| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 甘蓝型油菜FAD2基因研究进展 | 第10-12页 |
| 1.1.1 油菜FAD2基因与油酸含量的关系 | 第10-11页 |
| 1.1.2 甘蓝型油菜FAD2基因的多拷贝现象 | 第11页 |
| 1.1.3 FAD2基因转录调控研究进展 | 第11-12页 |
| 1.2 高等植物启动子研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.1 启动子的组成 | 第12-13页 |
| 1.2.2 启动子的分类 | 第13-14页 |
| 1.3 植物内含子的研究进展 | 第14-15页 |
| 1.3.1 植物内含子结构特征 | 第14页 |
| 1.3.2 植物内含子的剪辑 | 第14页 |
| 1.3.3 植物基因内含子与基因表达的关系 | 第14-15页 |
| 1.4 启动子及内含子的生物信息学分析 | 第15-16页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 BnFAD2-C5基因编码序列的克隆及表达分析 | 第18-30页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 实验菌株 | 第18页 |
| 2.2 试剂和仪器 | 第18页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第18页 |
| 2.2.2 主要仪器 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-22页 |
| 2.3.1 BnFAD2-C5基因编码序列克隆 | 第18-20页 |
| 2.3.2 甘蓝型油菜总RNA的提取 | 第20-21页 |
| 2.3.3 3'-RACE | 第21页 |
| 2.3.4 BnFAD2-C5基因表达量检测 | 第21-22页 |
| 2.4 结果与分析 | 第22-30页 |
| 2.4.1 BnFAD2-C5基因的克隆及菌落PCR检测 | 第22-23页 |
| 2.4.2 总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.4.3 3'UTR的扩增 | 第24-25页 |
| 2.4.4 测序结果的同源性比对 | 第25-27页 |
| 2.4.5 DNA的消化和cDNA第一链的合成结果检测 | 第27-28页 |
| 2.4.6 BnFAD2-C5基因表达结果分析 | 第28-30页 |
| 第三章 BnFAD2-C5基因启动子及内含子的克隆、序列分析及缺失载体构建 | 第30-46页 |
| 3.1 实验材料 | 第30页 |
| 3.1.1 植物材料 | 第30页 |
| 3.1.2 实验菌株 | 第30页 |
| 3.2 主要试剂和仪器 | 第30页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第30页 |
| 3.2.2 主要仪器 | 第30页 |
| 3.3 实验方法 | 第30-37页 |
| 3.3.1 BnFAD2-C5基因上游序列的克隆 | 第30-31页 |
| 3.3.2 DNA序列分析及缺失载体构建 | 第31-37页 |
| 3.4 实验结果 | 第37-46页 |
| 3.4.1 BnFAD2-C5基因上游序列克隆结果分析 | 第37-40页 |
| 3.4.2 启动子及内含子上顺式作用元件预测 | 第40页 |
| 3.4.3 启动子及内含子缺失表达载体的构建 | 第40-41页 |
| 3.4.4 目的序列的克隆以及PCR检测 | 第41-42页 |
| 3.4.5 表达载体的构建 | 第42-43页 |
| 3.4.6 表达载体转化农杆菌结果分析 | 第43-46页 |
| 第四章 拟南芥的转化和BnFAD2-C5启动子及内含子功能分析 | 第46-62页 |
| 4.1 实验材料 | 第46页 |
| 4.2 试剂和仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第46页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第46-47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-53页 |
| 4.3.1 拟南芥的培养 | 第47页 |
| 4.3.2 拟南芥转化 | 第47-48页 |
| 4.3.3 转化子筛选 | 第48-49页 |
| 4.3.4 GUS活性的组织化学检测 | 第49页 |
| 4.3.5 蛋白定量检测 | 第49-53页 |
| 4.4 实验结果 | 第53-62页 |
| 4.4.1 农杆菌转化拟南芥的结果 | 第53-54页 |
| 4.4.2 GUS活性的组织化学检测 | 第54-55页 |
| 4.4.3 GFP(绿色荧光蛋白)相对蛋白表达量分析 | 第55-62页 |
| 第五章 讨论 | 第62-66页 |
| 5.1 BnFAD2-C5基因的克隆及表达量分析 | 第62页 |
| 5.2 存在于5'UTR内部的内含子具有增强基因表达和诱导基因在特定时期高表达的功能 | 第62-64页 |
| 5.3 BnFAD2-C5启动子具有诱导基因表达的功能 | 第64-65页 |
| 5.4 结论 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 作者简介 | 第75页 |
