| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-21页 |
| ·Bt的生物学特征 | 第10-11页 |
| ·Bt研究历史 | 第11-12页 |
| ·cry基因的克隆 | 第12-13页 |
| ·cry基因的定位 | 第13-14页 |
| ·Cry毒素晶体的装配 | 第14-15页 |
| ·Cry晶体毒素的结构 | 第15-16页 |
| ·Cry毒素的活性机制 | 第16-18页 |
| ·cry基因的应用 | 第18-20页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 第二章 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·实验材料 | 第21-22页 |
| ·菌株与质粒 | 第21页 |
| ·培养基、抗生素和主要试剂 | 第21-22页 |
| ·实验仪器 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-32页 |
| ·光学显微镜下观察 | 第22-23页 |
| ·扫描电镜观察 | 第23页 |
| ·Bt S2160-1菌株总DNA的提取 | 第23页 |
| ·Bt质粒DNA的提取 | 第23-24页 |
| ·PCR-RFLP鉴定 | 第24-25页 |
| ·cry30部分序列克隆 | 第25页 |
| ·感受态的制备与转化 | 第25页 |
| ·基因文库的构建及筛选 | 第25-27页 |
| ·SON-PCR克隆cry30Ga2 | 第27-28页 |
| ·核苷酸序列和氨基酸序列分析 | 第28页 |
| ·构建表达载体 | 第28-29页 |
| ·E.coli.BL21(DE3)中诱导表达和SDS-PAGE分析 | 第29-32页 |
| 第三章 结果与分析 | 第32-50页 |
| ·光学显微镜镜检 | 第32页 |
| ·扫描电镜观察 | 第32-33页 |
| ·提取总DNA的质量鉴定 | 第33页 |
| ·提取Bt质粒DNA的质量鉴定 | 第33-34页 |
| ·质粒DNA和总DNA进行PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR-RFLP鉴定 | 第35-36页 |
| ·Bt质粒DNA的酶切 | 第36-37页 |
| ·构建基因文库 | 第37-39页 |
| ·SON-PCR克隆基因全长序列 | 第39-41页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第41-44页 |
| ·Cry30Ga2氨基酸序列疏水性分析 | 第44-45页 |
| ·构建Cry30Ga2相关蛋白氨基酸序列系统进化树 | 第45-46页 |
| ·Cry30Ga2蛋白的三级结构预测 | 第46-47页 |
| ·克隆Cry30Ga2基因全长序列 | 第47-48页 |
| ·Cry30Ga2基因在E.coli.BL21(DE3)中表达 | 第48页 |
| ·SDS-PAGE分析 | 第48-50页 |
| 第四章 讨论 | 第50-53页 |
| ·cry30Ga2基因全序列的获取 | 第50-51页 |
| ·cry30Ga2基因的克隆 | 第51-52页 |
| ·研究展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-65页 |
| 读学位期间发表论文及研究成果情况 | 第65页 |
