摘要 | 第1-9页 |
Abstract | 第9-14页 |
目录 | 第14-16页 |
英文縮写词对照表 | 第16-21页 |
前言 | 第21-23页 |
材料与方法 | 第23-40页 |
1. 肝细胞癌组织标本的收集 | 第23-24页 |
·新鲜组织标本的收集 | 第23页 |
·石蜡组织标本的收集 | 第23-24页 |
2. 临床病理学研究 | 第24页 |
3. 临床随访研究 | 第24-25页 |
4. 半定量RT-PCR和荧光实时定量Real-time PCR | 第25-28页 |
·组织总RNA的提取 | 第25页 |
·细胞总RNA的提取 | 第25-26页 |
·RNA的定量及质量检测 | 第26页 |
·逆转录反应(Reverse Transcription,RT) | 第26页 |
·半定量RT-PCR反应 | 第26-27页 |
·荧光实时定量Real-time PCR反应 | 第27-28页 |
5. 蛋白质免疫印迹(Western-blot) | 第28-30页 |
·组织总蛋白的提取 | 第28页 |
·细胞总蛋白的提取 | 第28-29页 |
·总蛋白质浓度测定 | 第29页 |
·SDS-PAGE电泳及蛋白质免疫印迹 | 第29-30页 |
6. 免疫组织化学研究 | 第30-32页 |
7. 细胞培养 | 第32-33页 |
·细胞系和细胞培养环境 | 第32页 |
·细胞的复苏 | 第32页 |
·细胞的传代 | 第32-33页 |
·细胞的冻存 | 第33页 |
8. 细胞转染 | 第33-34页 |
9. 免疫荧光实验 | 第34-35页 |
·组织免疫荧光 | 第34页 |
·细胞免疫荧光 | 第34-35页 |
·细胞骨架免疫荧光染色 | 第35页 |
10. 体外细胞学实验 | 第35-37页 |
·绘制细胞生长曲线 | 第35-36页 |
·集落形成实验 | 第36页 |
·划痕愈合实验(Wound-Healing Assay) | 第36页 |
·Transwell侵袭小室实验(Transwell Assay) | 第36-37页 |
11. 肿瘤信号通路筛选 | 第37-38页 |
12. 体内实验 | 第38页 |
·裸鼠皮下成瘤实验 | 第38页 |
·裸鼠肝脏被膜下原位移植瘤实验 | 第38页 |
13. 统计学分析方法 | 第38-40页 |
结果 | 第40-59页 |
1. ECSCR mRNA和蛋白在肝癌组织与肝癌细胞系中均呈显著性低表达 | 第40-41页 |
2. ECSCR低表达与肝癌临床病理特征密切相关 | 第41页 |
3. ECSCR低表达与肝癌患者不良预后密切相关 | 第41-42页 |
4. 过表达ECSCR在体外能显著抑制肝癌细胞的增殖和侵袭运动能力 | 第42-44页 |
5. ECSCR通过抑制TGFβ1/Smad信号通路调控肝癌细胞的增殖和侵袭运动 | 第44-45页 |
6. 过表达ECSCR可在体内抑制肝癌细胞的增殖和肝内及肺转移 | 第45-59页 |
讨论 | 第59-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-72页 |
综述 | 第72-85页 |
参考文献 | 第80-85页 |
攻读学位期间主要的研究成果 | 第85-86页 |
致谢 | 第86页 |