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蓝细菌光敏色素的光化学性质与Slr0351功能的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-13页
缩略词表第13-14页
1 序言第14-28页
   ·光合作用与捕光结构第14-15页
   ·细菌光敏色素的发现第15-16页
   ·细菌光敏色素结构及功能第16-18页
   ·蓝细菌光敏色素的生物合成第18-21页
     ·藻胆色素的生物合成第18-20页
     ·蓝细菌光敏色素的生物合成第20页
     ·蓝细菌光敏色素辅基蛋白与生色团的共价结合位点第20-21页
   ·光敏色素的分类第21-22页
   ·光敏色素的可逆光致变色效应机理第22-24页
   ·光敏色素的研究热点第24-27页
     ·感光受体第24-25页
     ·光敏色素类荧光蛋白第25-26页
     ·能量传递第26页
     ·可逆光电生物材料第26-27页
   ·课题的研究目的与意义第27-28页
2 Nostoc sp. PCC 7120中DXCF CBCRs光化学性质的研究第28-67页
   ·序言第28-29页
   ·材料与仪器第29-32页
     ·质粒与菌种第29页
     ·培养基及试剂第29-31页
     ·主要仪器第31-32页
   ·实验方法第32-39页
     ·质粒的构建第32-34页
     ·重组与色素蛋白共表达第34页
     ·镍离子亲和层析纯化蛋白第34-35页
     ·SDS-PAGE及染色第35-36页
     ·色素蛋白可逆光效应的检测第36页
     ·色素蛋白的光谱测定第36页
     ·色素蛋白的变性及摩尔消光系数的计算第36-37页
     ·Cys突变体的构建第37-39页
   ·结果与分析第39-65页
     ·Nostoc sp. PCC 7120中GAF结构域的聚类分析第39-41页
     ·DXCF CBCRs结构域组成分析第41-42页
     ·gafs克隆载体和表达载体的构建第42页
     ·色素蛋白的表达第42-45页
     ·SDS-PAGE鉴定DXCF CBCRs的表达第45页
     ·DXCF CBCRs的吸收光谱性质第45-54页
     ·保守性Cys在DXCF CBCRs中的功能第54-61页
     ·DXCF CBCRs的荧光光谱性质第61-62页
     ·Cx突变体的荧光光谱性质第62-65页
   ·小结与讨论第65-67页
3 荧光蛋白及其体外分子进化的研究第67-77页
   ·序言第67-69页
   ·材料与仪器第69页
     ·菌株和质粒第69页
     ·培养基及试剂第69页
     ·实验仪器第69页
   ·实验方法第69-72页
     ·重组与色素蛋白的表达第69页
     ·亲和层析纯化蛋白第69页
     ·SDS-PAGE及染色第69页
     ·光谱分析第69-70页
     ·荧光显微镜检测细胞荧光第70页
     ·All1280 GAF2的定点突变第70-72页
   ·结果与分析第72-76页
     ·荧光显微镜检测色素细胞的荧光第72-73页
     ·All1280 GAF2突变体的研究第73-76页
   ·小结与讨论第76-77页
4 蓝细菌光敏色素All4261光化学性质的研究第77-92页
   ·序言第77-78页
   ·材料与仪器第78页
     ·菌株和质粒第78页
     ·培养基及试剂第78页
     ·实验仪器第78页
   ·实验方法第78-82页
     ·all4261全基因克隆引物的设计第78页
     ·all4261克隆载体和表达载体的构建第78-79页
     ·All4261与PCB的重组及共表达第79页
     ·All4261蛋白的鉴定第79页
     ·All4261表达条件及促溶条件的研究第79页
     ·all4261 gafs克隆载体和表达载体的构建第79-80页
     ·pET-all4261 gafs与PCB的重组、表达及蛋白的纯化第80-81页
     ·All4261 GAFs SDS-PAGE及染色第81页
     ·All4261 GAF2突变体的构建第81页
     ·All4261 GAF2聚集状态的分析第81页
     ·色素蛋白的光谱性质分析第81-82页
   ·结果与分析第82-90页
     ·All4261的研究结果第82-84页
     ·All4261中GAF结构域的研究结果第84-90页
   ·小结与讨论第90-92页
5 Synechocystis sp.PCC 6803中Slr0351功能的研究第92-104页
   ·序言第92-93页
   ·材料与仪器第93-94页
     ·主要材料第93页
     ·培养基及试剂第93-94页
     ·主要仪器第94页
   ·实验方法第94-97页
     ·Synechocystis sp. PCC 6803基因组DNA的提取第94页
     ·pBlu-T_上-kana-T_下质粒的构建第94-95页
     ·⊿slr0351突变藻的筛选第95页
     ·藻细胞在不同胁迫条件下的培养第95-96页
     ·藻细胞生长曲线的测定第96页
     ·Slr0351信号肽和跨膜结构的分析第96页
     ·截短slr0351克隆载体和表达载体的构建第96-97页
     ·截短Slr0351的表达第97页
   ·结果与分析第97-102页
     ·⊿slr0351突变藻的构建第97-98页
     ·不同培养条件下⊿slr0351与WT生长曲线的比较第98-100页
     ·Slr0351信号肽的分析第100-101页
     ·截短slr0351克隆载体和表达载体的检测第101页
     ·截短Slr0351蛋白的鉴定第101-102页
   ·小结与讨论第102-104页
参考文献第104-114页
附录1 攻读博士学位期间发表的学术论文第114-115页
附录2 附图第115-117页
致谢第117页

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