摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
文献综述 | 第12-22页 |
第一章 山羊地方性鼻内肿瘤病毒研究进展 | 第12-22页 |
1.1 山羊地方性鼻内肿瘤病毒概述 | 第12页 |
1.2 ENTV一般生物学特性 | 第12-16页 |
1.2.1 ENTV的分类地位 | 第12-13页 |
1.2.2 ENTV形态结构 | 第13-14页 |
1.2.3 ENTV的理化特性 | 第14页 |
1.2.4 ENTV的基因组结构及其编码的蛋白 | 第14-16页 |
1.3 ENTV致病机理 | 第16-18页 |
1.4 ENTV与JSRV/ERVs | 第18-19页 |
1.5 山羊ENA的流行现状及危害 | 第19-20页 |
1.5.1 山羊ENA在中国的流行状况 | 第19页 |
1.5.2 山羊ENA对养羊业的危害 | 第19-20页 |
1.5.3 山羊ENA诊断和防治 | 第20页 |
1.6 本研究的目的及意义 | 第20-22页 |
试验研究 | 第22-56页 |
第二章 陕西省山羊地方性鼻内腺瘤的诊断 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 病料和毒株 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
2.2 方法 | 第23-26页 |
2.2.1 流行情况调查 | 第23页 |
2.2.2 剖检病变 | 第23页 |
2.2.3 肿瘤组织石蜡切片的制作和染色观察 | 第23-24页 |
2.2.4 病毒的纯化 | 第24页 |
2.2.5 病毒RNA提取 | 第24页 |
2.2.6 病毒总RNA中基因组DNA清除和反转录 | 第24-25页 |
2.2.7 ENTV-2 的RT-PCR检测方法的建立 | 第25-26页 |
2.3 结果 | 第26-29页 |
2.3.1 流行特点及临床症状 | 第26-27页 |
2.3.2 病理切片观察 | 第27页 |
2.3.3 ENTV-2 的RT-PCR检测方法的建立及退火温度优化 | 第27-28页 |
2.3.4 RT-PCR方法的特异性、敏感性、重复性 | 第28-29页 |
2.3.5 临床样品的检测结果 | 第29页 |
2.4 讨论 | 第29-30页 |
2.5 小结 | 第30-31页 |
第三章 山羊地方性鼻内肿瘤病毒陕西株全基因组克隆及序列分析 | 第31-45页 |
3.1 材料 | 第31页 |
3.1.1 病料 | 第31页 |
3.1.2 主要试剂 | 第31页 |
3.1.3 主要仪器 | 第31页 |
3.1.4 序列相关软件 | 第31页 |
3.2 方法 | 第31-34页 |
3.2.1 病毒的纯化 | 第31页 |
3.2.2 病毒RNA提取 | 第31-32页 |
3.2.3 病毒总RNA中基因组DNA清除和反转录 | 第32页 |
3.2.4 ENTV-2 全基因克隆引物的设计 | 第32页 |
3.2.5 ENTV-2 全基因克隆 | 第32-33页 |
3.2.6 测序、拼接及序列分析 | 第33-34页 |
3.3 结果 | 第34-43页 |
3.3.1 ENTV全基因分段扩增 | 第34页 |
3.3.2 ENTV全基因分段扩增分段克隆 | 第34-35页 |
3.3.3 ENTV全基因拼接及序列分析 | 第35-43页 |
3.4 讨论 | 第43-44页 |
3.5 小结 | 第44-45页 |
第四章 ENTV-2 Gag和Su蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备 | 第45-56页 |
4.1 材料 | 第45-46页 |
4.1.1 病毒、菌种、质粒、实验动物 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45-46页 |
4.1.3 主要仪器 | 第46页 |
4.2 方法 | 第46-50页 |
4.2.1 目的基因的扩增和表达载体的构建 | 第46-48页 |
4.2.2 Gag、Su蛋白的原核表达 | 第48页 |
4.2.3 Gag、Su蛋白的纯化、复性 | 第48页 |
4.2.4 动物免疫和多克隆抗体制备 | 第48-49页 |
4.2.5 Western blot分析 | 第49-50页 |
4.3 结果 | 第50-54页 |
4.3.1 PCR扩增和重组质粒双酶切鉴定结果 | 第50页 |
4.3.2 重组蛋白诱导表达条件的优化 | 第50-52页 |
4.3.3 重组蛋白纯化结果 | 第52-53页 |
4.3.4 Western blot分析结果 | 第53-54页 |
4.4 讨论 | 第54-55页 |
4.5 小结 | 第55-56页 |
结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-61页 |
缩略词(Abbreviation Index) | 第61-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
作者简介 | 第63页 |