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3-磷酸甘油醛脱氢酶在CMV侵染过程中的作用机制

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
缩略词表第11-14页
第一章 绪论第14-23页
   ·参与正义RNA病毒复制的寄主因子第14-17页
     ·参与招募病毒RNA及复制酶的寄/宿主因子第14-16页
     ·参与病毒复制复合体形成的寄/宿主因子第16页
     ·参与病毒子代RNA合成的寄/宿主因子第16-17页
   ·黄瓜花叶病毒第17-20页
     ·黄瓜花叶病毒病毒结构及基因组功能第17-19页
     ·参与黄瓜花叶病毒侵染寄主过程的寄主因子第19-20页
   ·-磷酸甘油醛脱氢酶在病毒侵染过程中的作用第20-21页
     ·GAPDH的生物学功能第20页
     ·GAPDH在病毒复制过程中的作用第20-21页
   ·本论文的研究目的与意义第21-23页
     ·研究目的与意义第21-22页
     ·研究内容第22-23页
第二章 以CMV1a蛋白为诱饵蛋白筛选与其互作的寄主因子第23-32页
   ·材料与方法第23-28页
     ·载体与文库第23页
     ·酶和试剂第23页
     ·CMV复制酶 1a诱饵载体的构建第23页
     ·猎物载体克隆的构建第23页
     ·诱饵载体和猎物载体的测试第23-25页
     ·拟南芥c DNA文库筛选第25-27页
     ·互作子的鉴定第27页
     ·拟南芥和本氏烟同源Gap C与复制酶 1a互作的验证第27页
     ·复制酶 1a蛋白甲基转移酶功能域和解旋酶功能域与Gap C2的互作第27-28页
   ·结果与分析第28-31页
     ·膜蛋白酵母双杂交分析CMV复制酶 1a和 2a互作第28-29页
     ·文库筛选与互作子的鉴定第29-30页
     ·拟南芥和本氏烟同源Gap C与复制酶 1a互作的验证第30页
     ·Gap C2与复制酶 1a互作的结构域分析第30-31页
   ·小结与讨论第31-32页
第三章 1a与 2a的亚细胞定位和 1a与Gap C2的体内互作及其共定位第32-39页
   ·材料与方法第32-33页
     ·载体与寄主第32页
     ·酶与试剂等第32页
     ·重组克隆的构建第32-33页
     ·农杆菌GV3101的感受态制备方法及其转化第33页
     ·农杆菌浸润接种的方法第33页
   ·结果与分析第33-38页
     ·CMV复制酶 1a和 2a亚细胞定位第33-36页
     ·荧光双分子互补(Bi FC)分析 1a蛋白与Gap C2在植物细胞中互作第36页
     ·复制酶 1a蛋白与寄主因子Gap C2的共定位第36-38页
   ·小结与讨论第38-39页
第四章 Gap C含量下调对CMV侵染的影响第39-47页
   ·材料与方法第39-41页
     ·载体与寄主第39页
     ·酶与试剂第39页
     ·p TRV2-Gap C载体构建第39页
     ·TRV载体的农杆菌浸润接种第39页
     ·CMV接种Gap C下调的寄主植物第39-40页
     ·CMV侵染植株的样品收集第40页
     ·提取总RNA第40页
     ·提取叶片总蛋白第40页
     ·Northern blot分析第40-41页
     ·Western blot分析第41页
     ·数据分析第41页
   ·结果与分析第41-46页
     ·Gap C下调对CMV复制及翻译的影响第41-46页
   ·小结与讨论第46-47页
总结与展望第47-48页
参考文献第48-53页
附录:常用溶剂配制第53-54页
致谢第54页

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