摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-11页 |
缩略词表 | 第11-14页 |
第一章 绪论 | 第14-23页 |
·参与正义RNA病毒复制的寄主因子 | 第14-17页 |
·参与招募病毒RNA及复制酶的寄/宿主因子 | 第14-16页 |
·参与病毒复制复合体形成的寄/宿主因子 | 第16页 |
·参与病毒子代RNA合成的寄/宿主因子 | 第16-17页 |
·黄瓜花叶病毒 | 第17-20页 |
·黄瓜花叶病毒病毒结构及基因组功能 | 第17-19页 |
·参与黄瓜花叶病毒侵染寄主过程的寄主因子 | 第19-20页 |
·-磷酸甘油醛脱氢酶在病毒侵染过程中的作用 | 第20-21页 |
·GAPDH的生物学功能 | 第20页 |
·GAPDH在病毒复制过程中的作用 | 第20-21页 |
·本论文的研究目的与意义 | 第21-23页 |
·研究目的与意义 | 第21-22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
第二章 以CMV1a蛋白为诱饵蛋白筛选与其互作的寄主因子 | 第23-32页 |
·材料与方法 | 第23-28页 |
·载体与文库 | 第23页 |
·酶和试剂 | 第23页 |
·CMV复制酶 1a诱饵载体的构建 | 第23页 |
·猎物载体克隆的构建 | 第23页 |
·诱饵载体和猎物载体的测试 | 第23-25页 |
·拟南芥c DNA文库筛选 | 第25-27页 |
·互作子的鉴定 | 第27页 |
·拟南芥和本氏烟同源Gap C与复制酶 1a互作的验证 | 第27页 |
·复制酶 1a蛋白甲基转移酶功能域和解旋酶功能域与Gap C2的互作 | 第27-28页 |
·结果与分析 | 第28-31页 |
·膜蛋白酵母双杂交分析CMV复制酶 1a和 2a互作 | 第28-29页 |
·文库筛选与互作子的鉴定 | 第29-30页 |
·拟南芥和本氏烟同源Gap C与复制酶 1a互作的验证 | 第30页 |
·Gap C2与复制酶 1a互作的结构域分析 | 第30-31页 |
·小结与讨论 | 第31-32页 |
第三章 1a与 2a的亚细胞定位和 1a与Gap C2的体内互作及其共定位 | 第32-39页 |
·材料与方法 | 第32-33页 |
·载体与寄主 | 第32页 |
·酶与试剂等 | 第32页 |
·重组克隆的构建 | 第32-33页 |
·农杆菌GV3101的感受态制备方法及其转化 | 第33页 |
·农杆菌浸润接种的方法 | 第33页 |
·结果与分析 | 第33-38页 |
·CMV复制酶 1a和 2a亚细胞定位 | 第33-36页 |
·荧光双分子互补(Bi FC)分析 1a蛋白与Gap C2在植物细胞中互作 | 第36页 |
·复制酶 1a蛋白与寄主因子Gap C2的共定位 | 第36-38页 |
·小结与讨论 | 第38-39页 |
第四章 Gap C含量下调对CMV侵染的影响 | 第39-47页 |
·材料与方法 | 第39-41页 |
·载体与寄主 | 第39页 |
·酶与试剂 | 第39页 |
·p TRV2-Gap C载体构建 | 第39页 |
·TRV载体的农杆菌浸润接种 | 第39页 |
·CMV接种Gap C下调的寄主植物 | 第39-40页 |
·CMV侵染植株的样品收集 | 第40页 |
·提取总RNA | 第40页 |
·提取叶片总蛋白 | 第40页 |
·Northern blot分析 | 第40-41页 |
·Western blot分析 | 第41页 |
·数据分析 | 第41页 |
·结果与分析 | 第41-46页 |
·Gap C下调对CMV复制及翻译的影响 | 第41-46页 |
·小结与讨论 | 第46-47页 |
总结与展望 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-53页 |
附录:常用溶剂配制 | 第53-54页 |
致谢 | 第54页 |