中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-11页 |
第一章 引言 | 第11-23页 |
·eIF4F复合物及其功能 | 第11页 |
·eIF4F复合物调控肿瘤细胞恶性生物学行为的分子机制 | 第11-13页 |
·eIF4F复合物活性的调控 | 第13-14页 |
·eIF4F复合物与肿瘤 | 第14-17页 |
·乳腺癌 | 第14-15页 |
·恶性胶质瘤 | 第15-16页 |
·非小细胞肺癌 | 第16-17页 |
·以eIF4F复合物为靶标的肿瘤治疗策略 | 第17-21页 |
·阻断eIF4F-帽式结构的相互作用 | 第17页 |
·基于翻译控制的肿瘤基因治疗 | 第17页 |
·阻断eIF4F复合物装配 | 第17-21页 |
·实验设计和实验目的 | 第21-23页 |
第二章 实验内容 | 第23-54页 |
实验一 截短型4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌细胞4T1生物学行为影响的探讨 | 第23-50页 |
·材料 | 第23-25页 |
·实验材料 | 第23页 |
·实验试剂 | 第23-24页 |
·实验器材 | 第24-25页 |
·实验方法 | 第25-39页 |
·pSecX-4EBP2真核表达载体的大量制备 | 第25-30页 |
·相关试剂的配制 | 第25-28页 |
·SiO_2吸附法大提质粒的方法步骤 | 第28-30页 |
·试剂盒小提质粒的方法 | 第30页 |
·质粒的酶切 | 第30页 |
·酶切质粒的电泳检测 | 第30-31页 |
·相关试剂的配制 | 第30-31页 |
·实验内容 | 第31页 |
·细胞的复苏、冻存及培养 | 第31-33页 |
·相关试剂的配制 | 第31-32页 |
·4T1细胞的复苏 | 第32页 |
·4T1细胞的培养传代 | 第32页 |
·4T1细胞的冻存 | 第32-33页 |
·细胞计数板的使用 | 第33页 |
·pSecX空载体以及pSecX-4EBP2真核表达载体的细胞转染 | 第33-34页 |
·WST-8法检测细胞存活率 | 第34页 |
·Wound healing法检测细胞迁移率 | 第34-35页 |
·流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡 | 第35页 |
·细胞周期的检测 | 第35页 |
·细胞凋亡的检测 | 第35页 |
·蛋白质印迹(western blot)法检测相关蛋白的表达量变化 | 第35-39页 |
·相关试剂的配制 | 第35-37页 |
·相关样品的制备 | 第37页 |
·Western blot检测相关蛋白表达量变化 | 第37-39页 |
·实验结果及分析讨论 | 第39-49页 |
·小提质粒的酶切电泳检测以及二氧化硅吸附法大提质粒的电泳检测 | 第39-40页 |
·pSecX空载体及pSecX-4EBP2真核表达载体转染细胞的效率 | 第40-41页 |
·WST-8法检测4EBP2对4T1细胞增殖影响的结果 | 第41页 |
·Wound healing法检测细胞迁移率的实验结果 | 第41-43页 |
·流式细胞仪检测细胞的周期和凋亡的实验结果 | 第43-48页 |
·蛋白质印迹(western blot)法检测相关蛋白表达量变化的实验结果 | 第48-49页 |
·小结 | 第49-50页 |
实验二 在体转染pSecX-4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌模型治疗作用的研究 | 第50-54页 |
·材料 | 第50页 |
·实验材料 | 第50页 |
·实验试剂和器材 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-52页 |
·小鼠乳腺癌模型的构建 | 第50-51页 |
·在体转染pSecX-4EBP2真核表达载体对小鼠乳腺癌的治疗 | 第51-52页 |
·实验结果与讨论 | 第52-53页 |
·小结 | 第53-54页 |
第三章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-67页 |
附录 中英文对照表 | 第67-68页 |
科研成果 | 第68-69页 |
致谢 | 第69页 |