| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征简介 | 第10页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征研究进展 | 第10-11页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒 | 第10-11页 |
| ·PRRSV的抗原性 | 第11页 |
| ·PRRSV分子生物学研究进展 | 第11-13页 |
| ·PRRSV基因组结构与功能 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的蛋白质 | 第12-13页 |
| ·PRRS诊断方法研究进展 | 第13-15页 |
| ·病原学诊断 | 第13页 |
| ·血清学诊断方法 | 第13-14页 |
| ·分子生物学诊断 | 第14-15页 |
| ·PRRS疫苗研究进展 | 第15-16页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第15页 |
| ·PRRS灭活疫苗 | 第15页 |
| ·基因工程疫苗 | 第15-16页 |
| ·本研究的意义 | 第16-17页 |
| 第二章 猪繁殖与呼吸综合征GP5基因的克隆与序列分析 | 第17-24页 |
| ·实验材料 | 第17-18页 |
| ·病料 | 第17页 |
| ·克隆菌种与载体 | 第17页 |
| ·酶和试剂 | 第17页 |
| ·溶液及其配制 | 第17页 |
| ·仪器 | 第17-18页 |
| ·实验方法 | 第18-21页 |
| ·引物的设计与合成 | 第18页 |
| ·RNA的提取、反转录 | 第18页 |
| ·反转录 | 第18-19页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第19页 |
| ·PCR产物的回收与纯化 | 第19页 |
| ·目的基因的克隆 | 第19-20页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第20-21页 |
| ·结果 | 第21-22页 |
| ·基因扩增 | 第21页 |
| ·基因克隆 | 第21页 |
| ·重组质粒的序列分析 | 第21-22页 |
| ·讨论 | 第22-24页 |
| 第三章 猪繁殖与呼吸综合征GP5的表达纯化与活性分析 | 第24-34页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·实验动物 | 第24页 |
| ·感受态细胞、原核表达载体 | 第24页 |
| ·酶和试剂 | 第24页 |
| ·仪器 | 第24-25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-29页 |
| ·结果 | 第29-32页 |
| ·表达用引物PCR扩增产物 | 第29-30页 |
| ·重组表达质粒的鉴定 | 第30页 |
| ·表达产物的SDS—PAGE电泳 | 第30页 |
| ·表达产物的可溶性分析、包涵体的收集与纯化 | 第30-31页 |
| ·纯化蛋白的浓度测定 | 第31页 |
| ·WESTERN-BLOT分析 | 第31-32页 |
| ·免疫实验结果 | 第32页 |
| ·讨论 | 第32-34页 |
| 第四章 猪繁殖与呼吸综合征抗体ELISA检测方法的建立 | 第34-41页 |
| ·材料与方法 | 第34-37页 |
| ·试剂与材料 | 第34页 |
| ·仪器 | 第34页 |
| ·间接ELISA操作流程 | 第34-35页 |
| ·标准血清的制备 | 第35页 |
| ·间接ELISA最佳工作条件的确定 | 第35-37页 |
| ·结果 | 第37-40页 |
| ·间接ELISA最佳工作条件的确定 | 第37-40页 |
| ·讨论 | 第40-41页 |
| 第五章 猪繁殖与呼吸综合征ELISA抗体检测试剂盒生产工艺研究报告 | 第41-49页 |
| ·原料与半成品制造 | 第41-46页 |
| ·生产用种子的制备 | 第41-42页 |
| ·生产抗原的制备 | 第42-43页 |
| ·标准血清的制备 | 第43-44页 |
| ·间接ELISA最佳反应条件的确定 | 第44-45页 |
| ·酶标板包被 | 第45页 |
| ·试剂盒保存期实验 | 第45-46页 |
| ·几种试剂的配置 | 第46页 |
| ·试剂盒成品制造 | 第46-49页 |
| ·试剂盒包装 | 第46页 |
| ·试剂盒组成 | 第46-47页 |
| ·作用和用途 | 第47页 |
| ·用法和判定 | 第47-48页 |
| ·贮藏 | 第48页 |
| ·规格 | 第48-49页 |
| 第六章 全文结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56-57页 |
| 导师简介 | 第57页 |
