| 致谢 | 第1-10页 |
| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-23页 |
| 前言 | 第14页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的分类及生理学特性 | 第14-16页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的特性 | 第15页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的脱氢酶系统 | 第15-16页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的葡萄糖代谢途径 | 第16-18页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的葡萄糖胞外代谢途径 | 第17-18页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌的葡萄糖胞内代谢途径 | 第18页 |
| ·氧化葡萄糖杆菌葡萄糖代谢酶系的工业应用 | 第18-21页 |
| ·二羟基丙酮的生产 | 第19-20页 |
| ·化学催化法 | 第19-20页 |
| ·微生物转化法 | 第20页 |
| ·D-葡萄糖酸的生产 | 第20-21页 |
| ·电解氧化法 | 第20-21页 |
| ·微生物发酵法 | 第21页 |
| ·微生物酶转化法 | 第21页 |
| ·本研究的目的及内容 | 第21-23页 |
| 第二章 氧化葡萄糖杆菌膜结合葡萄糖酸脱氢酶的敲除 | 第23-36页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·菌种和质粒 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23-24页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-31页 |
| ·DNA操作 | 第25-27页 |
| ·感受态细胞制备 | 第27页 |
| ·菌株DHA3-9的gadH基因扩增及测序 | 第27-28页 |
| ·敲除用载体pk18mobsacB-△gadH的构建 | 第28-29页 |
| ·菌株DHA3-9与含质粒pk18mobsacB-△gadH的WM3064进行接 | 第29-30页 |
| ·突变体DHA-△gadH的筛选 | 第30页 |
| ·菌株DHA3-9与DHA-△gadH 2KGA与5KGA积累量的比较 | 第30-31页 |
| ·结果与分析 | 第31-35页 |
| ·菌株DHA3-9的gadH基因扩增及测序 | 第31页 |
| ·菌株DHA3-9的gadH基因的敲除 | 第31-34页 |
| ·菌株DHA3-9与DHA-△gadH 2KGA积累量的比较 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第35-36页 |
| 第三章 菌株DHA-△gadH的生长和催化性能研究 | 第36-46页 |
| ·实验材料 | 第36-37页 |
| ·菌种 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·培养基与培养条件 | 第36-37页 |
| ·实验仪器 | 第37页 |
| ·实验方法 | 第37-41页 |
| ·生长的测定 | 第37页 |
| ·葡萄糖代谢产物测定 | 第37-41页 |
| ·高浓度葡萄糖酸转化反应 | 第41页 |
| ·结果与分析 | 第41-44页 |
| ·菌株DHA3-9和DHA-△gadH在葡萄糖培养基中的生长 | 第41-42页 |
| ·葡萄糖代谢产物测定 | 第42-43页 |
| ·高浓度葡萄糖酸转化反应 | 第43-44页 |
| ·结论 | 第44-46页 |
| 第四章 氧化葡萄糖杆菌膜结合葡萄糖脱氢酶的敲除 | 第46-57页 |
| ·实验材料 | 第46-48页 |
| ·菌种与质粒 | 第46页 |
| ·主要试剂 | 第46-47页 |
| ·培养基与缓冲液 | 第47页 |
| ·主要仪器 | 第47-48页 |
| ·实验方法 | 第48-51页 |
| ·DHA操作 | 第48页 |
| ·感受态细胞制备 | 第48-49页 |
| ·菌株DHA3-9的mgdH基因扩增及测序 | 第49页 |
| ·敲除用载体pk18mobsacB-△mgdH的构建 | 第49-51页 |
| ·G.oxydans DHA-△mgdH突变体的构建 | 第51页 |
| ·菌株DHA3-9与DHA-△mgdH葡萄糖酸积累量的比较 | 第51页 |
| ·结果与分析 | 第51-56页 |
| ·菌株DHA3-9的mgdH基因扩增及测序 | 第51-52页 |
| ·敲除用载体pk18mobsacB-AmgdH的构建 | 第52-53页 |
| ·G.oxydans DHA-△mgdH突变体的构建与筛选 | 第53-55页 |
| ·菌株DHA3-9与DHA-△mgdH葡萄糖酸积累量的比较 | 第55-56页 |
| ·结论 | 第56-57页 |
| 第五章 菌株DHA-△mgdH的生长和催化性能研究 | 第57-67页 |
| ·实验材料 | 第57-58页 |
| ·菌株 | 第57页 |
| ·主要试剂 | 第57页 |
| ·培养基、培养条件与缓冲液 | 第57页 |
| ·主要仪器 | 第57-58页 |
| ·实验方法 | 第58-60页 |
| ·菌株△mgdH生长性质的研究 | 第58-59页 |
| ·突变菌在葡萄糖培养基上的生长与产酸特性 | 第58页 |
| ·不同碳源中乙酸缓冲液对菌株生长状况的影响 | 第58页 |
| ·不同浓度的乙酸缓冲液对菌株在葡萄糖培养基上生长的影响 | 第58-59页 |
| ·菌株△mgdH催化性质的研究 | 第59-60页 |
| ·mgdH基因敲除对甘油脱氢酶活性的影响 | 第59页 |
| ·菌株△mgdH的葡萄糖代谢产物检测 | 第59-60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·菌株△mgdH生长性质的研究 | 第60-63页 |
| ·突变菌在葡萄糖培养基上的生长与产酸特性 | 第60-61页 |
| ·不同碳源中乙酸缓冲液对菌株生长状况的影响 | 第61-62页 |
| ·不同浓度的乙酸对菌株在葡萄糖培养基上生长的影响 | 第62-63页 |
| ·AmgdH突鰊催化性质的研究 | 第63-65页 |
| ·mgdH基因敲除对甘油脱氢酶活性的影响 | 第63-64页 |
| ·菌株△mgdH的葡萄糖代谢产物检测 | 第64-65页 |
| ·讨论 | 第65-67页 |
| 第六章 结论与展望 | 第67-69页 |
| ·研究结论 | 第67-68页 |
| ·D-葡萄糖酸脱氢酶基因(gadH)的敲除与突变菌催化性质研究 | 第67页 |
| ·D-葡萄糖脱氢酶基因(mgdH)的敲除与突变菌葡萄糖代谢途径研究 | 第67-68页 |
| ·创新点 | 第68页 |
| ·展望 | 第68-69页 |
| 参考文献 | 第69-74页 |
| 硕士学习期间文章发表情况 | 第74页 |
