致谢 | 第4-10页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
摘要 | 第12-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-28页 |
1 蔗糖的合成 | 第14页 |
2 蔗糖的运输 | 第14-23页 |
2.1 韧皮部结构及功能 | 第15页 |
2.2 蔗糖的运输 | 第15-17页 |
2.2.1 蔗糖在源端的装载 | 第15-16页 |
2.2.2 蔗糖在韧皮部的运输 | 第16-17页 |
2.2.3 蔗糖在库端的卸载 | 第17页 |
2.3 蔗糖转运蛋白 | 第17-23页 |
2.3.1 蔗糖转运蛋白家族及分类 | 第17页 |
2.3.2 蔗糖转运蛋白的结构 | 第17-20页 |
2.3.3 SUT转运动力学和底物亲和性 | 第20-21页 |
2.3.4 SUT基因的表达模式 | 第21-22页 |
2.3.5 SUT蛋白的亚细胞定位 | 第22页 |
2.3.6 SUT基因的生理功能 | 第22-23页 |
2.3.7 新型蔗糖转运载体—SWEET蛋白 | 第23页 |
3 蔗糖的分解 | 第23-25页 |
4 韧皮部蔗糖运输路径的研究方法 | 第25-26页 |
4.1 超微结构观察 | 第25页 |
4.2 活细胞荧光示踪与激光扫描共聚焦显微技术 | 第25页 |
4.3 胶体金免疫定位技术 | 第25-26页 |
4.4 绿色荧光蛋白的应用 | 第26页 |
4.5 分子克隆与其他方法 | 第26页 |
5 高通量测序技术在转录组学研究中的应用 | 第26-27页 |
6 本研究的目的与意义 | 第27-28页 |
第二章 牡丹形态及栽培生理研究 | 第28-43页 |
引言 | 第28页 |
1 材料与方法 | 第28-29页 |
1.1 试验材料 | 第28页 |
1.2 形态特征指标测量 | 第28-29页 |
1.3 可溶性糖含量测定 | 第29页 |
2 结果与分析 | 第29-41页 |
2.1 盆栽牡丹形态指标的变化 | 第29-31页 |
2.1.1 植株高度(地上高) | 第29页 |
2.1.2 冠幅 | 第29页 |
2.1.3 新枝长 | 第29-31页 |
2.1.4 鳞芽(花蕾)数量 | 第31页 |
2.1.5 花蕾高度 | 第31页 |
2.1.6 花蕾直径 | 第31页 |
2.2 牡丹各器官可溶性糖组分变化 | 第31-41页 |
2.2.1 叶中可溶性糖组分变化 | 第31-34页 |
2.2.2 叶柄中可溶性糖组分变化 | 第34页 |
2.2.3 鳞芽(花)中可溶性糖组分变化 | 第34-36页 |
2.2.4 新茎中可溶性糖组分变化 | 第36-37页 |
2.2.5 老茎中可溶性糖组分变化 | 第37-41页 |
2.2.6 根中可溶性糖组分变化 | 第41页 |
3 结论与讨论 | 第41-43页 |
3.1 结论 | 第41-42页 |
3.2 讨论 | 第42-43页 |
第三章 牡丹韧皮部蔗糖转运路径研究 | 第43-70页 |
引言 | 第43页 |
1 材料与方法 | 第43-46页 |
1.1 试验材料 | 第43页 |
1.2 试验方法 | 第43-46页 |
1.2.1 显微结构观察(石蜡切片制备) | 第43-44页 |
1.2.2 超微结构观察 | 第44-45页 |
1.2.2.1 电镜切片制备 | 第44-45页 |
1.2.2.2 胞间连丝密度测定 | 第45页 |
1.2.3 荧光标记引入及观察 | 第45-46页 |
2 结果与分析 | 第46-68页 |
2.1 显微结构观察 | 第46-48页 |
2.1.1 主脉的显微结构 | 第46页 |
2.1.2 叶柄的显微结构 | 第46页 |
2.1.3 新茎韧皮部的显微结构 | 第46-47页 |
2.1.4 老茎韧皮部的显微结构 | 第47-48页 |
2.1.5 嫁接部位显微结构 | 第48页 |
2.1.6 根部的显微结构 | 第48页 |
2.2 CF在韧皮部的转运 | 第48-51页 |
2.2.1 主脉内CF的转运 | 第48页 |
2.2.2 叶柄内CF的转运 | 第48-51页 |
2.2.3 新茎内CF的转运 | 第51页 |
2.2.4 老茎内CF的转运 | 第51页 |
2.2.5 根内CF的转运 | 第51页 |
2.3 韧皮部超微结构观察 | 第51-68页 |
2.3.1 叶片主脉维管束的超微结构 | 第51-55页 |
2.3.2 叶柄维管束的超微结构 | 第55-58页 |
2.3.3 新茎韧皮部的超微结构 | 第58-59页 |
2.3.4 老茎韧皮部的超微结构 | 第59-60页 |
2.3.5 嫁接韧皮部维管束的超微结构 | 第60-61页 |
2.3.6 根部韧皮部的超微结构 | 第61-67页 |
2.3.7 花瓣维管束的超微结构 | 第67-68页 |
3 结论与讨论 | 第68-70页 |
3.1 结论 | 第68页 |
3.2 讨论 | 第68-70页 |
第四章 牡丹蔗糖转运蛋白基因(PsSUT2)的克隆与表达分析 | 第70-98页 |
引言 | 第70-71页 |
1 实验材料与方法 | 第71-79页 |
1.1 试验材料 | 第71页 |
1.2 药品药剂与仪器设备 | 第71-72页 |
1.2.1 试验药品 | 第71页 |
1.2.2 仪器设备 | 第71-72页 |
1.2.3 引物序列 | 第72页 |
1.3 试验方法 | 第72-79页 |
1.3.1 总RNA提取及质量检测 | 第72页 |
1.3.2 cDNA第一链合成 | 第72-73页 |
1.3.3 PsSUT2基因中间片段克隆 | 第73-75页 |
1.3.3.1 中间片段扩增 | 第73-74页 |
1.3.3.2 中间片段产物回收与纯化 | 第74页 |
1.3.3.3 中间片段与T载体的快速连接 | 第74页 |
1.3.3.4 感受态细胞的转化与鉴定 | 第74-75页 |
1.3.4 PsSUT2基因 3'-RACE克隆 | 第75页 |
1.3.4.1 引物设计 | 第75页 |
1.3.4.2 巢式PCR扩增 | 第75页 |
1.3.5 PsSUT2基因 5'-RACE克隆 | 第75-77页 |
1.3.5.1 引物设计 | 第75页 |
1.3.5.2 5'-RACE-Ready cDNA的合成 | 第75-76页 |
1.3.5.3 巢式PCR扩增 | 第76-77页 |
1.3.6 PsSUT2基因序列分析 | 第77-78页 |
1.3.7 实时荧光定量表达分析 | 第78-79页 |
1.3.7.1 RNA提取 | 第78页 |
1.3.7.2 cDNA的合成 | 第78页 |
1.3.7.3 引物设计 | 第78页 |
1.3.7.4 RT-qPCR反应条件 | 第78-79页 |
1.3.7.5 RT-qPCR表达分析 | 第79页 |
2 结果与分析 | 第79-95页 |
2.1 RNA质量及浓度检测 | 第79页 |
2.2 PsSUT2基因克隆与序列分析 | 第79-84页 |
2.2.1 PsSUT2基因中间片段克隆与序列分析 | 第79-80页 |
2.2.2 PsSUT2基因 3'-RACE克隆与序列分析 | 第80-81页 |
2.2.3 PsSUT2基因 5'-RACE克隆与序列分析 | 第81-82页 |
2.2.4 PsSUT2基因ORF阅读框分析 | 第82-84页 |
2.3 牡丹SUT基因同源性与进化树分析 | 第84-86页 |
2.3.1 PsSUT2基因同源性与进化树分析 | 第85-86页 |
2.4 PsSUT2基因蛋白质结构预测 | 第86-88页 |
2.5 实时荧光定量分析 | 第88-95页 |
2.5.1 总RNA的提取 | 第88页 |
2.5.2 内参引物与PsSUT2基因特异引物的筛选 | 第88-90页 |
2.5.2.1 内参引物的筛选 | 第88-89页 |
2.5.2.2 PsSUT2特异引物的筛选 | 第89-90页 |
2.5.3 荧光定量溶解曲线和扩增曲线 | 第90-91页 |
2.5.4 PsSUT2基因的相对表达量 | 第91-95页 |
2.5.4.1 叶 | 第91-92页 |
2.5.4.2 叶柄 | 第92-93页 |
2.5.4.3 鳞芽(花瓣) | 第93页 |
2.5.4.4 新茎 | 第93页 |
2.5.4.5 老茎 | 第93-95页 |
2.5.4.6 根 | 第95页 |
3 结论与讨论 | 第95-98页 |
3.1 结论 | 第95-96页 |
3.2 讨论 | 第96-98页 |
第五章 牡丹蔗糖转运及代谢相关基因的挖掘 | 第98-112页 |
引言 | 第98页 |
1 材料与方法 | 第98-100页 |
1.1 材料 | 第98页 |
1.2 实验方法 | 第98-100页 |
1.2.1 总RNA提取及检测 | 第98-99页 |
1.2.2 数据分析 | 第99-100页 |
1.2.2.1 Unigene功能注释 | 第99页 |
1.2.2.2 Unigene表达量计算 | 第99页 |
1.2.2.3 差异表达基因筛选 | 第99-100页 |
2 结果与分析 | 第100-109页 |
2.1 测序结果及质量评估 | 第100页 |
2.2 转录组的数据拼接 | 第100-101页 |
2.3 Unigene功能注释 | 第101-104页 |
2.3.1 unigene的COG分类 | 第101-102页 |
2.3.2 unigene的GO分类 | 第102-103页 |
2.3.3 unigene NR注释分析 | 第103-104页 |
2.4 差异表达基因功能注释和富集性分析 | 第104-109页 |
2.4.1 差异表达基因筛选与注释 | 第104-105页 |
2.4.2 差异表达基因的COG注释 | 第105页 |
2.4.3 差异基因GO注释分析 | 第105-106页 |
2.4.4 差异基因KEGG注释 | 第106-107页 |
2.4.5 差异表达基因KEGG通路富集性分析 | 第107-108页 |
2.4.6 蔗糖转运及代谢相关差异表达基因的挖掘 | 第108-109页 |
3 结论与讨论 | 第109-112页 |
3.1 结论 | 第109-110页 |
3.2 讨论 | 第110-112页 |
参考文献 | 第112-126页 |
ABSTRACT | 第126-127页 |
攻读学位期间科研成果 | 第128页 |