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纳米氧化铜对人肝癌细胞HepG2细胞毒性及其机理研究

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-13页
第1章 绪论第13-23页
   ·纳米材料简介第13-18页
     ·纳米材料的分类第13-15页
       ·碳NPs第13-14页
       ·金属氧化物类NPs第14页
       ·非金属氧化物NPs第14页
       ·金属NPs第14页
       ·量子点(QDs)第14-15页
     ·纳米材料的特性第15-16页
       ·小尺寸效应第15页
       ·表面效应第15页
       ·体积效应第15-16页
       ·量子尺寸效应第16页
       ·宏观量子隧道效应第16页
     ·纳米材料的应用第16-18页
       ·催化剂材料第16-17页
       ·传感器材料第17页
       ·生物医药领域的应用第17-18页
       ·环保领域的应用第18页
   ·纳米材料毒性研究进展第18-20页
     ·纳米材料的抗菌活性第18页
     ·纳米材料的植物毒性第18-19页
     ·纳米材料的动物毒性第19-20页
     ·纳米材料的细胞毒性第20页
   ·研究背景、意义及技术路线第20-23页
     ·研究背景第20-21页
     ·研究目的和意义第21-22页
     ·研究技术路线第22-23页
第2章 CuO NPs的表征及分散于培养基中的基本性质第23-29页
   ·引言第23页
   ·实验材料第23-24页
   ·实验方法第24-25页
     ·悬浮液配制第24页
     ·粒径测定第24页
     ·表面积测定第24页
     ·XRD表征第24页
     ·CuO NPs悬浮液Zeta电位的测定第24页
     ·CuO NPs释放Cu~(2+)含量测定第24-25页
   ·实验结果第25-28页
     ·纳米CuO的基本理化性质第25-26页
     ·纳米CuO在培养基及水中的性质对比第26-27页
     ·CuO NPs释放Cu~(2+)含量测定第27-28页
   ·本章小结第28-29页
第3章 CuO NPs对HepG2细胞的损伤作用及致毒机理第29-53页
   ·引言第29-30页
   ·实验材料第30-31页
     ·细胞株第30页
     ·实验试剂第30页
     ·溶液配制第30-31页
   ·实验方法第31-42页
     ·细胞培养第31-32页
     ·CCK-8法检测细胞活性及IC_(50)的测定第32-33页
     ·细胞内脂质过氧化物损伤(MDA)的测定第33-36页
     ·细胞内蛋白质羰基化的测定第36-37页
     ·细胞DNA氧化损伤检测第37-41页
       ·单细胞凝胶电泳(SCGE)实验第38-39页
       ·细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)免疫组化分析第39-41页
     ·细胞内活性氧类(ROS)的测定第41页
     ·NAC对纳米CuO所致HepG2细胞损伤的保护作用第41-42页
   ·实验结果第42-49页
     ·CuO NPs抑制HepG2细胞增殖及NAC干预作用第42-43页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞内MDA含量升高及NAC干预作用第43-44页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞内PC含量升高及NAC干预作用第44-45页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞DNA链断裂及NAC干预作用第45-46页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞内8-OHdG含量升高及NAC干预作用第46-47页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞内ROS水平升高及NAC干预作用第47-49页
   ·讨论第49-53页
第4章 CuO NPs诱导HepG2细胞周期阻滞及细胞凋亡作用机制第53-71页
   ·引言第53-54页
   ·实验材料第54页
     ·细胞株第54页
     ·实验药品第54页
     ·溶液配制第54页
   ·实验方法第54-62页
     ·细胞培养第54-55页
     ·纳米CuO诱导HepG2细胞周期阻滞第55-59页
       ·流式细胞术检测细胞周期阻滞第55-56页
       ·细胞RNA的提取第56页
       ·荧光定量PCR检测第56-59页
         ·反转录第一链cDNA第56-57页
         ·引物的设计第57页
         ·Real-time PCR的反应体系第57-58页
         ·Real-time PCR的反应程序第58页
         ·结果分析第58-59页
     ·纳米CuO诱导HepG2细胞凋亡第59-62页
       ·JC-1染色检测线粒体膜位电势△φ_m第59页
       ·流式细胞术检测细胞凋亡第59-61页
       ·细胞RNA的提取第61页
       ·荧光定量PCR检测第61-62页
         ·反转录第一条链cDNA第61页
         ·引物的设计第61-62页
         ·Real-time PCR的反应体系第62页
         ·Real-time PCR的反应程序第62页
         ·结果分析第62页
   ·实验结果第62-67页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞周期阻滞第62-64页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞凋亡第64-67页
   ·讨论第67-71页
第5章 结论、创新之处和研究展望第71-74页
   ·主要结论第71-73页
     ·活性氧(ROS)是CuO NPs引起HepG2细胞损伤作用的关键因素第71-72页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞周期阻滞第72页
     ·CuO NPs诱导HepG2细胞凋亡的途径是由线粒体所接到的Caspase途径第72-73页
   ·创新之处第73页
   ·研究展望第73-74页
参考文献第74-87页
致谢第87-88页
攻读硕士学位期间取得研究成果第88-89页
附录Ⅰ 文中主要缩略语中英文对照表第89-91页
附录Ⅱ 主要实验仪器与设备第91页

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