| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-14页 |
| 第一章 引言 | 第14-19页 |
| ·环境雌激素 | 第14-15页 |
| ·环境雌激素简介 | 第14页 |
| ·环境雌激素的种类及其危害 | 第14-15页 |
| ·雌二醇简介 | 第15页 |
| ·斑马鱼 | 第15-17页 |
| ·斑马鱼简介 | 第15-16页 |
| ·斑马鱼作为模式生物的优点 | 第16页 |
| ·斑马鱼的孵化相关基因 | 第16页 |
| ·斑马鱼的性别分化相关基因 | 第16-17页 |
| ·雌二醇对斑马鱼的毒性研究进展 | 第17-18页 |
| ·本研究的内容、目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 17-β 雌二醇对斑马鱼胚胎的毒性 | 第19-27页 |
| ·材料 | 第19页 |
| ·材料与试剂 | 第19页 |
| ·仪器 | 第19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·斑马鱼饲养 | 第19页 |
| ·配鱼与产卵 | 第19-20页 |
| ·斑马鱼受精后 24 h以内的存活率 | 第20页 |
| ·雌二醇处理 | 第20页 |
| ·统计与分析 | 第20页 |
| ·结果 | 第20-24页 |
| ·斑马鱼受精后 24 h以内的存活率曲线 | 第20-21页 |
| ·形态学鉴定 | 第21-22页 |
| ·孵化率、畸形率和存活率的统计分析 | 第22-24页 |
| ·讨论 | 第24-27页 |
| ·斑马鱼胚胎在 10 hpf后能保持稳定的存活率 | 第24-25页 |
| ·高浓度的E2能显著影响斑马鱼胚胎的发育 | 第25-27页 |
| 第三章 雌二醇对斑马鱼孵化和性别分化相关基因表达的影响 | 第27-36页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·材料与试剂 | 第27页 |
| ·仪器与耗材 | 第27页 |
| ·方法 | 第27-30页 |
| ·胚胎处理和样本收集 | 第27页 |
| ·总RNA的提取 | 第27-28页 |
| ·去除基因组DNA | 第28页 |
| ·反转录合成c DNA | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第29-30页 |
| ·结果 | 第30-34页 |
| ·雌二醇对斑马鱼胚胎孵化相关基因表达的影响 | 第30-31页 |
| ·高浓度雌二醇对斑马鱼胚胎性别分化相关基因表达的影响 | 第31-32页 |
| ·环境浓度雌二醇对不同发育阶段斑马鱼性别分化相关基因表达的影响 | 第32-34页 |
| ·讨论 | 第34-36页 |
| ·雌二醇能延迟zhe1基因表达水平达到高峰的时间 | 第34页 |
| ·雌二醇能上调雌性相关基因的表达水平 | 第34-36页 |
| 第四章 斑马鱼转录组学分析 | 第36-50页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·试剂 | 第36页 |
| ·主要仪器、软件和数据库 | 第36页 |
| ·方法 | 第36-39页 |
| ·斑马鱼幼鱼的处理及样品收集 | 第36页 |
| ·总RNA的提取以及m RNA的打断 | 第36-37页 |
| ·双链c DNA的合成 | 第37页 |
| ·双链c DNA的纯化 | 第37页 |
| ·末端修复 | 第37-38页 |
| ·3'末端腺苷酸化 | 第38页 |
| ·连接接头（Adapters） | 第38页 |
| ·DNA片段的富集 | 第38页 |
| ·检测建库结果及上机测序 | 第38页 |
| ·数据分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-49页 |
| ·原始read的质量控制和质量评估 | 第39-40页 |
| ·基因的差异表达分析 | 第40-41页 |
| ·GO分析 | 第41-43页 |
| ·KEGG分析 | 第43-49页 |
| ·讨论 | 第49-50页 |
| 第五章 斑马鱼蛋白组学分析 | 第50-59页 |
| ·材料 | 第50页 |
| ·试剂 | 第50页 |
| ·主要仪器、软件和数据库 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-54页 |
| ·蛋白质提取 | 第50-51页 |
| ·蛋白质定量 | 第51页 |
| ·SDS-PAGE检测 | 第51-52页 |
| ·酶解和肽段定量 | 第52页 |
| ·肽段标记 | 第52页 |
| ·SCX分级 | 第52-53页 |
| ·毛细管高效液相色谱 | 第53页 |
| ·质谱鉴定 | 第53页 |
| ·数据分析 | 第53-54页 |
| ·结果 | 第54-58页 |
| ·蛋白质提取 | 第54页 |
| ·蛋白质定量 | 第54-55页 |
| ·肽段SCX分级 | 第55页 |
| ·蛋白质鉴定及定量分析 | 第55-56页 |
| ·GO分析 | 第56-57页 |
| ·COG分析 | 第57页 |
| ·KEGG通路分析 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 第六章 结论 | 第59-61页 |
| ·研究结果 | 第59-60页 |
| ·全文结论 | 第60页 |
| ·创新点 | 第60页 |
| ·展望 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68页 |
