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两个玉米纹枯病病原诱导启动子中核心顺式作用元件的鉴定

符号说明第4-9页
中文摘要第9-11页
ABSTRACT第11-12页
1. 前言第13-29页
    1.1 玉米纹枯病第13-19页
        1.1.1 玉米纹枯病的病害症状及危害时期第13-14页
        1.1.2 玉米纹枯病的病原学特性第14页
        1.1.3 玉米纹枯病原的生理学特性第14-15页
        1.1.4 玉米纹枯病的侵染循环和侵染途径第15页
        1.1.5 玉米纹枯病的致病机制第15-16页
        1.1.6 纹枯病菌寄主抗病机制第16-17页
        1.1.7 玉米纹枯病抗病种质资源的研究第17-18页
        1.1.8 玉米纹枯病的抗性基因第18-19页
    1.2 植物启动子第19-28页
        1.2.1 植物启动子的结构和特征第19-20页
            1.2.1.1 转录起始位点第19页
            1.2.1.2 TATA box第19-20页
            1.2.1.3 CAAT box第20页
            1.2.1.4 GC box第20页
        1.2.2 植物启动子的分类第20-24页
            1.2.2.1 组成型启动子第20-21页
            1.2.2.2 组织特异性启动子第21-22页
            1.2.2.3 诱导型启动子第22-24页
                1.2.2.3.1 病原诱导表达启动子第22-23页
                1.2.2.3.2 其他类型诱导表达启动子第23-24页
        1.2.3 启动子的预测及克隆方法第24-25页
            1.2.3.1 启动子预测工具第24-25页
            1.2.3.2 启动子的克隆第25页
        1.2.4 病原诱导启动子的研究方法第25-27页
            1.2.4.1 瞬时表达分析法第25-26页
            1.2.4.2 稳定表达分析第26页
            1.2.4.3 缺失和突变分析第26页
            1.2.4.4 酵母单杂交技术第26-27页
            1.2.4.5 凝胶阻滞技术第27页
        1.2.5 病原诱导启动子的应用第27-28页
    1.3 本研究的目的和意义第28-29页
2. 材料与方法第29-34页
    2.1 水稻及烟草品种第29页
    2.2 菌株和载体第29页
    2.3 各载体的构建第29-32页
        2.3.1 序列克隆引物的设计第29页
        2.3.2 DNA序列的扩增体系第29-30页
        2.3.3 PCR产物的切胶回收第30页
        2.3.4 载体、目的片段的酶切、纯化及连接第30-31页
        2.3.5 连接产物的热激转化第31页
        2.3.6 质粒的提取第31页
        2.3.7 质粒的电击转化第31-32页
    2.4 农杆菌介导的遗传转化第32-33页
        2.4.1 水稻的遗传转化第32页
        2.4.2 启动子瞬时表达系统第32-33页
    2.5 转基因植株阳性检测第33页
        2.5.1 植物基因组DNA的提取第33页
        2.5.2 PCR阳性检测第33页
    2.6 纹枯病菌接种第33页
    2.7 GFP的定性及定量分析第33-34页
3. 结果与分析第34-44页
    3.1 GRMZM2G315431和GRMZM2G174449基因启动子纹枯病病原诱导核心区域的序列相似性分析第34页
    3.2 GT/CTGA顺式作用元件的分析鉴定第34-40页
        3.2.1 GT/CTGA顺式作用元件系列载体的构建第34-35页
        3.2.2 GT/CTGA元件在烟草中瞬时表达后对YWK196的诱导响应第35-37页
        3.2.3 GTTGA元件转基因水稻的阳性鉴定第37-38页
        3.2.4 GTTGA元件在转基因水稻中稳定表达后对YWK196的诱导响应第38页
        3.2.5 不同重复倍数对GTTGA元件病原诱导活性的影响第38-40页
    3.3 TATA/TT顺式作用元件的分析鉴定第40-44页
        3.3.1 TATA/TT顺式作用元件系列载体的构建第40-41页
        3.3.2 TATA/TT元件在烟草中瞬时表达后对YWK196的诱导响应第41-42页
        3.3.3 TATAT元件转基因水稻的阳性鉴定第42-43页
        3.3.4 TATAT元件在转基因水稻中稳定表达后对YWK196的诱导响应第43-44页
4. 讨论第44-47页
    4.1 新的纹枯病菌核心顺式作用元件的鉴定第44-45页
    4.2 玉米纹枯病抗病机制的多样性第45页
    4.3 纹枯病菌诱导顺式作用元件的应用前景第45-47页
参考文献第47-58页
致谢第58-59页
附录第59-65页
    附录 1:常规培养基及溶液配制第59-65页
    附录 2:在读期间发表论文及专利目录第65页

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