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山羊地方性鼻内肿瘤病毒陕西株序列分析及Gag和Su蛋白多克隆抗体的制备

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
文献综述第12-22页
    第一章 山羊地方性鼻内肿瘤病毒研究进展第12-22页
        1.1 山羊地方性鼻内肿瘤病毒概述第12页
        1.2 ENTV一般生物学特性第12-16页
            1.2.1 ENTV的分类地位第12-13页
            1.2.2 ENTV形态结构第13-14页
            1.2.3 ENTV的理化特性第14页
            1.2.4 ENTV的基因组结构及其编码的蛋白第14-16页
        1.3 ENTV致病机理第16-18页
        1.4 ENTV与JSRV/ERVs第18-19页
        1.5 山羊ENA的流行现状及危害第19-20页
            1.5.1 山羊ENA在中国的流行状况第19页
            1.5.2 山羊ENA对养羊业的危害第19-20页
            1.5.3 山羊ENA诊断和防治第20页
        1.6 本研究的目的及意义第20-22页
试验研究第22-56页
    第二章 陕西省山羊地方性鼻内腺瘤的诊断第22-31页
        2.1 材料第22-23页
            2.1.1 病料和毒株第22页
            2.1.2 主要试剂第22页
            2.1.3 主要仪器第22-23页
        2.2 方法第23-26页
            2.2.1 流行情况调查第23页
            2.2.2 剖检病变第23页
            2.2.3 肿瘤组织石蜡切片的制作和染色观察第23-24页
            2.2.4 病毒的纯化第24页
            2.2.5 病毒RNA提取第24页
            2.2.6 病毒总RNA中基因组DNA清除和反转录第24-25页
            2.2.7 ENTV-2 的RT-PCR检测方法的建立第25-26页
        2.3 结果第26-29页
            2.3.1 流行特点及临床症状第26-27页
            2.3.2 病理切片观察第27页
            2.3.3 ENTV-2 的RT-PCR检测方法的建立及退火温度优化第27-28页
            2.3.4 RT-PCR方法的特异性、敏感性、重复性第28-29页
            2.3.5 临床样品的检测结果第29页
        2.4 讨论第29-30页
        2.5 小结第30-31页
    第三章 山羊地方性鼻内肿瘤病毒陕西株全基因组克隆及序列分析第31-45页
        3.1 材料第31页
            3.1.1 病料第31页
            3.1.2 主要试剂第31页
            3.1.3 主要仪器第31页
            3.1.4 序列相关软件第31页
        3.2 方法第31-34页
            3.2.1 病毒的纯化第31页
            3.2.2 病毒RNA提取第31-32页
            3.2.3 病毒总RNA中基因组DNA清除和反转录第32页
            3.2.4 ENTV-2 全基因克隆引物的设计第32页
            3.2.5 ENTV-2 全基因克隆第32-33页
            3.2.6 测序、拼接及序列分析第33-34页
        3.3 结果第34-43页
            3.3.1 ENTV全基因分段扩增第34页
            3.3.2 ENTV全基因分段扩增分段克隆第34-35页
            3.3.3 ENTV全基因拼接及序列分析第35-43页
        3.4 讨论第43-44页
        3.5 小结第44-45页
    第四章 ENTV-2 Gag和Su蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备第45-56页
        4.1 材料第45-46页
            4.1.1 病毒、菌种、质粒、实验动物第45页
            4.1.2 主要试剂第45-46页
            4.1.3 主要仪器第46页
        4.2 方法第46-50页
            4.2.1 目的基因的扩增和表达载体的构建第46-48页
            4.2.2 Gag、Su蛋白的原核表达第48页
            4.2.3 Gag、Su蛋白的纯化、复性第48页
            4.2.4 动物免疫和多克隆抗体制备第48-49页
            4.2.5 Western blot分析第49-50页
        4.3 结果第50-54页
            4.3.1 PCR扩增和重组质粒双酶切鉴定结果第50页
            4.3.2 重组蛋白诱导表达条件的优化第50-52页
            4.3.3 重组蛋白纯化结果第52-53页
            4.3.4 Western blot分析结果第53-54页
        4.4 讨论第54-55页
        4.5 小结第55-56页
结论第56-57页
参考文献第57-61页
缩略词(Abbreviation Index)第61-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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