缩略词 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
第一部分 缺氧/复氧损伤体外模型的建立及二苯乙烯苷抗炎、抗氧化应激损伤活性的初步观察 | 第12-36页 |
前言 | 第12-17页 |
1 缺氧/复氧损伤 | 第12-13页 |
1.1 氧化应激 | 第12页 |
1.2 氧张力平衡与缺氧/复氧损伤 | 第12-13页 |
1.3 缺氧/复氧损伤相关疾病 | 第13页 |
2 缺氧/复氧损伤与支气管上皮细胞凋亡 | 第13-14页 |
3 二苯乙烯类化合物研究背景 | 第14-15页 |
4 研究目标 | 第15页 |
5 技术路线 | 第15-17页 |
材料与方法 | 第17-27页 |
1 实验材料 | 第17-21页 |
1.1 细胞和细胞系 | 第17页 |
1.2 试剂 | 第17-18页 |
1.3 仪器设备 | 第18-19页 |
1.4 常用试剂配制 | 第19-21页 |
2 实验方法 | 第21-27页 |
2.1 细胞处理 | 第21-22页 |
2.2 Griess法检测LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO生成 | 第22-23页 |
2.3 MTT法检测化合物对小鼠腹腔巨噬细胞毒性 | 第23页 |
2.4 MTT法检测化合物对BEAS-2B细胞毒性 | 第23页 |
2.5 ELISA法检测LPS刺激BEAS-2B细胞炎症因子水平 | 第23-24页 |
2.6 缺氧/复氧(H/R)损伤体外模型的建立 | 第24-25页 |
2.7 MTT法检测TSG对H/R处理后的BEAS-2B细胞存活率的影响 | 第25页 |
2.8 荧光探针DCFH-DA检测ROS | 第25-26页 |
2.9 试剂盒检测总SOD活性和MDA生成 | 第26页 |
2.10 统计学方法 | 第26-27页 |
结果 | 第27-35页 |
1 TSG对小鼠腹腔巨噬细胞和BEAS-2B细胞毒性 | 第27-28页 |
2 TSG对LPS刺激小鼠腹腔巨噬细胞NO生成的影响 | 第28页 |
3 TSG对LPS刺激BEAS-2B细胞TNF-α、IL-6、IL-1β生成的影响 | 第28-30页 |
4 H/R损伤体外模型的建立 | 第30-31页 |
5 TSG对H/R损伤的BEAS-2B细胞存活率的影响 | 第31-32页 |
6 TSG对H/R诱导BEAS-2B细胞ROS生成的影响 | 第32-33页 |
7 TSG对H/R诱导BEAS-2B细胞MDA生成和SOD活性的影响 | 第33-35页 |
总结 | 第35-36页 |
第二部分 二苯乙烯苷对支气管上皮细胞缺氧/复氧损伤保护作用的机理研究 | 第36-64页 |
前言 | 第36-40页 |
1 氧化应激诱导的细胞凋亡 | 第36-38页 |
1.1 线粒体介导的细胞凋亡 | 第36-37页 |
1.2 死亡受体途径介导的细胞凋亡 | 第37页 |
1.3 内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)反应途径 | 第37-38页 |
2 MAPK信号通路 | 第38页 |
3 研究目标 | 第38-39页 |
4 技术路线 | 第39-40页 |
材料与方法 | 第40-49页 |
1 实验材料 | 第40-43页 |
1.1 细胞系 | 第40页 |
1.2 试剂 | 第40-42页 |
1.3 常用试剂配制 | 第42-43页 |
2 实验方法 | 第43-49页 |
2.1 细胞处理 | 第43-44页 |
2.2 Hoechst染色观察细胞核形态的改变 | 第44页 |
2.3 荧光显微镜观察MCF-7/GFP-Bax细胞Bax至线粒体的转位 | 第44页 |
2.4 荧光探针JC-1检测线粒体膜电位(△φM) | 第44-45页 |
2.5 免疫荧光检测细胞色素C释放 | 第45页 |
2.6 细胞蛋白的提取 | 第45-46页 |
2.7 蛋白浓度的测定 | 第46页 |
2.8 Western Blot法检测蛋白表达水平 | 第46-48页 |
2.9 统计学方法 | 第48-49页 |
结果 | 第49-63页 |
1 TSG对H/R处理的MCF-7/GFP-Bax细胞核形态和Bax转位的影响 | 第49-50页 |
2 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞Bax转位的影响 | 第50-51页 |
3 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞Bax/Bcl-2比值的影响 | 第51-53页 |
4 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞线粒体膜电位的影响 | 第53-54页 |
5 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞细胞色素C释放的影响 | 第54-57页 |
6 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞caspase-9、caspase-3、caspase-8表达的影响 | 第57-60页 |
7 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞HIF-1α、 p53蛋白表达的影响 | 第60-61页 |
8 TSG对H/R处理的BEAS-2B细胞MAPK信号通路相关蛋白表达及磷酸化的影响 | 第61-63页 |
总结 | 第63-64页 |
讨论 | 第64-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
文献综述 | 第71-81页 |
References | 第78-81页 |
硕士在读期间发表与待发表的文章 | 第81-82页 |
致谢 | 第82-83页 |