| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 概述 | 第8-16页 |
| ·大肠杆菌表达系统的介绍 | 第8-9页 |
| ·大肠杆菌胞外生产外源蛋白的重要性 | 第9页 |
| ·大肠杆菌胞外生产外源蛋白的方法 | 第9-10页 |
| ·渗漏纯化蛋白发酵的集成化技术概述 | 第10-11页 |
| ·大肠杆菌的重组蛋白渗漏菌株 | 第11-12页 |
| ·本研究中需失活的青霉素结合蛋白(PBPs) | 第12-13页 |
| ·PBPs的分类 | 第12-13页 |
| ·大肠杆菌PBPs的种类与功能 | 第13页 |
| ·大肠杆菌的基因敲除方法：Red重组系统 | 第13-14页 |
| ·Red重组系统的组成 | 第14页 |
| ·Red重组酶介导的同源重组机理 | 第14页 |
| ·本研究的目的和内容简介 | 第14-16页 |
| 第二章 大肠杆菌渗漏菌株的构建 | 第16-37页 |
| ·前言 | 第16页 |
| ·材料与方法 | 第16-28页 |
| ·菌种,质粒和引物 | 第16-19页 |
| ·主要试剂 | 第19-20页 |
| ·主要仪器 | 第20-21页 |
| ·培养基 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-28页 |
| ·结果与分析 | 第28-35页 |
| ·打靶片段(TFs)的PCR合成 | 第28-29页 |
| ·单基因突变株的筛选和鉴定 | 第29-33页 |
| ·双基因突变株的筛选和鉴定 | 第33-34页 |
| ·突变株的显微形态观察 | 第34-35页 |
| ·结论 | 第35-37页 |
| 第三章 重组大肠杆菌突变株的发酵 | 第37-59页 |
| ·前言 | 第37页 |
| ·材料与方法 | 第37-44页 |
| ·菌种 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·主要仪器 | 第37-38页 |
| ·培养基 | 第38-39页 |
| ·溶液配制 | 第39-41页 |
| ·方法 | 第41-44页 |
| ·结果与分析 | 第44-58页 |
| ·单基因突变株的Trx-hPTH蛋白渗漏表达及生长特点 | 第44-49页 |
| ·双基因突变株的Trx-hPTH蛋白渗漏表达和生长特点 | 第49-54页 |
| ·单基因和双基因突变株的Trx-sBLyS和rPA蛋白渗漏表达 | 第54-56页 |
| ·发酵罐中渗漏菌株的Trx-hPTH蛋白渗漏表达 | 第56-58页 |
| ·结论 | 第58-59页 |
| 第四章 结论与展望 | 第59-61页 |
| ·结论 | 第59页 |
| ·展望 | 第59-61页 |
| 参考文献 | 第61-65页 |
| 附表 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表的专利和论文 | 第68页 |
