| 摘要 | 第4-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 缩略词 | 第13-15页 |
| 前言 | 第15-18页 |
| 第一章 MiR-30a对脐带MSCs生长状况影响的分析 | 第18-33页 |
| 1.1 引言 | 第18页 |
| 1.2 实验材料 | 第18-19页 |
| 1.2.1 实验对象 | 第18-19页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第19页 |
| 1.2.3 主要仪器设备 | 第19页 |
| 1.3 实验方法 | 第19-25页 |
| 1.3.1 脐带组织来源间充质干细胞的获取与分离培养 | 第19-20页 |
| 1.3.2 Lipofectamine~(?)2000转染MSCs高表达miR-30a | 第20页 |
| 1.3.3 流式细胞术检测MSCs表面标志的表达 | 第20-21页 |
| 1.3.4 Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡 | 第21页 |
| 1.3.5 CCK-8法检测细胞活力 | 第21-22页 |
| 1.3.6 细胞周期的检测 | 第22页 |
| 1.3.7 实时荧光定量PCR分析相关因子mRNA表达水平 | 第22-24页 |
| 1.3.8 Western blot检测相关蛋白的表达水平 | 第24页 |
| 1.3.9 数据统计分析 | 第24-25页 |
| 1.4 实验结果与分析 | 第25-33页 |
| 1.4.1 成功获取脐带组织来源MSCs | 第25页 |
| 1.4.2 MiR-30a在子痫前期患者的脐带组织及MSCs中异常高表达 | 第25-26页 |
| 1.4.3 高表达miR-30a对MSCs形态及表型没有影响 | 第26-28页 |
| 1.4.4 高表达miR-30a对MSCs细胞凋亡与活力没有影响 | 第28-29页 |
| 1.4.5 高表达miR-30a引起MSCs细胞周期的阻滞 | 第29-32页 |
| 1.4.7 讨论 | 第32-33页 |
| 第二章 MiR-30a调控MSCs免疫调节功能的机制 | 第33-50页 |
| 2.1 引言 | 第33-35页 |
| 2.2 实验材料 | 第35-36页 |
| 2.2.1 实验对象 | 第35页 |
| 2.2.2 主要试剂 | 第35页 |
| 2.2.3 主要仪器设备 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-40页 |
| 2.3.1 脐带MSCs的分离与培养 | 第36页 |
| 2.3.2 MicroRNA片段与干扰片段的转染 | 第36-37页 |
| 2.3.3 实时荧光定量PCR分析相关基因mRNA的表达水平 | 第37-38页 |
| 2.3.4 Western blot检测相关蛋白的表达 | 第38-39页 |
| 2.3.5 ELISA检测MSCs培养上清中IL-6的表达 | 第39页 |
| 2.3.6 Dual Luciferase Reporter Gene Assay检测miR-30a与TAB3的3'UTR的靶向关系 | 第39-40页 |
| 2.3.7 数据统计分析 | 第40页 |
| 2.4 实验结果与分析 | 第40-50页 |
| 2.4.1 高表达miR-30a抑制IL-1β诱导的IL-6、COX2和IL-8的表达 | 第40-42页 |
| 2.4.2 高表达miR-30a减弱MSCs对巨噬细胞的免疫抑制作用 | 第42-44页 |
| 2.4.3 高表达miR-30a抑制IL-1β介导的NF-κB和JNK通路的活化 | 第44-45页 |
| 2.4.4 高表达miR-30a抑制TAB3的表达 | 第45-46页 |
| 2.4.5 TAB3是miR-30a调控MSCs免疫抑制功能的关键靶点 | 第46-48页 |
| 2.4.6 讨论 | 第48-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 硕士期间科研成果 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 感谢以下基金的资助 | 第61-62页 |
