ε-聚赖氨酸高产菌的选育及发酵过程研究
| 致谢 | 第1-5页 |
| 目录 | 第5-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-19页 |
| 1 食品防腐剂 | 第9-13页 |
| ·食品防腐剂的概述 | 第9页 |
| ·主要的化学防腐剂 | 第9-10页 |
| ·苯甲酸及其钠盐 | 第9页 |
| ·山梨酸及其钾盐 | 第9页 |
| ·丙酸及其盐 | 第9-10页 |
| ·对羟基苯甲酸酯类(尼泊金酯) | 第10页 |
| ·亚硝酸盐 | 第10页 |
| ·天然防腐剂 | 第10-13页 |
| ·植物源天然食品防腐剂 | 第10-11页 |
| ·动物源防腐剂 | 第11页 |
| ·微生物源天然防腐剂 | 第11-13页 |
| 2 ε-聚赖氨酸的概述 | 第13-19页 |
| ·ε-聚赖氨酸理化性质 | 第13页 |
| ·ε-聚赖氨酸生产菌筛选方法 | 第13-14页 |
| ·Nishikawa 的筛选方法 | 第13页 |
| ·美兰培养基筛选法 | 第13-14页 |
| ·喷涂美兰法 | 第14页 |
| ·“三明治”法 | 第14页 |
| ·ε-聚赖氨酸产生菌株 | 第14页 |
| ·ε-聚赖氨酸生物合成机理研究 | 第14-15页 |
| ·ε-聚赖氨酸抑菌机理的研究 | 第15-16页 |
| ·ε-聚赖氨酸的发酵生产的研究情况 | 第16页 |
| ·ε-聚赖氨酸的应用 | 第16-17页 |
| ·食品方面的应用 | 第16-17页 |
| ·ε-聚赖氨酸在医药化学方面的应用 | 第17页 |
| ·研究的目的和意义 | 第17-19页 |
| ·国内外食品防腐剂的现状 | 第17-18页 |
| ·食品防腐剂ε-聚赖氨酸研究的目的和意义 | 第18-19页 |
| 第二章 ε-聚赖氨酸产生菌的筛选与鉴定 | 第19-33页 |
| 1 引言 | 第19页 |
| 2 材料和方法 | 第19-24页 |
| ·实验材料 | 第19页 |
| ·实验仪器 | 第19-20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·培养基的配制 | 第20页 |
| ·分离培养基 | 第20页 |
| ·检测培养基 | 第20页 |
| ·生理生化鉴定培养基 | 第20页 |
| ·菌株的筛选及鉴定 | 第20-23页 |
| ·菌株分离 | 第20-21页 |
| ·形态观察 | 第21页 |
| ·生理生化性质的检测 | 第21页 |
| ·干重法测定菌株生物量 | 第21-22页 |
| ·发酵液测定ε-聚赖氨酸含量 | 第22页 |
| ·ε-聚赖氨酸粗品的提取 | 第22-23页 |
| ·ε-聚赖氨酸分子量的测定 | 第23页 |
| ·菌株抑菌活性试验 | 第23页 |
| ·运用 16S rDNA 进行菌种鉴定 | 第23-24页 |
| ·备选菌株总 DNA 提取 | 第23页 |
| ·备选菌株 16S rDNA 的扩增 | 第23-24页 |
| ·16S rDNA 测序结果分析 | 第24页 |
| ·系统发育树的构建 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-32页 |
| ·产ε-聚赖氨酸菌株的初筛 | 第24页 |
| ·培养基中美兰浓度的确定 | 第24-25页 |
| ·ε-聚赖氨酸产生菌的复筛 | 第25-26页 |
| ·菌株形态的观察 | 第26-27页 |
| ·菌株的生理生化特征 | 第27页 |
| ·干重法测定菌体生物量 | 第27-28页 |
| ·菌株产ε-聚赖氨酸能力的测定 | 第28页 |
| ·ε-聚赖氨酸的提取和分子量的鉴定 | 第28-29页 |
