| 摘要 | 第7-9页 |
| 1 引言 | 第9-16页 |
| 1.1 花色苷 | 第9-11页 |
| 1.1.1 花色苷特性 | 第9-10页 |
| 1.1.2 花色苷生物合成 | 第10-11页 |
| 1.2 UFGT | 第11页 |
| 1.3 MYB的研究进展 | 第11-13页 |
| 1.4 MybA1的研究进展 | 第13-15页 |
| 1.5 本课题的研究目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-32页 |
| 2.1 试验材料 | 第16页 |
| 2.2 试验仪器与试剂 | 第16-17页 |
| 2.3 试验方法 | 第17-32页 |
| 2.3.1 RNA的提取 | 第17-19页 |
| 2.3.2 cDNA的合成 | 第19-22页 |
| 2.3.3 MybA1生物学信息分析 | 第22页 |
| 2.3.4 MybA1基因重组表达载体的构建、转化和鉴定 | 第22-23页 |
| 2.3.5 pET-mybA1的生长曲线 | 第23页 |
| 2.3.6 MYBA1蛋白在大肠杆菌中表达诱导条件的确定 | 第23-27页 |
| 2.3.7 荧光定量 | 第27-29页 |
| 2.3.8 Western blot | 第29-31页 |
| 2.3.9 花色苷含量的测定 | 第31-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-50页 |
| 3.1 葡萄果实总RNA的提取和纯化 | 第32页 |
| 3.2 MybA1基因的PCR扩增 | 第32-33页 |
| 3.3 重组克隆载体的鉴定 | 第33-35页 |
| 3.3.1 PCR法快速鉴定重组质粒 | 第33页 |
| 3.3.2 MybA1基因序列测序结果和分析 | 第33-35页 |
| 3.4 MybA1基因的生物学分析 | 第35-38页 |
| 3.4.1 基本信息 | 第35页 |
| 3.4.2 蛋白跨膜结构 | 第35页 |
| 3.4.3 蛋白信号肽序列 | 第35-36页 |
| 3.4.4 同源性分析 | 第36-37页 |
| 3.4.5 蛋白结构域分析 | 第37页 |
| 3.4.6 二级结构 | 第37-38页 |
| 3.4.7 三级结构建模 | 第38页 |
| 3.5 MybA1生长曲线 | 第38-39页 |
| 3.6 重组表达载体的鉴定 | 第39-41页 |
| 3.6.1 重组表达载体双酶切鉴定 | 第39页 |
| 3.6.2 MybA1基因序列测序结果和分析 | 第39-41页 |
| 3.7 MYBA1蛋白表达条件的优化 | 第41-43页 |
| 3.7.1 温度条件的优化 | 第41-42页 |
| 3.7.2 IPTG添加浓度条件的优化 | 第42-43页 |
| 3.7.3 时间条件的优化 | 第43页 |
| 3.8 MYBA1蛋白表达形式的确定 | 第43-44页 |
| 3.9 MYBA1重组蛋白的纯化 | 第44页 |
| 3.10 间接ELISA检测多克隆抗体效价 | 第44-45页 |
| 3.11 荧光定量结果分析 | 第45-48页 |
| 3.11.1 赤霞珠果实MybA1的荧光定量分析 | 第45-46页 |
| 3.11.2 赤霞珠各组织部位MybA1的荧光定量分析 | 第46页 |
| 3.11.3 其它调控花色苷形成的基因的荧光定量分析 | 第46-48页 |
| 3.12 Western-blot检测结果分析 | 第48-49页 |
| 3.12.1 赤霞珠果实的western-blot检测结果分析 | 第48页 |
| 3.12.2 赤霞珠各组织部位的western-blot检测结果分析 | 第48-49页 |
| 3.13 葡萄果实发育中花色苷积累规律 | 第49-50页 |
| 4 相关性分析 | 第50-52页 |
| 4.1 葡萄果实发育过程中MybA1基因转录表达与MYBA1蛋白表达的相关性 | 第50页 |
| 4.2 葡萄果实发育过程中MybA1基因转录表达和MYBA1蛋白表达与LAR1、LAR2、DFR、ANS、ANR、UFGT各基因转录表达的相关性 | 第50-51页 |
| 4.3 葡萄果实发育过程中花色苷含量与MybA1、LAR1、LAR2、DFR、ANS、ANR、UFGT各基因转录表达和MYBA1蛋白表达的相关性 | 第51-52页 |
| 5 讨论 | 第52-54页 |
| 6 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| Abstract | 第61-62页 |
| 附录 | 第63-69页 |
| 致谢 | 第69页 |
