| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-20页 |
| ·猪流行性腹泻病毒概述 | 第13-15页 |
| ·PEDV的分类 | 第13页 |
| ·PEDV基因组与结构 | 第13-14页 |
| ·PEDV结构蛋白 | 第14-15页 |
| ·PEDV近十年(2006-2015)流行情况 | 第15-17页 |
| ·欧美流行情况 | 第15页 |
| ·亚洲流行情况 | 第15页 |
| ·中国流行情况 | 第15-16页 |
| ·我国PEDV遗传变异分析 | 第16-17页 |
| ·疫苗及研究进展 | 第17页 |
| ·PEDV S蛋白受体与抗原性研究进展 | 第17-19页 |
| ·PEDV受体研究进展 | 第17-18页 |
| ·PEDV S蛋白抗原性研究进展 | 第18-19页 |
| ·研究的目的和意义 | 第19-20页 |
| 第二章 PEDV G1与G2亚型毒株S蛋白抗原差异性分析 | 第20-32页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·毒株、细胞、实验动物与质粒 | 第20页 |
| ·主要仪器与设备 | 第20页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-25页 |
| ·CV777、LNCT2毒株S蛋白密码子优化 | 第21页 |
| ·优化S基因真核表达载体的构建 | 第21-23页 |
| ·重组CV777、LNCT2 S蛋白的表达 | 第23页 |
| ·重组CV777、LNCT2 S蛋白的纯化 | 第23-24页 |
| ·CV777、LNCT2 S蛋白多克隆抗体的制备 | 第24页 |
| ·免疫小鼠血清中IgG抗体的检测 | 第24页 |
| ·间接免疫荧光试验 | 第24页 |
| ·Western blot分析 | 第24页 |
| ·交叉中和试验 | 第24-25页 |
| ·结果 | 第25-30页 |
| ·CV777、LNCT2 S基因密码子优化 | 第25页 |
| ·重组真核表达载体的构建 | 第25页 |
| ·重组CV777、LNCT2 S蛋白的表达与纯化 | 第25-27页 |
| ·S蛋白免疫小鼠血清IgG抗体含量变化 | 第27-28页 |
| ·间接ELISA评价G1、G2亚型S蛋白间抗原差异性 | 第28页 |
| ·间接免疫荧光评价G1、G2亚型毒株抗原差异性 | 第28-29页 |
| ·Western blot评价G1、G2亚型毒株抗原差异性 | 第29-30页 |
| ·中和试验评价G1、G2亚型毒株抗原差异性 | 第30页 |
| ·讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 PEDV S蛋白单克隆抗体的制备及差异性抗原表位初步筛选 | 第32-40页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·毒株、细胞 | 第32页 |
| ·主要仪器与设备 | 第32页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-35页 |
| ·CV777、LNCT2株S蛋白单克隆抗体的制备 | 第33-34页 |
| ·PEDV S蛋白单克隆抗体免疫活性的鉴定 | 第34-35页 |
| ·单克隆抗体亚型特异性检测 | 第35页 |
| ·LNCT2株病毒特异性单克隆抗体L5F7抗原表位初步鉴定 | 第35页 |
| ·结果 | 第35-39页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第35-36页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第36页 |
| ·单克隆抗体Western blot鉴定 | 第36页 |
| ·单克隆抗体IFA鉴定 | 第36-37页 |
| ·单克隆抗体中和活性的鉴定 | 第37页 |
| ·LNCT2特异性单克隆抗体的发现 | 第37-38页 |
| ·L5F7株MAb抗原表位的初步鉴定 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| 第四章 PEDV G1与G2基因亚型S蛋白高变区抗原差异性分析 | 第40-50页 |
| ·材料 | 第40-41页 |
| ·毒株、细胞、质粒与实验动物 | 第40页 |
| ·主要仪器与设备 | 第40页 |
| ·主要试剂与溶液 | 第40-41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·PEDV G1与G2亚型S蛋白高变区序列分析 | 第41页 |
| ·S61-1206bp基因重组载体的构建 | 第41-42页 |
| ·重组穿梭质粒Bacmid-CV777 S1，Bacmid-LNCT2 S1的制备与鉴定 | 第42-43页 |
| ·重组杆状病毒的拯救 | 第43页 |
| ·重组S121-402aa蛋白的表达、纯化与多克隆抗体的制备 | 第43页 |
| ·间接ELISA检测S1高变区抗原差异性 | 第43页 |
| ·IFA检测S1高变区抗原差异性 | 第43-44页 |
| ·中和试验检测S1高变区抗原差异性 | 第44页 |
| ·结果 | 第44-48页 |
| ·PEDV G1与G2亚型S蛋白高变区序列分析 | 第44页 |
| ·S61-1206bp基因的扩增与重组质粒的鉴定 | 第44-45页 |
| ·重组Bacmid与重组杆状病毒的鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组PEDV S121-402aa蛋白表达与纯化 | 第46-47页 |
| ·间接ELISA评价G1、G2亚型S1高变区抗原差异性 | 第47-48页 |
| ·IFA、中和试验评价G1、G2亚型S1高变区抗原差异性 | 第48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第五章 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
| 作者简介 | 第60页 |