| ·ε-聚赖氨酸粗品的提取 | 第28页 |
| ·SDS-PAGE 法测定ε-聚赖氨酸的分子量 | 第28页 |
| ·ε-聚赖氨酸粗品活性的初步研究 | 第28-29页 |
| ·菌株 16SrDNA 扩增及序列分析 | 第29-32页 |
| ·备选菌株总 DNA 提取 | 第29页 |
| ·备选菌株 16S rDNA 的扩增 | 第29-30页 |
| ·16S rDNA 测序结果分析 | 第30-32页 |
| 4 本章小结 | 第32-33页 |
| 第三章 ε-聚赖氨酸发酵培养基及发酵的条件优化 | 第33-45页 |
| 1 引言 | 第33页 |
| 2 材料和方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33页 |
| ·仪器 | 第33页 |
| ·培养基 | 第33-34页 |
| ·发酵培养基成分的单因素试验 | 第34-35页 |
| ·基础发酵培养基的确定 | 第34页 |
| ·碳源对发酵产量的影响 | 第34页 |
| ·氮源对发酵产量的影响 | 第34页 |
| ·培养时间对发酵产量的影响 | 第34页 |
| ·接种量对发酵产量的影响 | 第34-35页 |
| ·初始 pH 对发酵产量的影响 | 第35页 |
| ·温度对发酵产量的影响 | 第35页 |
| ·转速对发酵产量的影响 | 第35页 |
| ·柠檬酸氢二铵对发酵产量的影响 | 第35页 |
| ·液体培养基正交试验 | 第35页 |
| ·响应面法优化液体培养基试验 | 第35页 |
| ·菌体干重、ε-聚赖氨酸产量测定试验 | 第35-36页 |
| 3 结果与分析 | 第36-44页 |
| ·单因素优化试验 | 第36-40页 |
| ·基础发酵培养基的确定 | 第36页 |
| ·碳源对发酵产量的影响 | 第36页 |
| ·氮源对发酵产量的影响 | 第36-37页 |
| ·培养时间对发酵产量的影响 | 第37页 |
| ·接种量对发酵产量的影响 | 第37-38页 |
| ·初始 pH 对发酵产量的影响 | 第38页 |
| ·温度对发酵产量的影响 | 第38-39页 |
| ·转速对发酵产量的影响 | 第39页 |
| ·柠檬酸氢二铵对发酵产量的影响 | 第39-40页 |
| ·液体培养基正交试验优化 | 第40-41页 |
| ·液体培养及响应面法优化 | 第41-43页 |
| ·ε-聚赖氨酸产生菌液体培养实验 | 第43-44页 |
| 4 本章小结 | 第44-45页 |
| 第四章 ε-聚赖氨酸产生菌的诱变选育 | 第45-50页 |
| 1 引言 | 第45-46页 |
| 2 材料与方法 | 第46-47页 |
| ·实验菌株 | 第46页 |
| ·培养基 | 第46页 |
| ·实验仪器、设备 | 第46页 |
| ·紫外线照射诱变菌株 | 第46-47页 |
| ·单孢子悬浮液的制备 | 第46页 |
| ·孢子的紫外诱变 | 第46页 |
| ·诱变菌株的筛选 | 第46页 |
| ·摇瓶发酵培养与ε-聚赖氨酸产量测定 | 第46-47页 |
| ·突变株生物量的测定 | 第47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-49页 |
| ·紫外照射对孢子的致死作用 | 第47页 |
| ·诱变筛选结果 | 第47-48页 |
| ·诱变菌种遗传稳定鉴定 | 第48页 |
| ·突变株生长量的测定 | 第48-49页 |
| 4 本章小结 | 第49-50页 |
| 结论与讨论 | 第50-52页 |
| 1 结论 | 第50页 |
| 2 讨论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-60页 |
| ABSTRACT | 第60页 |