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耐辐射球菌DNA损伤响应基因ddrI的研究

致谢第1-7页
摘要第7-8页
Abstract第8-10页
主要缩略词第10-11页
目次第11-13页
1 文献综述第13-36页
   ·极端微生物第13-20页
     ·耐辐射球菌的研究概况第13-14页
     ·耐辐射球菌的形态、结构特性第14-16页
     ·耐辐射球菌的基因组第16页
     ·耐辐射球菌损伤反应修复机制第16-19页
       ·碱基切除修复(BER)第16-17页
       ·核苷酸切除修复(NER)第17页
       ·直接损伤修复第17页
       ·碱基错配修复第17-18页
       ·重组修复第18-19页
     ·小结第19-20页
   ·双组分(组氨酸蛋白激酶和反应调节蛋白)信号转导系统第20-22页
     ·双组分信号转导系统的发现第20-21页
     ·研究双组分(组氨酸蛋白激酶和反应调节蛋白)系统的意义第21-22页
   ·CRP家族第22-34页
     ·CRP家族的发现第23页
     ·CRP结构第23-25页
     ·CRP作用机制第25-34页
       ·Cyclic AMP与CRP相互作用第26-27页
       ·cAMP的结合激发了CRP活性第27-29页
       ·CRP与DNA相互作用第29-32页
       ·CRP与RNA聚合酶的相互作用第32-33页
       ·CRP对细菌的多种调控作用第33-34页
     ·研究CRP的意义第34页
   ·本文的立论依据和研究意义第34-36页
2 耐辐射球菌ddrⅠ及相关基因缺失突变株的构建与特性分析第36-47页
   ·基因缺失突变株的构建第36-38页
     ·菌株和试剂第36页
     ·仪器与设备第36页
     ·菌株培养第36-37页
     ·基因缺失突变菌株的构建方法第37-38页
       ·体外"三段连接"第37-38页
       ·连接产物转化耐辐射球菌第38页
       ·突变株的鉴定第38页
   ·突变体特性分析第38-39页
     ·材料和试剂第38页
     ·主要仪器第38页
     ·实验方法第38-39页
       ·生长曲线测定第38-39页
       ·菌株抗逆处理第39页
       ·耐辐射球菌细胞辐照处理第39页
   ·结果和分析第39-45页
     ·各种突变菌株的构建第39-41页
       ·突变株△DR0997突变株的构建第39-40页
       ·突变株△DR1646的构建第40-41页
     ·ddrⅠ基因缺失前后生长情况比较第41-42页
     ·突变株△DR0997对各种逆境的反应第42-44页
     ·△DR0997、△DR1646突变菌株对电离辐射很敏感第44-45页
   ·讨论第45-46页
   ·小结第46-47页
3 耐辐射球菌△DR0997突变株转录谱分析第47-61页
   ·材料与试剂第47-49页
     ·耐辐射球菌基因芯片的制备第47-48页
     ·RNA抽提、逆转录、芯片杂交及Q-RT-PCR所用试剂第48-49页
   ·实验方法第49-52页
     ·耐辐射球菌总RNA的分离第49-50页
     ·芯片探针的制备第50-51页
     ·芯片预杂交和杂交第51-52页
     ·芯片扫描及数据分析第52页
   ·结果与分析第52-60页
   ·小结第60-61页
4 耐辐射球菌DR0997蛋白的体外表达与纯化第61-69页
   ·材料、试剂与设备第61页
     ·菌株与质粒第61页
     ·主要试剂第61页
     ·主要仪器与设备第61页
   ·实验方法第61-63页
     ·大肠杆菌感受态制备第61-62页
     ·dr0997基因的克隆第62页
     ·DR0997蛋白表达质粒的构建第62页
     ·DR0997蛋白的表达第62-63页
   ·结果与分析第63-67页
     ·ddrⅠ基因ORF的实际长度为612 bp第63-65页
     ·DdrⅠ蛋白体外表达第65页
     ·ddrⅠ基因及其蛋白产物DdrⅠ的生物信息学分析第65-67页
   ·小结第67-69页
5 总结与展望第69-71页
参考文献第71-82页
作者简历第82页

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