| 论文摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 引言 | 第11页 |
| 1 绪论 | 第11-22页 |
| ·枝角类生殖生物学研究概况 | 第11-14页 |
| ·枝角类生殖系统结构研究 | 第11-13页 |
| ·枝角类生殖转化的外界环境因子诱导研究 | 第13页 |
| ·枝角类生殖转化的内部调控机理研究 | 第13-14页 |
| ·细胞周期检测点激酶 1（checkpoint kinase 1，Chk1）的研究概况 | 第14-17页 |
| ·Chk1 的结构和功能 | 第14-15页 |
| ·Chk1 的研究现状 | 第15-17页 |
| ·热休克蛋白 90（Heat Shock Proteins 90,Hsp90）的研究概述 | 第17-19页 |
| ·Hsp90 的结构和功能 | 第17-18页 |
| ·Hsp90 的研究现状 | 第18-19页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第19-22页 |
| 2 蚤状溞 Chk1 基因全长 cDNA 的克隆 | 第22-41页 |
| ·实验材料和主要仪器 | 第22-24页 |
| ·实验溞来源及驯化 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22-23页 |
| ·引物序列 | 第23页 |
| ·测序 | 第23页 |
| ·主要溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-30页 |
| ·蚤状溞总 RNA 的提取 | 第24页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第24-25页 |
| ·蚤状溞 Chk1 基因目的片段的克隆 | 第25页 |
| ·感受态细胞的制备、目的片段的连接和转化 | 第25-27页 |
| ·RACE 扩增蚤状溞 Chk1 基因的全长序列 | 第27-29页 |
| ·蚤状溞 Chk1 基因的序列分析 | 第29-30页 |
| ·实验结果与分析 | 第30-37页 |
| ·蚤状溞总 RNA 提取及检测 | 第30页 |
| ·蚤状溞 Chk1 基因的特异性片段获取 | 第30页 |
| ·蚤状溞 Chk1 基因全长 cDNA 的克隆 | 第30-31页 |
| ·蚤状溞 Chk1 序列特征分析 | 第31-34页 |
| ·蚤状溞 Chk1 结构分析 | 第34-35页 |
| ·蚤状溞 Chk1 氨基酸序列同源性分析 | 第35-37页 |
| ·讨论 | 第37-40页 |
| ·蚤状溞的暂养 | 第37-38页 |
| ·蚤状溞总 RNA 的提取 | 第38页 |
| ·扩增目的片段兼并引物的设计 | 第38-39页 |
| ·蚤状溞 Chk1 基因的序列分析和系统发育分析 | 第39-40页 |
| ·本章小结 | 第40-41页 |
| 3 蚤状溞 heat shock protein 90（Hsp90）基因全长 cDNA 的克隆 | 第41-54页 |
| ·实验材料和主要仪器 | 第41页 |
| ·实验溞来源及驯化 | 第41页 |
| ·主要试剂 | 第41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| ·引物序列 | 第41页 |
| ·测序 | 第41页 |
| ·主要溶液的配制 | 第41页 |
| ·实验方法 | 第41-43页 |
| ·蚤状溞总 RNA 的提取 | 第41页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第41-42页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因目的片段的克隆 | 第42页 |
| ·感受态细胞的制备、目的片段的连接和转化 | 第42页 |
| ·RACE 扩增蚤状溞 Hsp90 基因的全长序列 | 第42-43页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因的序列分析 | 第43页 |
| ·实验结果与分析 | 第43-52页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因的特异性片段获取 | 第43页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因全长的克隆 | 第43-44页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 序列特征分析 | 第44-47页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 结构分析 | 第47-49页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 氨基酸序列同源性分析 | 第49-52页 |
| ·讨论 | 第52-53页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因与生殖转化的关系 | 第52页 |
| ·蚤状溞 Hsp90 基因序列的分析和系统发育分析 | 第52-53页 |
| ·本章小结 | 第53-54页 |
| 4 Chk1 基因 mRNA 在蚤状溞不同生殖状态下的表达研究 | 第54-63页 |
| ·实验材料和主要仪器 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·蚤状溞不同生殖状态的总 RNA 提取 | 第54页 |
| ·荧光定量 PCR 引物的设计 | 第54-55页 |
| ·荧光定量 cDNA 第一链的合成 | 第55页 |
| ·荧光定量 PCR 分析 | 第55-56页 |
| ·试验数据分析和公式 | 第56页 |
| ·实验结果与分析 | 第56-59页 |
| ·蚤状溞各生殖状态下样品的采集 | 第56页 |
| ·蚤状溞总 RNA 提取 | 第56-57页 |
| ·荧光定量 PCR 最佳内参基因的筛选 | 第57页 |
| ·荧光定量 PCR 最佳引物探索 | 第57-58页 |
| ·Chk1 mRNA 在蚤状溞各生殖状态下的表达差异 | 第58-59页 |
| ·讨论 | 第59-62页 |
| ·荧光定量样品的采集 | 第59-60页 |
| ·蚤状溞不同生殖状态下 Chk1 mRNA 的表达水平 | 第60-62页 |
| ·本章小结 | 第62-63页 |
| 5 Hsp90 基因 mRNA 在蚤状溞不同生殖状态下的表达研究 | 第63-68页 |
| ·实验材料和主要仪器 | 第63页 |
| ·实验方法 | 第63页 |
| ·蚤状溞不同生殖状态的总 RNA 提取 | 第63页 |
| ·荧光定量 PCR 引物的设计 | 第63页 |
| ·荧光定量 cDNA 第一链的合成 | 第63页 |
| ·荧光定量 PCR 分析 | 第63页 |
| ·试验数据分析和公式 | 第63页 |
| ·实验结果与分析 | 第63-65页 |
| ·荧光定量 PCR 最佳引物探索 | 第63-64页 |
| ·Hsp90 mRNA 在蚤状溞各生殖状态下的表达差异 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| ·蚤状溞不同生殖状态下 Hsp90 mRNA 的表达水平 | 第65-66页 |
| ·蚤状溞生殖转化的内外因分析 | 第66-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 6 结论与创新点 | 第68-70页 |
| ·结论 | 第68-69页 |
| ·创新点 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
| 在学研究成果 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
