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ECSCR通过TGFβ1信号通路抑制肝细胞癌生长和侵袭转移的研究

摘要第1-9页
Abstract第9-14页
目录第14-16页
英文縮写词对照表第16-21页
前言第21-23页
材料与方法第23-40页
 1. 肝细胞癌组织标本的收集第23-24页
   ·新鲜组织标本的收集第23页
   ·石蜡组织标本的收集第23-24页
 2. 临床病理学研究第24页
 3. 临床随访研究第24-25页
 4. 半定量RT-PCR和荧光实时定量Real-time PCR第25-28页
   ·组织总RNA的提取第25页
   ·细胞总RNA的提取第25-26页
   ·RNA的定量及质量检测第26页
   ·逆转录反应(Reverse Transcription,RT)第26页
   ·半定量RT-PCR反应第26-27页
   ·荧光实时定量Real-time PCR反应第27-28页
 5. 蛋白质免疫印迹(Western-blot)第28-30页
   ·组织总蛋白的提取第28页
   ·细胞总蛋白的提取第28-29页
   ·总蛋白质浓度测定第29页
   ·SDS-PAGE电泳及蛋白质免疫印迹第29-30页
 6. 免疫组织化学研究第30-32页
 7. 细胞培养第32-33页
   ·细胞系和细胞培养环境第32页
   ·细胞的复苏第32页
   ·细胞的传代第32-33页
   ·细胞的冻存第33页
 8. 细胞转染第33-34页
 9. 免疫荧光实验第34-35页
   ·组织免疫荧光第34页
   ·细胞免疫荧光第34-35页
   ·细胞骨架免疫荧光染色第35页
 10. 体外细胞学实验第35-37页
   ·绘制细胞生长曲线第35-36页
   ·集落形成实验第36页
   ·划痕愈合实验(Wound-Healing Assay)第36页
   ·Transwell侵袭小室实验(Transwell Assay)第36-37页
 11. 肿瘤信号通路筛选第37-38页
 12. 体内实验第38页
   ·裸鼠皮下成瘤实验第38页
   ·裸鼠肝脏被膜下原位移植瘤实验第38页
 13. 统计学分析方法第38-40页
结果第40-59页
 1. ECSCR mRNA和蛋白在肝癌组织与肝癌细胞系中均呈显著性低表达第40-41页
 2. ECSCR低表达与肝癌临床病理特征密切相关第41页
 3. ECSCR低表达与肝癌患者不良预后密切相关第41-42页
 4. 过表达ECSCR在体外能显著抑制肝癌细胞的增殖和侵袭运动能力第42-44页
 5. ECSCR通过抑制TGFβ1/Smad信号通路调控肝癌细胞的增殖和侵袭运动第44-45页
 6. 过表达ECSCR可在体内抑制肝癌细胞的增殖和肝内及肺转移第45-59页
讨论第59-64页
结论第64-65页
参考文献第65-72页
综述第72-85页
 参考文献第80-85页
攻读学位期间主要的研究成果第85-86页
致谢第86页

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