| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-11页 |
| 第一章 流感病毒病原生物学与流感防治技术综述 | 第11-28页 |
| ·流感病毒一般特性 | 第11-12页 |
| ·A型流感病毒的基因组结构以及编码蛋白 | 第12-15页 |
| ·A型流感病毒的感染和复制 | 第15-16页 |
| ·流感流行病学 | 第16-17页 |
| ·流感病毒的抗原变异 | 第17页 |
| ·流感疫苗 | 第17-19页 |
| ·灭活疫苗 | 第17-18页 |
| ·减毒活疫苗 | 第18页 |
| ·亚单位基因工程疫苗 | 第18页 |
| ·DNA疫苗 | 第18-19页 |
| ·基因重组活载体疫苗 | 第19页 |
| ·抗流感药物 | 第19-21页 |
| ·作用于神经氨酸酶药物 | 第19-20页 |
| ·作用于M2离子通道蛋白的药物 | 第20页 |
| ·作用于病毒其它蛋白的药物 | 第20-21页 |
| ·作用于宿主的药物 | 第21页 |
| ·流感检测技术 | 第21-26页 |
| ·病原学检测 | 第21-22页 |
| ·血清学检测 | 第22-23页 |
| ·分子生物学检测 | 第23-26页 |
| ·流感的多重RT-PCR检测技术国内外研究进展 | 第26-27页 |
| ·本论文的目的和意义 | 第27-28页 |
| 第二章 A型流感病毒H1、H3、H5、H9亚型病毒核酸同步快速检测和分型的多重RT-PCR方法建立 | 第28-55页 |
| ·材料 | 第28-30页 |
| ·A型流感病毒毒株与鸡胚 | 第28-29页 |
| ·主要仪器设备和分子生物学软件 | 第29页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第29-30页 |
| ·方法 | 第30-39页 |
| ·流感病毒鸡胚扩增 | 第30页 |
| ·病毒血凝效价测定 | 第30-31页 |
| ·病毒EID_(50)(50% Egg Infection Dose)测定 | 第31页 |
| ·引物设计与优化 | 第31-32页 |
| ·病毒RNA的提取及反转录 | 第32页 |
| ·cDNA片段的单模板RT-PCR扩增 | 第32页 |
| ·cDNA片段的多模板RT-PCR扩增 | 第32-33页 |
| ·标准品质粒的构建 | 第33-37页 |
| ·PCR检测病毒RNA的灵敏度 | 第37-39页 |
| ·实验结果 | 第39-52页 |
| ·克隆质粒分子量,浓度及最终拷贝数的换算结果 | 第39页 |
| ·各亚型HA效价结果 | 第39-40页 |
| ·各亚型EID50结果 | 第40-41页 |
| ·引物设计和PCR反应条件 | 第41页 |
| ·单模板的四重引物特异性分析 | 第41-42页 |
| ·多模板的四重引物特异性分析 | 第42-43页 |
| ·单模板的五重引物特异性分析 | 第43页 |
| ·多模板的五重引物特异性分析 | 第43-44页 |
| ·单模板的五重引物特异性分析(加入H7) | 第44页 |
| ·多模板的五重引物特异性分析(加入H7) | 第44-45页 |
| ·H1、H3、H5、H9亚型流感病毒多重RT-PCR灵敏度 | 第45-51页 |
| ·样品检测 | 第51-52页 |
| ·讨论 | 第52-55页 |
| 第三章 H5N1禽流感病毒地方株的分离和特性研究 | 第55-70页 |
| ·材料 | 第55-56页 |
| ·主要试剂与耗材 | 第55-56页 |
| ·主要仪器设备和分子生物学软件 | 第56页 |
| ·方法 | 第56-59页 |
| ·样品采集过程 | 第56页 |
| ·细胞培养过程中用到的玻璃器皿的处理方法 | 第56-57页 |
| ·细胞培养室和超净工作台的消毒 | 第57页 |
| ·细胞培养与病毒的克隆与纯化 | 第57-58页 |
| ·细胞的冻存与复苏 | 第58页 |
| ·序列的生物信息学分析 | 第58页 |
| ·2株病毒人工感染Balb/c小鼠的致病性特性研究 | 第58-59页 |
| ·病毒在小鼠肺组织中滴度测定 | 第59页 |
| ·结果 | 第59-68页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株的分离鉴定 | 第59页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株的HA和NA的核苷酸测序结果 | 第59-60页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株的BLAST比对分析的结果 | 第60页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株的HA基因系统进化树分析的结果 | 第60页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株的NA基因系统进化树分析结果 | 第60-64页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株HA蛋白氨基酸同源性 | 第64页 |
| ·2株禽流感病毒H5N1地方株NA蛋白氨基酸同源性 | 第64-65页 |
| ·2株禽流感病毒感染小鼠的致病性结果 | 第65-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 研究总结 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-80页 |
| 博士在读期间发表的论文 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-84页 |
