摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-13页 |
引言 | 第13-14页 |
第一章 水母磷脂酶A_2(PLA_2)毒素和穿孔蛋白研究进展 | 第14-29页 |
1. 磷脂酶毒素A_2(PLA_2)研究概况 | 第14-22页 |
·PLA_2的分类、生物功能及其理化性质 | 第15-18页 |
·PLA_2的分子结构 | 第18-20页 |
·s PLA_2的分子结构 | 第18-19页 |
·c PLA_2的结构 | 第19页 |
·i PLA_2的结构 | 第19页 |
·PAF-PLA_2的结构 | 第19-20页 |
·PLA_2的生理活性 | 第20-22页 |
·抑菌活性 | 第20页 |
·溶血作用 | 第20-21页 |
·抗凝作用 | 第21页 |
·神经毒性 | 第21页 |
·抗肿瘤形成 | 第21-22页 |
2. 穿孔蛋白研究进展 | 第22-26页 |
·胆固醇依赖的细胞溶素(CDCs) | 第22-24页 |
·CDCs的晶体结构 | 第22-23页 |
·CDCs的受体识别及成孔机制 | 第23-24页 |
·攻膜复合体/穿孔素超家族(MACPF) | 第24-26页 |
·MACPF的晶体结构 | 第24-25页 |
·MACPF的C端结构域 | 第25页 |
·穿孔素(PFPs) | 第25-26页 |
·MACPF/C DCs蛋白的生物功能 | 第26页 |
3. 本研究的意义及目的 | 第26-28页 |
·研究意义 | 第26-27页 |
·研究目的 | 第27-28页 |
4. 采用的技术路线 | 第28-29页 |
第二章 海蜇水母毒素PLA_2基因的克隆与表达 | 第29-55页 |
1 材料与方法 | 第29-40页 |
·实验材料 | 第29-31页 |
·实验样品 | 第29页 |
·主要仪器设备 | 第29页 |
·主要试剂与酶 | 第29-30页 |
·载体和菌株 | 第30-31页 |
·实验方法 | 第31-40页 |
·核酸的提取 | 第31-32页 |
·海蜇PLA_2基因全长c DNA克隆 | 第32-34页 |
·Re PLA_2基因组序列的克隆及基因组结构分析 | 第34页 |
·Re PLA_2 m RNA在海蜇不同发育阶段的表达 | 第34-35页 |
·Re PLA_2的原核表达 | 第35-40页 |
2 结果 | 第40-53页 |
·海蜇磷脂酶A_2基因全长c DNA的克隆与序列分析 | 第40-47页 |
·海蜇PLA_2-1 全长c DNA序列克隆与分析 | 第40-41页 |
·海蜇PLA_2-2 全长c DNA序列克隆与分析 | 第41-47页 |
·海蜇磷脂酶A_2基因系统进化 | 第47-48页 |
·Re PLA_2-1 系统进化 | 第47页 |
·Re PLA_2-2 系统进化 | 第47-48页 |
·海蜇磷脂酶A_2基因组结构分析 | 第48-49页 |
·Re PLA_2-1 基因组结构分析 | 第48页 |
·Re PLA_2-2 基因组结构分析 | 第48-49页 |
·海蜇磷脂酶A_2不同发育阶段表达 | 第49-50页 |
·海蜇磷脂酶A_2重组表达及活性分析 | 第50-53页 |
·PLA_2重组质粒的构建 | 第50页 |
·重组质粒的诱导表达 | 第50-51页 |
·融合蛋白western-blot验证 | 第51-52页 |
·重组蛋白的纯化 | 第52页 |
·重组蛋白的透析复性 | 第52页 |
·重组蛋白生物活性检测 | 第52-53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
第三章 海蜇穿孔蛋白基因的克隆与表达 | 第55-76页 |
1. 材料与方法 | 第55-59页 |
·实验材料 | 第55页 |
·实验样品 | 第55页 |
·主要仪器与设备 | 第55页 |
·主要试剂与酶 | 第55页 |
·载体和菌株 | 第55页 |
·实验方法 | 第55-59页 |
·核酸的提取 | 第55页 |
·海蜇PFP基因全长c DNA序列的克隆 | 第55-57页 |
·Re PFP基因组序列的克隆及基因组结构的分析 | 第57页 |
·Re PFP m RNA在海蜇不同发育阶段的表达 | 第57-59页 |
·Re PFP重组表达 | 第59页 |
2. 结果 | 第59-74页 |
·Re PFP c DNA序列全长及推断的氨基酸特征 | 第59-64页 |
·Re PFP-1 的c DNA序列全长及推断的氨基酸特征 | 第59-62页 |
·Re PFP-2 的c DNA序列全长及推断的氨基酸特征 | 第62-64页 |
·Re PFP蛋白质结构域分析 | 第64-65页 |
·Re PFP的系统进化分析 | 第65-67页 |
·Re PFP的基因组结构分析 | 第67-68页 |
·海蜇不同发育阶段Re PFP基因的表达 | 第68-71页 |
·Re PFP的原核表达 | 第71-74页 |
3.讨论 | 第74-76页 |
·MACPF超家族蛋白生物功能的多样性 | 第74-75页 |
·PFP蛋白C端多样性 | 第75-76页 |
第四章 论文总结 | 第76-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
缩略语表 | 第84-85页 |
在学期间参与科研情况 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |