| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-13页 |
| ·有机溶剂对微生物的危害以及微生物的耐受机制 | 第7-8页 |
| ·有机溶剂对细胞的危害 | 第7页 |
| ·有机溶剂耐受性机制 | 第7-8页 |
| ·全局转录机制工程 | 第8-9页 |
| ·全局转录机制工程的简介 | 第8-9页 |
| ·全局转录机制工程研究进展 | 第9页 |
| ·转录组学简介 | 第9-10页 |
| ·转录组学的引入 | 第9-10页 |
| ·基因芯片技术的应用 | 第10页 |
| ·RNA干扰技术简介 | 第10-11页 |
| ·本课题研究意义和主要内容 | 第11-13页 |
| ·课题来源 | 第11页 |
| ·课题研究意义 | 第11页 |
| ·本课题主要研究内容 | 第11-13页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第13-21页 |
| ·实验材料 | 第13-15页 |
| ·实验菌株与载体 | 第13页 |
| ·实验所用引物 | 第13-15页 |
| ·实验仪器和试剂 | 第15页 |
| ·主要培养基及溶液 | 第15页 |
| ·实验方法 | 第15-21页 |
| ·构建σ~（70） 突变库 | 第15-16页 |
| ·突变库的筛选 | 第16-17页 |
| ·细胞休克实验 | 第17页 |
| ·细胞疏水性研究 | 第17页 |
| ·细胞内丁醇含量的测定 | 第17页 |
| ·细胞耐酸性研究 | 第17页 |
| ·Mg~（2+）对细胞耐受性的影响 | 第17页 |
| ·细胞形态学观察 | 第17-18页 |
| ·转录组学研究差异基因 | 第18页 |
| ·yeiC、yeiN、ECs0572 基因沉默实验 | 第18-19页 |
| ·yrbL、yhcN基因敲除实验 | 第19-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-42页 |
| ·σ~（70） 突变库的构建和筛选 | 第21-26页 |
| ·σ~（70） 突变库的构建 | 第21页 |
| ·σ~（70） 突变库的筛选 | 第21-23页 |
| ·以pHACM~（D3） 为模板构建σ~（70） 突变库和突变菌株筛选 | 第23-26页 |
| ·细胞休克实验 | 第26-27页 |
| ·B8 对其他有机溶剂的耐受性 | 第27页 |
| ·细胞疏水性研究 | 第27-28页 |
| ·B8 胞内丁醇含量测定 | 第28页 |
| ·B8 对pH的耐受性 | 第28-29页 |
| ·Mg~(2+)对细胞耐受性的影响 | 第29-30页 |
| ·丁醇对细胞形态的影响 | 第30-31页 |
| ·基因芯片数据分析 | 第31-36页 |
| ·差异基因分析 | 第31-33页 |
| ·显著差异基因数据分析 | 第33-36页 |
| ·基因沉默实验 | 第36-38页 |
| ·基因沉默质粒构建 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR方法研究基因沉默效率 | 第37页 |
| ·与有机溶剂耐受性相关基因的研究 | 第37-38页 |
| ·下调基因yrbL和yhcN敲除和敲除菌株耐受性验证 | 第38-42页 |
| ·基因yrbL和yhcN敲除 | 第38-39页 |
| ·筛选标记基因Kan的消除 | 第39-40页 |
| ·敲除菌株JM109(ΔyrbL)、JM109(ΔyhcN)丁醇耐受性验证 | 第40-42页 |
| 主要结论与展望 | 第42-43页 |
| 主要结论 | 第42页 |
| 展望 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-49页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第49页 |
