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基于功能基因组的日本血吸虫病诊断靶点的筛选和鉴定

论文创新点第1-6页
摘要第6-7页
Abstract第7-9页
缩写词表第9-13页
第一章 文献综述第13-23页
   ·血吸虫和血吸虫病第13-15页
     ·血吸虫的主要种类和分布第13页
     ·日本血吸虫第13页
     ·血吸虫的生活史第13-14页
     ·血吸虫病的流行情况第14-15页
     ·血吸虫病的治疗第15页
   ·日本血吸虫基因组、转录组和蛋白质组研究进展第15-18页
     ·血吸虫基因组的研究第16-17页
     ·血吸虫转录组的研究第17-18页
     ·血吸虫蛋白质组的研究第18页
   ·日本血吸虫病免疫学诊断方法研究现状第18-20页
     ·常用的免疫学诊断方法第19页
     ·诊断所使用的探针第19-20页
     ·目前存在的问题第20页
   ·抗原表位预测的介绍第20-21页
   ·立项依据和研究意义第21-23页
第二章 日本血吸虫病可溶性虫卵和成虫抗原免疫组学分析第23-44页
   ·前言第23页
   ·实验材料第23-25页
     ·日本血吸虫可溶性抗原第23页
     ·研究所用的血清第23-24页
     ·主要试剂和仪器第24-25页
   ·实验方法第25-28页
     ·血清样本的收集第25-26页
     ·可溶性虫卵和成虫抗原的制备第26页
     ·双向电泳第26-27页
     ·免疫印迹第27页
     ·NC膜与双向电泳胶的比对第27-28页
     ·蛋白质点的质谱鉴定分析第28页
   ·结果与分析第28-40页
     ·不同涂片数及不同感染度与检出率的关系第28页
     ·不同的感染度和检出率的差异第28页
     ·不同涂片数计算EPG的比较第28-30页
     ·双向凝胶电泳图谱第30页
     ·2D-WB分析第30-32页
     ·双向电泳图谱上蛋白质点的选取第32-33页
     ·质谱鉴定结果第33-40页
   ·讨论第40-44页
     ·血清的采集第40页
     ·日本血吸虫虫卵免疫原性蛋白第40-44页
第三章 日本血吸虫功能基因B细胞抗原表位的预测第44-57页
   ·前言第44页
   ·实验方法第44-46页
   ·结果分析第46-55页
   ·讨论第55-57页
第四章 日本血吸虫病诊断靶点的鉴定第57-88页
   ·前言第57页
   ·实验材料第57-62页
     ·日本血吸虫虫卵和成虫的收集第57页
     ·所用载体与菌株第57页
     ·免疫酶联吸附试验所用血清第57页
     ·主要试剂与仪器第57-62页
   ·实验方法第62-73页
     ·日本血吸虫成虫总RNA抽提第62页
     ·日本血.吸虫cDNA模板制备第62-63页
     ·PCR引物的设计与合成第63-68页
     ·目的基因和载体的双酶切及回收第68-69页
     ·重组质粒的构建第69页
     ·感受态细胞的制备第69页
     ·重组质粒的转化第69-70页
     ·SDS-PAGE电泳制胶第70页
     ·候选基因在大肠杆菌中的表达第70-71页
     ·重组蛋白的纯化第71-72页
     ·Western blot检测重组蛋白第72-73页
     ·间接ELISA方法初步评价重组蛋白的诊断价值第73页
   ·结果与分析第73-85页
     ·日本血吸虫Total RNA的抽提第73-74页
     ·RT-PCR扩增目的基因的结果第74-76页
     ·四种目的基因重组质粒的鉴定第76-77页
     ·重组基因在大肠杆菌中的诱导表达第77-79页
     ·重组蛋白的纯化第79-83页
     ·重组蛋白免疫印迹结果第83-85页
     ·ELISA初步评价Sj HSP60的诊断价值第85页
   ·讨论第85-88页
参考文献第88-97页
博士期间已发表的论文第97-98页
参加的学术会议第98-99页
附件第99-101页
致谢第101页

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