| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 主要缩略符号对照表 | 第7-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-25页 |
| ·类黄酮概述 | 第11页 |
| ·类黄酮O-甲基转移酶 | 第11-15页 |
| ·类黄酮O-甲基转移酶的分类 | 第12-13页 |
| ·植物类黄酮O-甲基转移酶研究现状 | 第13-15页 |
| ·甲氧基类黄酮与类黄酮生物学功能比较 | 第15-21页 |
| ·类黄酮的生物学功能 | 第15页 |
| ·类黄酮的吸收代谢 | 第15-16页 |
| ·甲氧基类黄酮生物活性的改变 | 第16-21页 |
| ·青稞的研究概况 | 第21-23页 |
| ·我国青稞简介及营养价值评价 | 第21-23页 |
| ·青稞甲氧基类黄酮的研究 | 第23页 |
| ·研究的目的、意义及研究内容 | 第23-25页 |
| 2 材料和方法 | 第25-34页 |
| ·试验材料 | 第25-28页 |
| ·试验植物材料 | 第25页 |
| ·主要试验仪器设备 | 第25页 |
| ·试验载体 | 第25页 |
| ·试验菌株 | 第25-26页 |
| ·试验主要试剂 | 第26页 |
| ·试验溶液的配制 | 第26-28页 |
| ·青稞HvQK-OMT1基因CDS区的克隆 | 第28-32页 |
| ·引物设计 | 第28页 |
| ·青稞总RNA提取 | 第28-29页 |
| ·第一链cDNA的制备 | 第29-30页 |
| ·PCR扩增 | 第30页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第30-32页 |
| ·生物信息学分析 | 第32-34页 |
| ·HvQK-OMT1基因编码蛋白分子量与等电点的预测 | 第32-33页 |
| ·HvQK-OMT1糖基化位点预测 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1疏水性预测 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1磷酸化位点预测 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1二硫键预测 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1信号肽预测 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1跨膜结构分析 | 第33页 |
| ·HvQK-OMT1基因CDS区密码子偏倚性分析 | 第33-34页 |
| ·HvQK-OMT1二、三级结构预测 | 第34页 |
| 3 HVQK-OMT1基因的原核表达 | 第34-40页 |
| ·HvQK-OMT1基因双酶切引物设计 | 第34页 |
| ·PCR扩增 | 第34-35页 |
| ·PCR产物纯化回收 | 第35页 |
| ·目的片段与T载体连接 | 第35页 |
| ·连接产物的转化、鉴定 | 第35页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第35-37页 |
| ·菌液扩繁 | 第35页 |
| ·HvQK-OMT1-T2和pET-32a质粒提取 | 第35-36页 |
| ·HvQK-OMT1-T2和pET-32a质粒双酶切 | 第36页 |
| ·酶切pET-32a片断与酶切目的片段连接 | 第36-37页 |
| ·连接产物转化与克隆 | 第37页 |
| ·重组质粒HvQK-OMT1-pET转化BL21(DE3) | 第37页 |
| ·重组蛋白的诱导表达 | 第37页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第37-38页 |
| ·重组蛋白的分离纯化 | 第38-40页 |
| 4 结果与分析 | 第40-58页 |
| ·HvQK-OMT1基因CDS区的克隆 | 第40-41页 |
| ·青稞叶片总RNA的提取 | 第40页 |
| ·青稞HvQK-OMT1基因cDNA的PCR扩增效果 | 第40-41页 |
| ·HvQK-OMT1基因转化大肠杆菌(DH5α)及重组质粒PCR鉴定 | 第41页 |
| ·HVQK-OMT1基因原核表达 | 第41-46页 |
| ·HvQK-OMT1-pET重组表达菌株的构建 | 第41-44页 |
| ·HvQK-OMT1基因原核表达 | 第44-45页 |
| ·HvQK-OMT1基因原核表达条件优化 | 第45-46页 |
| ·重组蛋白分离纯化 | 第46页 |
| ·HvQK-OMT1基因CDS区序列分析 | 第46-51页 |
| ·HvQK-OMT1基因核苷酸和氨基酸组成分析 | 第46-50页 |
| ·HvQK-OMT1基因同源性分析 | 第50-51页 |
| ·HvQK-OMT1基因生物信息学预测分析 | 第51-58页 |
| ·HvQK-OMT1基因编码蛋白分子量与等电点的预测 | 第51页 |
| ·HvQK-OMT1糖基化位点预测 | 第51-52页 |
| ·HvQK-OMT1疏水性预测 | 第52-53页 |
| ·HvQK-OMT1磷酸化位点预测 | 第53页 |
| ·HvQK-OMT1二硫键预测 | 第53-54页 |
| ·HvOQK-MT1信号肽预测 | 第54-55页 |
| ·HvQK-OMT1跨膜结构分析 | 第55页 |
| ·HvQK-OMT1基因CDS区密码子偏爱性分析 | 第55-56页 |
| ·HvQK-OMT1二级结构、三级结构预测分析 | 第56-58页 |
| 5 讨论 | 第58-62页 |
| ·植物O-甲基转移酶研究的意义 | 第58-59页 |
| ·青稞HvQK-OMT1基因克隆 | 第59-60页 |
| ·青稞HvQK-OMT1原核表达 | 第60-62页 |
| 6 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
| 在读期间发表的论文 | 第77页 |
