚型禽流感流行情况第46-47页
        3.2 不同地区禽流感流行情况第47页
        3.3 不同类型场点禽流感流行情况第47页
        3.4 禽流感的季节性第47-48页
        3.5 不同群体禽流感分布第48页
        3.6 野鸟禽流感流行情况第48-49页
        3.7 风险因素分析第49-50页
第三章 一起H5N6亚型高致病性禽流感疫情的紧急流行病学调查第50-58页
    1 材料与方法第50-51页
        1.1 材料来源第50页
        1.2 病例定义第50-51页
            1.2.1 疑似病例第50-51页
            1.2.2 确诊病例第51页
        1.3 方法第51页
            1.3.1 描述性流行病学调查第51页
    2 结果第51-55页
        2.1 规模禽场基本情况第51页
        2.2 发病情况第51-52页
        2.3 地理位置及发病经过第52-53页
        2.4 不同栋舍袭击率和病死率第53-54页
        2.5 临床症状和病理变化第54-55页
        2.6 实验室检测第55页
            2.6.1 疫点样品实验室检测第55页
            2.6.2 疫区内样品实验室检测第55页
    3 疫情传入前后原因分析第55-56页
        3.1 疫情发病前后的传播途径第55-56页
            3.1.1 疫情来源第55-56页
            3.1.2 场内传播情况第56页
            3.1.3 疫苗作用第56页
    4 采取的措施及建议第56-58页
        4.1 紧急措施第56-57页
        4.2 防控效果第57页
        4.3 建议第57-58页
第四章 不同亚型禽流感病毒HA基因遗传进化分析第58-68页
    1 材料与方法第58-60页
        1.1 材料第58-59页
            1.1.1 样品来源第58页
            1.1.2 主要试剂第58页
            1.1.3 主要仪器第58-59页
        1.2 方法第59-60页
            1.2.1 样品的处理第59页
            1.2.2 引物设计与合成第59页
            1.2.3 RNA提取第59页
            1.2.4 目的基因的扩增及序列测定第59-60页
            1.2.5 病毒分离鉴定第60页
            1.2.6 遗传进化分析第60页
    2 结果第60-65页
        2.1 RT-PCR扩增结果第60页
        2.2 参考实验室结果及命名第60-61页
        2.3 H3亚型禽流感病毒HA基因进化关系第61-62页
        2.4 H5亚型禽流感病毒HA基因进化关系第62-63页
        2.5 H7亚型禽流感病毒HA基因进化关系第63-65页
    3 讨论第65-68页
        3.1 野鸟H3亚型AIV第65页
        3.2 H5N6亚型HPAIV第65-66页
        3.3 H7N9亚型流感病毒第66页
        3.4 H9N2亚型AIV第66-68页
第五章 H5和H9亚型AIV TAQMAN MGB荧光RT第68-77页
    1 材料与方法第68-71页
        1.1 材料第68-69页
            1.1.1 病毒核酸及临床样本第68-69页
            1.1.2 主要试剂第69页
            1.1.3 主要仪器第69页
        1.2 方法第69-71页
            1.2.1 样品处理第69页
            1.2.2 引物、探针的设计与合成第69页
            1.2.3 样品RNA的提取第69-70页
            1.2.4 反应体系和反应条件第70页
            1.2.5 绘制标准曲线第70页
            1.2.6 荧光RT-PCR方法敏感性试验第70页
            1.2.7 荧光RT-PCR方法特异性试验第70页
            1.2.8 重复性试验第70页
            1.2.9 商品化试剂盒检测第70-71页
            1.2.10 一致性检验(Kappa检验)第71页
            1.2.11 病毒的分离鉴定第71页
    2 结果第71-75页
        2.1 敏感性试验第71-72页
        2.2 特异性试验第72-73页
        2.3 标准曲线绘制第73-74页
        2.4 重复性试验第74页
        2.5 一致性检验第74-75页
            2.5.1 H5亚型一致性检验第74页
            2.5.2 H9亚型一致性检验第74-75页
        2.6 病毒的分离鉴定第75页
    3 讨论第75-77页
结论第77-78页
致谢第78-79页
参考文献第79-85页
作者简介第85-86页
第一导师简介第86-87页
第二导师简介第87-88页

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