| 目录 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 第一章 脑心肌炎研究进展 | 第13-29页 |
| 1 病原学 | 第13-15页 |
| 2 流行病学 | 第15-16页 |
| 3 致病机理 | 第16-18页 |
| 4 诊断技术 | 第18-19页 |
| ·病毒分离 | 第18页 |
| ·血清学检测技术 | 第18-19页 |
| ·病原学检测技术 | 第19页 |
| 5 疫苗 | 第19-21页 |
| ·灭活疫苗 | 第20页 |
| ·弱毒疫苗 | 第20页 |
| ·单位疫苗 | 第20-21页 |
| ·核酸疫苗 | 第21页 |
| 6 防治 | 第21-22页 |
| 参考文献 | 第22-29页 |
| 第二章 脑心肌炎病毒VP1基因原核表达与蛋白纯化 | 第29-45页 |
| 摘要 | 第29页 |
| 1 材料 | 第29-30页 |
| ·病毒、细菌及载体质粒 | 第29页 |
| ·主要试剂 | 第29-30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| 2 方法 | 第30-34页 |
| ·EMCV VP1基因引物设计与合成 | 第30页 |
| ·病毒基因组的提取 | 第30-31页 |
| ·RT-PCR | 第31页 |
| ·原核表达载体的构建与鉴定 | 第31-32页 |
| ·重组质粒pET-32a-VP1在大肠杆菌中的诱导表达与鉴定 | 第32页 |
| ·重组蛋白诱导表达条件的优化 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的大量表达及纯化 | 第33-34页 |
| ·重组质粒稳定性测定 | 第34页 |
| 3 结果 | 第34-39页 |
| ·pET-32a-VP1原核表达载体的构建与鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白表达鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白诱导表达条件优化 | 第36-38页 |
| ·重组EMCV-VP1蛋白大量表达及纯化 | 第38-39页 |
| ·重组质粒稳定性研究 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-41页 |
| 参考文献 | 第41-43页 |
| ABSTTRACT | 第43-45页 |
| 第三章 脑心肌炎病毒结构蛋白VP1间接ELISA抗体检测方法的建立与应用 | 第45-59页 |
| 摘要 | 第45页 |
| 1 材料 | 第45-46页 |
| ·材料与试剂 | 第45-46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| 2 方法 | 第46-48页 |
| ·间接ELISA反应条件优化 | 第46-47页 |
| ·特异性试验 | 第47页 |
| ·重复性试验 | 第47-48页 |
| ·相对敏感性测定 | 第48页 |
| ·清样品检测 | 第48页 |
| 3 结果 | 第48-53页 |
| ·ELISA方法的标准化 | 第48-51页 |
| ·临界值的确定 | 第51页 |
| ·特异性试验 | 第51-52页 |
| ·重复性试验 | 第52页 |
| ·相对敏感性测定 | 第52-53页 |
| ·血清样品检测 | 第53页 |
| 4 讨论 | 第53-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| ABSTRACT | 第57-59页 |
| 第四章 脑心肌炎病毒间接ELISA抗体检测方法关键试剂保存方法及其稳定性的研究 | 第59-73页 |
| 摘要 | 第59页 |
| 1 材料 | 第59-60页 |
| ·主要试剂 | 第59页 |
| ·主要仪器 | 第59-60页 |
| 2 方法 | 第60-62页 |
| ·包被抗原保护剂的筛选和保存期测定 | 第60页 |
| ·清保护剂的筛选和保存期测定 | 第60-61页 |
| ·洗涤液保护剂的筛选和保存期测定 | 第61页 |
| ·酶标SPA稳定性的评价 | 第61-62页 |
| ·TMB显色液的稳定性评价 | 第62页 |
| 3 结果 | 第62-68页 |
| ·包被抗原保护剂的筛选及酶标板保存期测定 | 第62页 |
| ·清保护剂的筛选及其保存期测定 | 第62-65页 |
| ·洗涤液保护剂的筛选及其保存期测定 | 第65-66页 |
| ·酶标SPA稳定性测定 | 第66-67页 |
| ·TMB显色液的稳定性测定 | 第67-68页 |
| 4 讨论 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-71页 |
| ABSTRACT | 第71-73页 |
| 第五章 脑心肌炎病毒灭活疫苗制备与免疫效力研究 | 第73-93页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 1 材料 | 第73-74页 |
| ·病毒和细胞 | 第73-74页 |
| ·实验动物 | 第74页 |
| ·主要试剂 | 第74页 |
| ·主要仪器设备 | 第74页 |
| 2 方法 | 第74-79页 |
| ·病毒增殖 | 第74页 |
| ·病毒TCID_(50)测定 | 第74-75页 |
| ·EMCV NJ08毒株对Balb/c小LD50测定 | 第75页 |
| ·灭活条件筛选 | 第75-76页 |
| ·不同佐剂灭活疫苗的配制 | 第76页 |
| ·小鼠免疫保护试验 | 第76-79页 |
| ·仔猪免疫试验 | 第79页 |
| ·数据统计分析 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-88页 |
| ·病毒增殖与病毒滴度测定 | 第79-80页 |
| ·病毒灭活方法的筛选 | 第80-81页 |
| ·疫苗物理性状 | 第81-82页 |
| ·疫苗小鼠免疫效果 | 第82-87页 |
| ·仔猪免疫试验 | 第87-88页 |
| 4 讨论 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-91页 |
| ABSTRACT | 第91-93页 |
| 全文总结 | 第93-95页 |
| 致谢 | 第95页 |
