| 学位论文数据集 | 第1-4页 |
| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-17页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-27页 |
| ·β-内酰胺抗生素 | 第17页 |
| ·半合成类抗生素 | 第17-18页 |
| ·阿莫西林 | 第18-21页 |
| ·阿莫西林概述 | 第18页 |
| ·阿莫西林的合成 | 第18-21页 |
| ·化学合成 | 第18-19页 |
| ·酶法合成 | 第19-21页 |
| ·青霉素酰化酶 | 第21-25页 |
| ·概述 | 第21页 |
| ·青霉素酰化酶的种类及来源 | 第21-22页 |
| ·PGA 的分子结构 | 第22-23页 |
| ·PGA 的表达研究 | 第23-25页 |
| ·外源蛋白在大肠杆菌中的表达 | 第25页 |
| ·诱导型表达系统 | 第25页 |
| ·组成型表达系统 | 第25页 |
| ·论文的研究目的与意义 | 第25-26页 |
| ·论文的研究内容 | 第26-27页 |
| 第二章 材料、试剂与方法 | 第27-35页 |
| ·引论 | 第27页 |
| ·材料与试剂 | 第27-29页 |
| ·质粒和菌株 | 第27-28页 |
| ·诱导剂与抗生素 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28-29页 |
| ·工具酶、试剂盒、常用试剂与仪器 | 第29页 |
| ·试验方法 | 第29-33页 |
| ·分子生物学及生物化学方法 | 第29页 |
| ·菌种活化、保存与诱导表达 | 第29页 |
| ·酶活测定方法 | 第29-33页 |
| ·比色分析法[48-49] | 第30-32页 |
| ·高效毛细管电泳分析法 | 第32-33页 |
| ·专业分析软件 | 第33-35页 |
| 第三章 青霉素酰化酶的诱导型表达 | 第35-47页 |
| ·本章引论 | 第35页 |
| ·实验材料与试剂 | 第35-36页 |
| ·工具酶 | 第35页 |
| ·培养基 | 第35页 |
| ·菌株与质粒 | 第35-36页 |
| ·PGA 基因的优化 | 第36页 |
| ·pET01-PGA 的构建与表达 | 第36-40页 |
| ·PGA 基因的大量获得 | 第36-37页 |
| ·连接与转化 | 第37-38页 |
| ·重组子的筛选 | 第38-39页 |
| ·重组质粒 pET01-PGA 的诱导表达 | 第39-40页 |
| ·pET28a-PGA 的构建与表达 | 第40-46页 |
| ·pET28a-PGA 的构建思路 | 第40-41页 |
| ·PGA 基因的获得 | 第41-42页 |
| ·pET28a 与 PGA 基因的连接 | 第42-43页 |
| ·重组子的筛选 | 第43-45页 |
| ·pET28a-PGA 的表达 | 第45-46页 |
| ·本章小结 | 第46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| 第四章 重组青霉素酰化酶的组成型表达 | 第47-62页 |
| ·本章引言 | 第47页 |
| ·实验材料与试剂 | 第47页 |
| ·工具酶 | 第47页 |
| ·培养基 | 第47页 |
| ·菌株与质粒 | 第47页 |
| ·pUCK-lac-PGA 的构建及表达 | 第47-53页 |
| ·pUCK-lac-PGA 构建思路 | 第48-49页 |
| ·重组质粒 pUCK-lac-PGA 的构建过程及结果 | 第49-52页 |
| ·PCR 扩增带有 SD 序列的 PGA 基因 | 第49-51页 |
| ·重组质粒 pUCK-lac-PGA 的构建 | 第51-52页 |
| ·高表达活性重组菌的筛选 | 第52-53页 |
| ·pUCK-HP-PGA 的构建及表达 | 第53-59页 |
| ·pUCK-HP-PGA 的构建思路 | 第53-54页 |
| ·组成型表达载体 pUCK-HP 的构建 | 第54-56页 |
| ·pUCK-HP-PGA 的构建 | 第56-58页 |
| ·pUCK-HP-PGA 在不同宿主菌中的表达影响 | 第58-59页 |
| ·培养条件对重组菌表达的影响 | 第59-61页 |
| ·培养温度的影响 | 第59页 |
| ·培养基初始 pH 的影响 | 第59-60页 |
| ·装液量的影响 | 第60-61页 |
| ·本章小结 | 第61页 |
| ·讨论 | 第61-62页 |
| 第五章 结论与建议 | 第62-64页 |
| ·结论 | 第62-63页 |
| ·建议 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-68页 |
| 附录 | 第68-75页 |
| 附录1 实验仪器 | 第68-69页 |
| 附录2 化学试剂药品 | 第69-70页 |
| 附录3 DNA 凝胶电泳 | 第70-71页 |
| 附录4 菌落 PCR | 第71-72页 |
| 附录5 SDS-PAGE 凝胶电泳 | 第72-74页 |
| 附录6 超级感受态细胞的制备及转化 | 第74-75页 |
| 致谢 | 第75-76页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第76-77页 |
| 作者和导师简介 | 第77-78页 |
| 硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第78-79页 |