| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-26页 |
| ·甲基营养菌简介 | 第10-16页 |
| ·L-丝氨酸的生产 | 第16-19页 |
| ·质粒转座子pTnMod-RKm'简介 | 第19-22页 |
| ·基因serA简介 | 第22-23页 |
| ·本课题的研究背景 | 第23-24页 |
| ·本课题的研究目的及意义 | 第24页 |
| ·技术路线 | 第24-26页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第26-45页 |
| ·本实验所用菌株及质粒 | 第26-27页 |
| ·培养基和抗生素 | 第27-29页 |
| ·菌株培养及保存 | 第29页 |
| ·实验用缓冲液及溶液 | 第29-30页 |
| ·甲基营养菌MB200耐受L-丝氨酸突变体的筛选 | 第30-31页 |
| ·突变体基因的克隆及分析 | 第31-32页 |
| ·甲基营养菌基因组DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
| ·DNA分了的限制性酶切及纯化、连接 | 第33-35页 |
| ·转化 | 第35-37页 |
| ·质粒DAN提取 | 第37-38页 |
| ·serA及serA/△77的PCR扩增 | 第38页 |
| ·三亲本接合 | 第38-39页 |
| ·三磷酸甘油酸脱氢酶(PGDH)酶活测定 | 第39-43页 |
| ·菌株产L-丝氨酸静息细胞反应体系制备 | 第43-45页 |
| 第三章 结果与分析 | 第45-64页 |
| ·甲基营养菌MB200耐受L-丝氨酸的情况分析 | 第45页 |
| ·甲基营养菌MB200耐受L-丝氨酸突变体的筛选 | 第45页 |
| ·突变体基因的克隆及序列分析 | 第45-53页 |
| ·甲基营养菌MB200 PGDH酶活的测定 | 第53-54页 |
| ·重组菌株MB200/pCM80serA的构建 | 第54-58页 |
| ·重组菌株MB200/pCM80serA△77的构建 | 第58-61页 |
| ·重组菌株MB200/pCM80serA及MB200/pCM80serA△77 PGDH酶活测定及抗反馈抑制效应检测 | 第61-62页 |
| ·甲基营养菌M.sp MB200及重组体MB200/pCM80serA、MB200/pCM80serA△77发酵产L-丝氨酸情况分析 | 第62-64页 |
| 第四章 总结与讨论 | 第64-67页 |
| ·总结 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-74页 |
| 附录一 实验用引物 | 第74-75页 |
| 附录二 实验用仪器和设备 | 第75-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文 | 第77页 |
