摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-5页 |
目录 | 第5-8页 |
第一章 文献综述 | 第8-18页 |
·BLyS 简述 | 第8页 |
·BLyS 的相关受体 | 第8-10页 |
·BLyS 的信号通路 | 第10-11页 |
·BLyS 的生物学功能 | 第11-12页 |
·对 B 淋巴细胞的作用 | 第11页 |
·对 T 淋巴细胞的作用 | 第11-12页 |
·BLyS 相关疾病与治疗 | 第12-15页 |
·系统性红斑狼疮(SLE) | 第12页 |
·类风湿性关节炎(RA) | 第12-13页 |
·干燥综合征(SS) | 第13-14页 |
·其他相关疾病 | 第14-15页 |
·APRIL 简述 | 第15页 |
·小结 | 第15-18页 |
第二章 BC-Linker-Fc-pET28a 和人 IgG1 Fc-pET28a 重组质粒构建 | 第18-38页 |
·实验材料 | 第18页 |
·实验试剂 | 第18-20页 |
·实验仪器 | 第20-21页 |
·溶液的配制 | 第21-25页 |
·实验方法 | 第25-31页 |
·BC-Linker-Fc-pET28a 重组质粒的构建 | 第25-29页 |
·BC-Linker 基因的获得 | 第25页 |
·人 IgG1 Fc 基因的获得 | 第25-27页 |
·BC-Linker-Fc- pET28a 重组体系的连接 | 第27页 |
·重组质粒转化 JM109 感受态 | 第27页 |
·菌落 PCR | 第27-28页 |
·重组质粒的提取 | 第28-29页 |
·重组质粒的双酶切鉴定 | 第29页 |
·人 IgG1 Fc 重组质粒的构建 | 第29-31页 |
·重组体系的构建 | 第29-30页 |
·重组质粒转化 JM109 感受态 | 第30页 |
·菌落 PCR | 第30页 |
·重组质粒的提取及双酶切鉴定 | 第30-31页 |
·实验结果 | 第31-37页 |
·BC-Linker-Fc-pET28a 重组质粒的构建 | 第31-35页 |
·BC-Linker-Fc-pET28a 重组体系的建立 | 第31-34页 |
·菌落 PCR 鉴定和双酶切鉴定 | 第34-35页 |
·人 IgG1 Fc- pET28a 重组质粒的构建 | 第35-37页 |
·小结 | 第37-38页 |
第三章 BC-Linker-Fc 和人 IgG1Fc 融合蛋白的表达与纯化 | 第38-49页 |
·实验方法 | 第38-43页 |
·BC-Linker-Fc 菌种筛选 | 第38-40页 |
·重组质粒转化 | 第38页 |
·少量表达筛选 | 第38页 |
·SDS-PAGE 检测蛋白表达情况 | 第38-39页 |
·不同条件下菌种的表达量检测 | 第39-40页 |
·菌株的保存 | 第40页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白的大量表达及菌液处理 | 第40页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白的纯化 | 第40-42页 |
·蛋白 A 免疫亲和层析柱纯化 | 第41页 |
·镍离子金属螯合层析柱纯化 | 第41页 |
·SDS-PAGE 及透析 | 第41-42页 |
·人 IgG1 Fc 融合蛋白的表达与纯化 | 第42-43页 |
·少量表达筛选 | 第42页 |
·人 IgG1 Fc 蛋白的纯化 | 第42-43页 |
·实验结果 | 第43-48页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白的表达和纯化 | 第43-47页 |
·高表达菌株的筛选 | 第43页 |
·不同条件下的少量诱导实验 | 第43-44页 |
·高表达菌株的大量诱导表达 | 第44页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白的蛋白 A 免疫亲和层析柱纯化 | 第44-46页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白的 Ni 金属螯合亲和层析柱纯化 | 第46-47页 |
·人 IgG1 Fc 蛋白的表达与纯化 | 第47-48页 |
·小结 | 第48-49页 |
第四章 BC-Linker-Fc 融合蛋白的活性分析 | 第49-52页 |
·实验方法 | 第49页 |
·ELISA 分析鉴定 BC-Linker-Fc 融合蛋白 | 第49页 |
·BC-Linker-Fc 与 BLyS 的结合实验 | 第49页 |
·实验结果 | 第49-51页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白被 HRP-羊抗人 IgG 单克隆抗体识别 | 第49-50页 |
·BC-Linker-Fc 融合蛋白与 BLyS 良好结合 | 第50-51页 |
·小结 | 第51-52页 |
第五章 结论与展望 | 第52-55页 |
参考文献 | 第55-60页 |
发表论文和参加科研情况 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |