| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词名词表 | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-20页 |
| 1.1 植物角质层相关研究进展 | 第13-14页 |
| 1.1.1 角质层的化学组成和结构 | 第13页 |
| 1.1.2 角质层角质的合成与运输 | 第13-14页 |
| 1.2 植物蜡质的相关进展 | 第14-17页 |
| 1.2.1 外层蜡质的合成过程 | 第14-15页 |
| 1.2.2 内层蜡质的合成 | 第15页 |
| 1.2.3 蜡质的分泌途径 | 第15-16页 |
| 1.2.4 蜡质合成与调控相关基因 | 第16-17页 |
| 1.3 环境对角质层蜡质的影响 | 第17-18页 |
| 1.4 泛素化途径 | 第18-19页 |
| 1.4.1 泛素及泛素化过程 | 第18-19页 |
| 1.4.2 泛素化酶 | 第19页 |
| 1.5 本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 2 材料与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第20页 |
| 2.1.2 菌株和质粒 | 第20页 |
| 2.1.3 实验所用引物 | 第20页 |
| 2.1.4 主要试剂盒与生化试剂 | 第20-21页 |
| 2.2 甘蓝型油菜BnCLG1基因启动子的克隆 | 第21-24页 |
| 2.2.1 基因组DNA的提取 | 第21页 |
| 2.2.2 BnCLG1启动子的扩增与回收 | 第21-23页 |
| 2.2.3 BnCLG1基因启动子的表达载体构建 | 第23-24页 |
| 2.2.4 BnCLG1基因启动子元件分析 | 第24页 |
| 2.3 甘蓝型油菜BnCLG1的克隆与序列分析 | 第24-28页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第24页 |
| 2.3.2 单链cDNA的合成 | 第24-25页 |
| 2.3.3 BnCLG1全长CDS序列的扩增与回收 | 第25-26页 |
| 2.3.4 BnCLG1超表达载体的构建 | 第26-27页 |
| 2.3.5 BnCLG1基因的生物信息学分析 | 第27-28页 |
| 2.4 农杆菌介导的拟南芥遗传转化与阳性检测 | 第28-30页 |
| 2.4.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第28页 |
| 2.4.2 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的转化 | 第28页 |
| 2.4.3 拟南芥植株的种植 | 第28-29页 |
| 2.4.4 农杆菌侵染液的制备与转化 | 第29页 |
| 2.4.5 转基因幼苗的PCR阳性鉴定 | 第29-30页 |
| 2.5 BnCLG1启动子在拟南芥中的GUS组织化学定位 | 第30-31页 |
| 2.6 BnCLG1的表达分析 | 第31-32页 |
| 2.6.1 BnCLG1A和BnCLG1C基因的RT-PCR | 第31页 |
| 2.6.2 BnCLG1A和BnCLG1C基因在干旱、盐逆境胁迫下和不同激素(GA3、ABA、SA)处理的Real-time PCR | 第31-32页 |
| 2.7 BnCLG1超表达拟南芥的表型观察与抗旱性分析 | 第32-33页 |
| 2.7.1 表型观察 | 第32-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-52页 |
| 3.1 甘蓝型油菜BnCLG1基因启动子的克隆与表达载体构建 | 第33-34页 |
| 3.2 甘蓝型油菜BnCLG1启动子元件分析 | 第34-35页 |
| 3.3 甘蓝型油菜BnCLG1启动子的GUS组织化学定位 | 第35-37页 |
| 3.4 甘蓝型油菜BnCLG1基因的克隆和序列分析 | 第37-45页 |
| 3.4.1 BnCLG1A、BnCLG1C蛋白的理化性质分析 | 第37-38页 |
| 3.4.2 BnCLG1A、BnCLG1C结构域和二、三级结构的预测 | 第38-40页 |
| 3.4.3 BnCLG1A、BnCLG1C信号肽及亚细胞定位的预测 | 第40-42页 |
| 3.4.4 BnCLG1A、BnCLG1C多序列比对和进化分析 | 第42-44页 |
| 3.4.5 BnCLG1A、BnCLG1C的功能预测 | 第44-45页 |
| 3.5 甘蓝型油菜BnCLG1基因的超表达载体构建和遗传转化 | 第45-47页 |
| 3.5.1 BnCLG1表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.5.2 BnCLG1基因超表达载体的遗传转化和转基因阳性检测 | 第46-47页 |
| 3.6 BnCLG1基因的表达分析 | 第47-50页 |
| 3.6.1 BnCLG1基因在不同组织的时空表达 | 第47-48页 |
| 3.6.2 BnCLG1基因在非生物胁迫与激素处理下的表达 | 第48-50页 |
| 3.7 BnCLG1基因超表达表型观察 | 第50-52页 |
| 4 讨论与结论 | 第52-56页 |
| 4.1 BnCLG1基因启动子的分析 | 第52页 |
| 4.2 BnCLG1基因的分析 | 第52-55页 |
| 4.2.1 BnCLG1基因序列及氨基酸序列分析 | 第52-53页 |
| 4.2.2 BnCLG1基因的表达分析 | 第53-55页 |
| 4.3 BnCLG1超表达植株的表型变化 | 第55页 |
| 4.4 结论 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-62页 |
| 附录一 | 第62-64页 |
| 附录二 | 第64-65页 |
| 附录三 | 第65-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
