| 中文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-28页 |
| ·玉米容重的研究进展 | 第11-13页 |
| ·容重的概念 | 第11-12页 |
| ·玉米容重的研究意义 | 第12-13页 |
| ·玉米容重与产量和品质的关系 | 第13页 |
| ·籽粒容重与产量和品质的关系 | 第13页 |
| ·籽粒容重差异的主要来源 | 第13页 |
| ·基因修饰 | 第13-21页 |
| ·基因修饰的概念及研究进展 | 第13-15页 |
| ·ZFN基因组编辑技术 | 第15页 |
| ·TALEN基因组编辑技术 | 第15-20页 |
| ·TALEN的结构与原理 | 第15-17页 |
| ·TALEN设计与构建方法 | 第17-18页 |
| ·TALEN诱变效率的检测方法 | 第18-19页 |
| ·TALEN的应用 | 第19-20页 |
| ·CRISPR/Cas9基因组编辑技术 | 第20-21页 |
| ·玉米的转基因技术 | 第21-25页 |
| ·转基因玉米的研究进展 | 第21-22页 |
| ·玉米遗传转化的受体 | 第22-24页 |
| ·原生质体 | 第22页 |
| ·胚性愈伤组织 | 第22-23页 |
| ·幼胚 | 第23页 |
| ·茎尖分生组织 | 第23-24页 |
| ·子房、花粉 | 第24页 |
| ·玉米转化方法 | 第24-25页 |
| ·农杆菌介导法 | 第24页 |
| ·基因枪法 | 第24-25页 |
| ·花粉管通道法 | 第25页 |
| ·POT家族蛋白 | 第25-27页 |
| ·POT家族蛋白研究现状 | 第25-27页 |
| ·动物中POT家族蛋白的相关研究 | 第25-26页 |
| ·植物中POT家族蛋白的相关研究 | 第26-27页 |
| ·研究目的及意义 | 第27-28页 |
| 2 材料与方法 | 第28-58页 |
| ·材料 | 第28-31页 |
| ·植物材料 | 第28页 |
| ·菌株与载体 | 第28页 |
| ·主要试剂及试剂盒 | 第28-29页 |
| ·常用培养基 | 第29-30页 |
| ·常用基本溶液 | 第30页 |
| ·器材及仪器 | 第30-31页 |
| ·实验方法 | 第31-58页 |
| ·生物信息学分析 | 第31页 |
| ·TALEN敲除载体的构建 | 第31-37页 |
| ·TALEN左右臂识别序列设计 | 第31-32页 |
| ·TALEN左右臂载体构建 | 第32-34页 |
| ·敲除载体的构建 | 第34-37页 |
| ·过表达载体的构建 | 第37-45页 |
| ·水稻谷蛋白基因Gtl启动子的克隆 | 第37-39页 |
| ·中间载体pGtl-CUB的构建 | 第39-41页 |
| ·目的基因的克隆 | 第41-43页 |
| ·ZmPOT过表达载体的构建 | 第43-45页 |
| ·ZmPOT敲除载体及过表达载体转化农杆菌 | 第45-46页 |
| ·农杆菌感受态的制备 | 第45页 |
| ·冻融化转化农杆菌 | 第45-46页 |
| ·农杆菌介导TALEN敲除载体在玉米愈伤组织中的遗传转化 | 第46-48页 |
| ·玉米愈伤组织的培养 | 第46页 |
| ·玉米愈伤组织侵染及共培养 | 第46-47页 |
| ·玉米愈伤组织的清洗及杀菌 | 第47页 |
| ·玉米愈伤组织的恢复及筛选培养 | 第47页 |
| ·玉米愈伤组织的分化培养 | 第47页 |
| ·炼苗及移栽 | 第47-48页 |
| ·农杆菌介导过表达载体在玉米幼胚中的遗传转化 | 第48-49页 |
| ·幼胚的准备 | 第48页 |
| ·农杆菌的准备 | 第48页 |
| ·侵染及后期培养 | 第48-49页 |
| ·T_0代转基因植株的分子检测 | 第49-52页 |
| ·玉米基因组DNA的提取 | 第49页 |
| ·TALEN转基因植株T_0代转基因植株分子检测检测 | 第49-51页 |
| ·过表达载体转基因植株T_0代分子检测 | 第51-52页 |
| ·TALEN转基因植株T_1代转基因植株分子检测检测 | 第52-58页 |
| ·用FokI的引物PCR检测 | 第52页 |
| ·T7E1酶切检测 | 第52-54页 |
| ·qRT-PCR检测转基因情况 | 第54-57页 |
| ·TALEN结果检测 | 第57-58页 |
| ·TALEN T_1代转基因植株相关表型鉴定 | 第58页 |
| 3 结果与分析 | 第58-81页 |
| ·ZmPOT生物信息学分析结果 | 第58-60页 |
| ·TALEN植物表达載体的构建 | 第60-66页 |
| ·TALEN靶位点设计 | 第60-61页 |
| ·TALEN左右臂的构建 | 第61-63页 |
| ·TALEN双元启动子植物表达载体的构建 | 第63-66页 |
| ·ZmPOT过表达载体的构建 | 第66-72页 |
| ·ZmPOT基因的克隆 | 第66-68页 |
| ·中间载体pGtl-CUB的构建 | 第68-70页 |
| ·ZmPOT过表达载体的构建 | 第70-72页 |
| ·农杆菌介导的玉米遗传转化 | 第72-74页 |
| ·以玉米愈伤组织为受体农杆菌介导的TALEN敲除载体的遗传转化 | 第72-73页 |
| ·玉米胚性愈伤组织的培育 | 第72页 |
| ·玉米愈伤组织的转化 | 第72-73页 |
| ·ZmPOT过表达载体的遗传转化 | 第73-74页 |
| ·转基因植株的检测 | 第74-80页 |
| ·T_0代转基因植株的PCR检测 | 第74-76页 |
| ·TALEN敲除载体转基因植株T_0代检测 | 第74-75页 |
| ·过表达载体转基因植株T_0代检测 | 第75-76页 |
| ·TALEN敲除载体转基因植株T_1代检测 | 第76-80页 |
| ·TALEN T_1代转基因植株相关表型测定 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| ·ZmPOT基因功能的预测及启动子的选择 | 第81-82页 |
| ·玉米受体系统的影响 | 第82-83页 |
| ·TALEN打靶效率检测及其影响因素 | 第83-84页 |
| ·TALEN的应用 | 第84-85页 |
| 5 小结 | 第85页 |
| 6 下一步研究计划 | 第85-86页 |
| 参考文献 | 第86-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 附录 | 第93页 |
