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海蜇毒素磷脂酶A2和穿孔蛋白基因的克隆与表达

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
引言第13-14页
第一章 水母磷脂酶A_2(PLA_2)毒素和穿孔蛋白研究进展第14-29页
 1. 磷脂酶毒素A_2(PLA_2)研究概况第14-22页
   ·PLA_2的分类、生物功能及其理化性质第15-18页
   ·PLA_2的分子结构第18-20页
     ·s PLA_2的分子结构第18-19页
     ·c PLA_2的结构第19页
     ·i PLA_2的结构第19页
     ·PAF-PLA_2的结构第19-20页
   ·PLA_2的生理活性第20-22页
     ·抑菌活性第20页
     ·溶血作用第20-21页
     ·抗凝作用第21页
     ·神经毒性第21页
     ·抗肿瘤形成第21-22页
 2. 穿孔蛋白研究进展第22-26页
   ·胆固醇依赖的细胞溶素(CDCs)第22-24页
     ·CDCs的晶体结构第22-23页
     ·CDCs的受体识别及成孔机制第23-24页
   ·攻膜复合体/穿孔素超家族(MACPF)第24-26页
     ·MACPF的晶体结构第24-25页
     ·MACPF的C端结构域第25页
     ·穿孔素(PFPs)第25-26页
   ·MACPF/C DCs蛋白的生物功能第26页
 3. 本研究的意义及目的第26-28页
   ·研究意义第26-27页
   ·研究目的第27-28页
 4. 采用的技术路线第28-29页
第二章 海蜇水母毒素PLA_2基因的克隆与表达第29-55页
 1 材料与方法第29-40页
   ·实验材料第29-31页
     ·实验样品第29页
     ·主要仪器设备第29页
     ·主要试剂与酶第29-30页
     ·载体和菌株第30-31页
   ·实验方法第31-40页
     ·核酸的提取第31-32页
     ·海蜇PLA_2基因全长c DNA克隆第32-34页
     ·Re PLA_2基因组序列的克隆及基因组结构分析第34页
     ·Re PLA_2 m RNA在海蜇不同发育阶段的表达第34-35页
     ·Re PLA_2的原核表达第35-40页
 2 结果第40-53页
   ·海蜇磷脂酶A_2基因全长c DNA的克隆与序列分析第40-47页
     ·海蜇PLA_2-1 全长c DNA序列克隆与分析第40-41页
     ·海蜇PLA_2-2 全长c DNA序列克隆与分析第41-47页
   ·海蜇磷脂酶A_2基因系统进化第47-48页
     ·Re PLA_2-1 系统进化第47页
     ·Re PLA_2-2 系统进化第47-48页
   ·海蜇磷脂酶A_2基因组结构分析第48-49页
     ·Re PLA_2-1 基因组结构分析第48页
     ·Re PLA_2-2 基因组结构分析第48-49页
   ·海蜇磷脂酶A_2不同发育阶段表达第49-50页
   ·海蜇磷脂酶A_2重组表达及活性分析第50-53页
     ·PLA_2重组质粒的构建第50页
     ·重组质粒的诱导表达第50-51页
     ·融合蛋白western-blot验证第51-52页
     ·重组蛋白的纯化第52页
     ·重组蛋白的透析复性第52页
     ·重组蛋白生物活性检测第52-53页
 3 讨论第53-55页
第三章 海蜇穿孔蛋白基因的克隆与表达第55-76页
 1. 材料与方法第55-59页
   ·实验材料第55页
     ·实验样品第55页
     ·主要仪器与设备第55页
     ·主要试剂与酶第55页
     ·载体和菌株第55页
   ·实验方法第55-59页
     ·核酸的提取第55页
     ·海蜇PFP基因全长c DNA序列的克隆第55-57页
     ·Re PFP基因组序列的克隆及基因组结构的分析第57页
     ·Re PFP m RNA在海蜇不同发育阶段的表达第57-59页
     ·Re PFP重组表达第59页
 2. 结果第59-74页
   ·Re PFP c DNA序列全长及推断的氨基酸特征第59-64页
     ·Re PFP-1 的c DNA序列全长及推断的氨基酸特征第59-62页
     ·Re PFP-2 的c DNA序列全长及推断的氨基酸特征第62-64页
   ·Re PFP蛋白质结构域分析第64-65页
   ·Re PFP的系统进化分析第65-67页
   ·Re PFP的基因组结构分析第67-68页
   ·海蜇不同发育阶段Re PFP基因的表达第68-71页
   ·Re PFP的原核表达第71-74页
 3.讨论第74-76页
   ·MACPF超家族蛋白生物功能的多样性第74-75页
   ·PFP蛋白C端多样性第75-76页
第四章 论文总结第76-78页
参考文献第78-84页
缩略语表第84-85页
在学期间参与科研情况第85-86页
致谢第86页

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