缩略词表 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-11页 |
ABSTRACT | 第11-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第一章 研究背景与研究现状 | 第16-28页 |
1 猪链球菌及其毒力因子 SLY 蛋白研究现状 | 第16-21页 |
·猪链球菌研究现状 | 第16-17页 |
·SLY 研究现状 | 第17-21页 |
2.机体的固有免疫与炎症反应 | 第21-28页 |
·固有免疫中重要模式识别受体 | 第22-23页 |
·Toll 样受体家族(Toll like receptors,TLRs) | 第23-25页 |
·MAPK 信号通路 | 第25-26页 |
·NF‐κB 等转录因子 | 第26-27页 |
·炎症反应 | 第27-28页 |
第二章 实验材料与实验方法 | 第28-36页 |
1 实验材料 | 第28-31页 |
·菌株 | 第28页 |
·蛋白表达与纯化所用材料 | 第28-29页 |
·真核细胞及细胞培养相关试 | 第29页 |
·ELISA 实验相关试剂 | 第29页 |
·WESTERN BLOT 实验相关试剂 | 第29-30页 |
·荧光素报告基因实验相关材料 | 第30页 |
·实验动物 | 第30页 |
·主要化学试剂与耗材 | 第30-31页 |
·主要仪器 | 第31页 |
2 实验方法 | 第31-36页 |
·天然蛋白的提取纯化与重组蛋白的诱导表达与纯化 | 第31-32页 |
·:SLY 蛋白溶血活性测定 | 第32-33页 |
·:SLY 蛋白内毒素的去除与测定 | 第33页 |
·:细胞培养和转染 | 第33-34页 |
·:人外周血单个核细胞(PBMC)分离方法 | 第34页 |
·:小鼠腹腔巨噬细胞分离方法 | 第34页 |
·:ELISA 检测 | 第34页 |
·:WESERN BLOT 检测 | 第34-35页 |
·:荧光素报告基因检测 | 第35页 |
·:小鼠模型和处理 | 第35页 |
·:质粒的提取 | 第35页 |
·:免疫共沉淀 | 第35页 |
·:统计学分析 | 第35-36页 |
第三章 实验结果 | 第36-66页 |
1 SLY 是猪链球菌中引起宿主细胞炎症反应的主要毒力因子 | 第36页 |
2 SLY 蛋白的纯化与评价 | 第36-40页 |
3 nSLY 可以激活多种免疫细胞产生炎症因子 | 第40-42页 |
4 nSLY 激活免疫细胞释放 TNF‐Α具有量效性和时效性 | 第42-43页 |
5 nSLY 诱导细胞产生 TNF‐Α不依赖其溶血活性 | 第43-45页 |
6 nSLY 诱导细胞产生 TNF‐Α通过 TLR4 | 第45-47页 |
7 MYD88 是 SLY‐TLR4 信号通路的重要接头蛋白 | 第47-48页 |
8 SLY 可以直接激活人 PBMC 胞内的 P38‐MAPK | 第48-50页 |
9 SLY 可以直接激活 RAW264.7 胞内的转录因子 NF‐ΚB | 第50-51页 |
10 MD2、CD14 和 LBP 分子可能与 SLY 相互作用从而诱导细胞产生 TNF‐Α | 第51-53页 |
11 肝素结合蛋白(HBP)不能协调促进 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α | 第53页 |
12 SLY 抗血清不能封闭 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α | 第53-54页 |
13 TLR2 和 TLR4 单克隆抗体对 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α的影响 | 第54-55页 |
14 NSLY 对内皮细胞的激活情况 | 第55-56页 |
15 NSLY 对原代小鼠腹腔巨噬细胞激活释放 TNF‐Α情况 | 第56-57页 |
16 NSLY 诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞释放 IL‐6 情况 | 第57-58页 |
17 体内攻毒实验 | 第58-60页 |
18 体内攻毒后组织切片结果 | 第60-64页 |
19 猪链球菌 15 种重组蛋白诱导细胞产生炎症因子情况 | 第64-66页 |
讨论 | 第66-68页 |
结论 | 第68-69页 |
参考文献 | 第69-74页 |
撰稿文章 | 第74-92页 |
个人简历 | 第92-93页 |
致谢 | 第93页 |