| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 符号说明 | 第12-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-28页 |
| 第一节 细胞内钙离子信号的调控 | 第13-16页 |
| ·细胞内钙离子平衡 | 第13-14页 |
| ·免疫细胞钙离子信号的重要调节作用 | 第14-16页 |
| 第二节 CRAC的研究现状 | 第16-28页 |
| ·CRAC通道Orai及其调节分子STIM分子身份的确定 | 第16-17页 |
| ·Orai通道的研究现状 | 第17-20页 |
| ·STIM的研究现状 | 第20-28页 |
| 第二章 材料与方法 | 第28-52页 |
| 第一节 实验材料 | 第28-34页 |
| ·大肠杆菌菌株 | 第28页 |
| ·细胞系 | 第28-29页 |
| ·质粒 | 第29-30页 |
| ·试剂、工具酶及耗材 | 第30-31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·主要溶液的配制 | 第31-34页 |
| 第二节 实验方法 | 第34-52页 |
| ·基因克隆 | 第34-38页 |
| ·蛋白的表达与纯化 | 第38-40页 |
| ·蛋白晶体的生长 | 第40-42页 |
| ·数据收集、结构的解析和修正 | 第42-47页 |
| ·细胞和生理学实验 | 第47-52页 |
| 第三章 SOAR的X射线晶体学研究 | 第52-72页 |
| 第一节 hsSOAR的基本信息预测 | 第52-53页 |
| ·二级结构预测以及氨基酸范围的确定 | 第52页 |
| ·hsSOAR蛋白的基本性质预测 | 第52-53页 |
| ·不同种属SOAR的序列比较 | 第53页 |
| 第二节 hsSOAR的基因克隆 | 第53-54页 |
| ·基因的扩增和质粒的构建 | 第53-54页 |
| ·突变的引入 | 第54页 |
| 第三节 蛋白表达和纯化 | 第54-57页 |
| 第四节 SOAR蛋白晶体的生长 | 第57-61页 |
| ·结晶条件的初步筛选 | 第57-58页 |
| ·结晶条件的优化 | 第58-60页 |
| ·晶体的冻存和防冻剂的选择 | 第60-61页 |
| ·SOAR硒代衍生物的表达纯化和晶体生长 | 第61页 |
| 第五节 数据收集和结构解析 | 第61-67页 |
| ·数据收集 | 第61-63页 |
| ·结构的解析 | 第63-67页 |
| 第六节 模型搭建和结构修正 | 第67-72页 |
| ·初始模型的模型搭建 | 第67-68页 |
| ·初始模型代入母体数据 | 第68页 |
| ·数据的修正 | 第68-72页 |
| 第四章 STIM1-CCR的X射线晶体学研究 | 第72-83页 |
| 第一节 STIM1-CCR的基本信息预测 | 第72-73页 |
| ·二级结构预测以及氨基酸范围的确定 | 第72页 |
| ·STIM1-CCR蛋白质基本性质预测 | 第72-73页 |
| 第二节 ceSTIM1-CCR的基因克隆蛋白表达及晶体生长 | 第73页 |
| 第三节 ceSTIM1-CCR数据收集和结构解析 | 第73-78页 |
| ·结构的解析 | 第75-77页 |
| ·相位的改善 | 第77-78页 |
| 第四节 模型搭建和结构修正 | 第78-83页 |
| ·初始模型的搭建 | 第78-80页 |
| ·结构的修正 | 第80-83页 |
| 第五章 SOAR的结构分析 | 第83-101页 |
| 第一节 SOAR的整体结构 | 第83-84页 |
| 第二节 SOAR的二聚化 | 第84-91页 |
| ·SOAR二聚化的结构分析 | 第84-85页 |
| ·SOAR二聚体生理学意义的证明 | 第85-91页 |
| 第三节 SOAR的正电荷聚集区 | 第91-96页 |
| ·SOAR正电荷聚集区的结构分析 | 第91-92页 |
| ·SOAR正电荷聚集区生理学意义的证明 | 第92-96页 |
| 第四节 MAT突变体的生物学功能 | 第96-101页 |
| ·分析超速离心实验对hsSOAR-MAT聚集形式的的确定 | 第97页 |
| ·MAT突变体与Orai1的免疫共沉淀 | 第97页 |
| ·MAT突变体在细胞内的定位实验 | 第97-99页 |
| ·STIM1-MAT突变体的胞内钙离子浓度测定 | 第99-101页 |
| 第六章 STIM1-CCR的结构分析 | 第101-110页 |
| 第一节 STIM1-CCR的结构 | 第101-102页 |
| 第二节 STIM1-CCR与SOAR结构的比较 | 第102-103页 |
| ·整体结构的比较 | 第102-103页 |
| ·二聚体的形成 | 第103页 |
| 第三节 STIM1-CCR的αA螺旋 | 第103-107页 |
| ·STIM1-CCR中αA与SOAR结构域的相互作用 | 第103-104页 |
| ·STIM1-CCR中αA的生理学意义 | 第104-107页 |
| 第四节 线虫STIM1与人源STIM1功能的相似性 | 第107-110页 |
| 第七章 结论 | 第110-113页 |
| 第八章 攻读学位期间其他研究课题 | 第113-115页 |
| 第一节 Dlg1-Mpp7-Mals3三元复合物组装的结构基础研究 | 第113页 |
| 第二节 脑膜炎奈瑟菌外膜脂蛋白GNA1946的结构研究 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-119页 |
| 致谢 | 第119-120页 |
| 个人简历 | 第120-122页 |
