| 中文摘要 | 第1-18页 |
| ABSTRACT | 第18-25页 |
| 符号说明 | 第25-27页 |
| 第一节 TIPE2对肝细胞肝癌恶性行为的影响 | 第27-52页 |
| 前言 | 第27-31页 |
| 一. 原发性肝细胞肝癌 | 第27-28页 |
| 二. TIPE2研究 | 第28-30页 |
| 三. 本节研究目的 | 第30-31页 |
| 材料 | 第31-35页 |
| 一. 病例资料 | 第31-32页 |
| 二. 细胞和动物 | 第32页 |
| 三. 试剂 | 第32-34页 |
| 四. 主要仪器设备及其他 | 第34-35页 |
| 方法 | 第35-46页 |
| 一. 肿瘤细胞系的培养 | 第35-36页 |
| 二. 脐静脉内皮细胞的分离与培养 | 第36-37页 |
| 三. 质粒DNA准备 | 第37-38页 |
| 四. 脂质体转染(Lipofectamine) | 第38-39页 |
| 五. RT-PCR | 第39-41页 |
| 六. Western blot | 第41-42页 |
| 七. 细胞活性检测 | 第42页 |
| 八. 克隆形成实验 | 第42-43页 |
| 九. 台盼蓝染色 | 第43页 |
| 十. 细胞迁移和侵袭能力检测 | 第43页 |
| 十一. 内皮细胞增殖实验 | 第43-44页 |
| 十二. 毛细血管形成实验 | 第44页 |
| 十三. 裸鼠皮下成瘤实验 | 第44页 |
| 十四. 裸鼠肝脏原位成瘤实验 | 第44-45页 |
| 十五. 免疫组化 | 第45-46页 |
| 十六. HE染色 | 第46页 |
| 十七. 统计学分析 | 第46页 |
| 结果 | 第46-50页 |
| 一. TIPE2表达降低或缺失与肝癌的侵袭转移有关 | 第46-48页 |
| 二. TIPE2抑制肝细胞肝癌在体外的生长,转移和血管形成 | 第48-49页 |
| 三. TIPE2抑制肝细胞肝癌在体内的生长和转移 | 第49-50页 |
| 讨论 | 第50-51页 |
| 小结 | 第51-52页 |
| 第二节 TIPE2抑制肝癌转移和血管形成的机制 | 第52-66页 |
| 前言 | 第52-56页 |
| 一. 肝癌侵袭转移的机制 | 第52-53页 |
| 二. RaclGTP酶 | 第53-55页 |
| 三. 本节研究目的 | 第55-56页 |
| 材料 | 第56-58页 |
| 一. 细胞 | 第56页 |
| 二. 试剂 | 第56-58页 |
| 三. 主要仪器设备及其他 | 第58页 |
| 方法 | 第58-61页 |
| 一. 细胞培养 | 第58页 |
| 二. 质粒转染 | 第58页 |
| 三. 小干扰RNA转染 | 第58-59页 |
| 四. RT-PCR | 第59页 |
| 五. 实时定量PCR | 第59-60页 |
| 六. Western blot | 第60页 |
| 七. Transwell检测细胞迁移和侵袭 | 第60页 |
| 八. 免疫共沉淀 | 第60页 |
| 九. Racl活性检测 | 第60-61页 |
| 十. 细胞骨架染色 | 第61页 |
| 十一. 内皮细胞增殖实验 | 第61页 |
| 十二. 毛细血管形成实验 | 第61页 |
| 十三. 统计学分析 | 第61页 |
| 结果 | 第61-63页 |
| 一. Racl的表达和活性与肝癌细胞的转移能力正相关 | 第61页 |
| 二. TIPE2与Racl结合并抑制其活性 | 第61-62页 |
| 三. TIPE2通过Racl通路抑制肝癌细胞的迁移和侵袭 | 第62页 |
| 四. TIPE2通过Racl通路抑制肝癌细胞促血管形成能力 | 第62-63页 |
| 五. TIPE2抑制Racl下游的效应分子 | 第63页 |
| 讨论 | 第63-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 第三节 TIPE2对肝细胞肝癌自噬的影响及其效应 | 第66-75页 |
| 前言 | 第66-69页 |
| 一. 自噬发生的过程 | 第66-68页 |
| 二. 自噬的生理功能 | 第68页 |
| 三. 自噬和肿瘤的关系 | 第68-69页 |
| 本节研究目的 | 第69页 |
| 材料 | 第69-71页 |
| 一. 细胞系 | 第69页 |
| 二. 试剂 | 第69-70页 |
| 三. 主要仪器设备及其他 | 第70-71页 |
| 方法 | 第71页 |
| 一. 细胞培养 | 第71页 |
| 二. 质粒和siRNA转染 | 第71页 |
| 三. 细胞活力检测 | 第71页 |
| 四. Western blot | 第71页 |
| 五. RT-PCR | 第71页 |
| 六. 免疫荧光染色 | 第71页 |
| 七. 统计学分析 | 第71页 |
| 结果 | 第71-73页 |
| 一. TIPE2通过非凋亡途径促进肝癌细胞死亡 | 第71-72页 |
| 二. TIPE2促进肝癌细胞的自噬 | 第72页 |
| 三. TIPE2促进自噬性细胞死亡 | 第72页 |
| 四. TIPE2通过Racl通路促进细胞死亡 | 第72-73页 |
| 讨论 | 第73-74页 |
| 小结 | 第74-75页 |
| 附图表 | 第75-97页 |
| 参考文献 | 第97-106页 |
| 致谢 | 第106-107页 |
| 在读期间主要科研成果及获得荣誉 | 第107-108页 |
| 附件 | 第108-137页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第137页 |
