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猪溶素诱导宿主产生炎症因子的分子机制研究

缩略词表第1-8页
摘要第8-11页
ABSTRACT第11-14页
前言第14-16页
第一章 研究背景与研究现状第16-28页
 1 猪链球菌及其毒力因子 SLY 蛋白研究现状第16-21页
   ·猪链球菌研究现状第16-17页
   ·SLY 研究现状第17-21页
 2.机体的固有免疫与炎症反应第21-28页
   ·固有免疫中重要模式识别受体第22-23页
   ·Toll 样受体家族(Toll like receptors,TLRs)第23-25页
   ·MAPK 信号通路第25-26页
   ·NF‐κB 等转录因子第26-27页
   ·炎症反应第27-28页
第二章 实验材料与实验方法第28-36页
 1 实验材料第28-31页
   ·菌株第28页
   ·蛋白表达与纯化所用材料第28-29页
   ·真核细胞及细胞培养相关试第29页
   ·ELISA 实验相关试剂第29页
   ·WESTERN BLOT 实验相关试剂第29-30页
   ·荧光素报告基因实验相关材料第30页
   ·实验动物第30页
   ·主要化学试剂与耗材第30-31页
   ·主要仪器第31页
 2 实验方法第31-36页
   ·天然蛋白的提取纯化与重组蛋白的诱导表达与纯化第31-32页
   ·:SLY 蛋白溶血活性测定第32-33页
   ·:SLY 蛋白内毒素的去除与测定第33页
   ·:细胞培养和转染第33-34页
   ·:人外周血单个核细胞(PBMC)分离方法第34页
   ·:小鼠腹腔巨噬细胞分离方法第34页
   ·:ELISA 检测第34页
   ·:WESERN BLOT 检测第34-35页
   ·:荧光素报告基因检测第35页
   ·:小鼠模型和处理第35页
   ·:质粒的提取第35页
   ·:免疫共沉淀第35页
   ·:统计学分析第35-36页
第三章 实验结果第36-66页
 1 SLY 是猪链球菌中引起宿主细胞炎症反应的主要毒力因子第36页
 2 SLY 蛋白的纯化与评价第36-40页
 3 nSLY 可以激活多种免疫细胞产生炎症因子第40-42页
 4 nSLY 激活免疫细胞释放 TNF‐Α具有量效性和时效性第42-43页
 5 nSLY 诱导细胞产生 TNF‐Α不依赖其溶血活性第43-45页
 6 nSLY 诱导细胞产生 TNF‐Α通过 TLR4第45-47页
 7 MYD88 是 SLY‐TLR4 信号通路的重要接头蛋白第47-48页
 8 SLY 可以直接激活人 PBMC 胞内的 P38‐MAPK第48-50页
 9 SLY 可以直接激活 RAW264.7 胞内的转录因子 NF‐ΚB第50-51页
 10 MD2、CD14 和 LBP 分子可能与 SLY 相互作用从而诱导细胞产生 TNF‐Α第51-53页
 11 肝素结合蛋白(HBP)不能协调促进 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α第53页
 12 SLY 抗血清不能封闭 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α第53-54页
 13 TLR2 和 TLR4 单克隆抗体对 SLY 诱导细胞产生 TNF‐Α的影响第54-55页
 14 NSLY 对内皮细胞的激活情况第55-56页
 15 NSLY 对原代小鼠腹腔巨噬细胞激活释放 TNF‐Α情况第56-57页
 16 NSLY 诱导小鼠原代腹腔巨噬细胞释放 IL‐6 情况第57-58页
 17 体内攻毒实验第58-60页
 18 体内攻毒后组织切片结果第60-64页
 19 猪链球菌 15 种重组蛋白诱导细胞产生炎症因子情况第64-66页
讨论第66-68页
结论第68-69页
参考文献第69-74页
撰稿文章第74-92页
个人简历第92-93页
致谢第93页

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