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截短型4EBP2基因治疗诱导乳腺癌消退的实验研究

中文摘要第1-5页
Abstract第5-11页
第一章 引言第11-23页
   ·eIF4F复合物及其功能第11页
   ·eIF4F复合物调控肿瘤细胞恶性生物学行为的分子机制第11-13页
   ·eIF4F复合物活性的调控第13-14页
   ·eIF4F复合物与肿瘤第14-17页
     ·乳腺癌第14-15页
     ·恶性胶质瘤第15-16页
     ·非小细胞肺癌第16-17页
   ·以eIF4F复合物为靶标的肿瘤治疗策略第17-21页
     ·阻断eIF4F-帽式结构的相互作用第17页
     ·基于翻译控制的肿瘤基因治疗第17页
     ·阻断eIF4F复合物装配第17-21页
   ·实验设计和实验目的第21-23页
第二章 实验内容第23-54页
 实验一 截短型4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学行为影响的探讨第23-50页
   ·材料第23-25页
     ·实验材料第23页
     ·实验试剂第23-24页
     ·实验器材第24-25页
   ·实验方法第25-39页
     ·pSecX-4EBP2真核表达载体的大量制备第25-30页
       ·相关试剂的配制第25-28页
       ·SiO_2吸附法大提质粒的方法步骤第28-30页
     ·试剂盒小提质粒的方法第30页
     ·质粒的酶切第30页
     ·酶切质粒的电泳检测第30-31页
       ·相关试剂的配制第30-31页
       ·实验内容第31页
     ·细胞的复苏、冻存及培养第31-33页
       ·相关试剂的配制第31-32页
       ·4T1细胞的复苏第32页
       ·4T1细胞的培养传代第32页
       ·4T1细胞的冻存第32-33页
       ·细胞计数板的使用第33页
     ·pSecX空载体以及pSecX-4EBP2真核表达载体的细胞转染第33-34页
     ·WST-8法检测细胞存活率第34页
     ·Wound healing法检测细胞迁移率第34-35页
     ·流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡第35页
       ·细胞周期的检测第35页
       ·细胞凋亡的检测第35页
     ·蛋白质印迹(western blot)法检测相关蛋白的表达量变化第35-39页
       ·相关试剂的配制第35-37页
       ·相关样品的制备第37页
       ·Western blot检测相关蛋白表达量变化第37-39页
   ·实验结果及分析讨论第39-49页
     ·小提质粒的酶切电泳检测以及二氧化硅吸附法大提质粒的电泳检测第39-40页
     ·pSecX空载体及pSecX-4EBP2真核表达载体转染细胞的效率第40-41页
     ·WST-8法检测4EBP2对4T1细胞增殖影响的结果第41页
     ·Wound healing法检测细胞迁移率的实验结果第41-43页
     ·流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡的实验结果第43-48页
     ·蛋白质印迹(western blot)法检测相关蛋白表达量变化的实验结果第48-49页
   ·小结第49-50页
 实验二 在体转染pSecX-4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌模型治疗作用的研究第50-54页
   ·材料第50页
     ·实验材料第50页
     ·实验试剂和器材第50页
   ·实验方法第50-52页
     ·小鼠乳腺癌模型的构建第50-51页
     ·在体转染pSecX-4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌的治疗第51-52页
   ·实验结果与讨论第52-53页
   ·小结第53-54页
第三章 结论第54-55页
参考文献第55-67页
附录 中英文对照表第67-68页
科研成果第68-69页
致谢第69页

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