| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 1 前言 | 第8-15页 |
| ·植物重要抗性反应--过敏反应(hypersensitive response,HR) | 第8-9页 |
| ·植物抗病基因 | 第9-11页 |
| ·抗病基因的进化 | 第11-12页 |
| ·烟草TMV抗性基因,N基因 | 第12-13页 |
| ·烟草花叶病毒TMV的激发子,p50 | 第13-14页 |
| ·研究的目的与意义 | 第14-15页 |
| 2 材料与方法 | 第15-24页 |
| ·烟草材料和TMV菌株 | 第15页 |
| ·烟草栽培种的杂交与种子采收 | 第15页 |
| ·种子发芽与计数 | 第15-16页 |
| ·存活苗的突变鉴定 | 第16-18页 |
| ·N基因突变类型的鉴定 | 第18-21页 |
| ·N基因特异性引物与测序引物的设计 | 第18-19页 |
| ·利用PCR鉴定突变类型的方法 | 第19-20页 |
| ·N基因的重测序 | 第20-21页 |
| ·N基因在烟草栽培种Hicks Broadleaf中的同源序列分析 | 第21-24页 |
| ·烟草数据库N基因同源序列的分析 | 第21页 |
| ·N基因家族的保守引物设计 | 第21-23页 |
| ·N基因家族的PCR扩增及同源体克隆 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-32页 |
| ·Hicks Broadleaf中N基因家族的分析 | 第24-25页 |
| ·烟草数据库N基因同源体序列 | 第24页 |
| ·保守引物扩增得到的N基因同源体 | 第24-25页 |
| ·N基因同源体序列合并结果 | 第25页 |
| ·N基因功能丧失突变率 | 第25-26页 |
| ·N基因突变株突变类型的鉴定 | 第26-29页 |
| ·N.glutinosa各基因型中N基因比较 | 第29-32页 |
| 4 讨论 | 第32-34页 |
| ·Hicks broadleaf中的N基因同源体的数量 | 第32页 |
| ·N基因在N.glutinosa各基因型中是保守的 | 第32-33页 |
| ·N基因的进化 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-40页 |
| 附录:部分试验的详细步骤以及引物序列 | 第40-48页 |
| 1 引物序列及类型 | 第40-42页 |
| 2 注射缓冲液配方 | 第42-43页 |
| 3 PCR产物回收步骤 | 第43页 |
| 4 PCR回收产物连接反应 | 第43-44页 |
| 5 连接产物的化学转化 | 第44页 |
| 6 PCR产物消化反应 | 第44页 |
| 7 植物基因组DNA抽提,CTAB大量法 | 第44-45页 |
| 8 重测序的N基因修正的原N基因测序错误 | 第45-46页 |
| 9 N.glutinosa中N1与N2的序列差异及所处位置 | 第46-47页 |
| 10 本研究的PCR体系 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48页 |
