| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 1 前言 | 第11-21页 |
| ·布鲁氏菌简介 | 第11页 |
| ·布鲁氏菌病流行病学 | 第11-12页 |
| ·布鲁氏菌病原学 | 第12页 |
| ·布鲁氏菌病临床症状 | 第12-13页 |
| ·布鲁氏菌病诊断方法 | 第13-15页 |
| ·细菌学鉴定 | 第13页 |
| ·核酸鉴定 | 第13页 |
| ·凝集试验 | 第13-14页 |
| ·ELISA | 第14页 |
| ·FPA | 第14-15页 |
| ·免疫胶体金技术 | 第15页 |
| ·布鲁氏菌病疫苗研究 | 第15-18页 |
| ·Rev.1 | 第15-16页 |
| ·S2 | 第16页 |
| ·M5 | 第16页 |
| ·S19 | 第16页 |
| ·灭活疫苗 | 第16-17页 |
| ·突变株疫苗 | 第17页 |
| ·DNA 疫苗 | 第17-18页 |
| ·布鲁氏菌抗原和毒力相关基因 | 第18-20页 |
| ·L7/L12 蛋白 | 第18页 |
| ·外膜蛋白 | 第18-19页 |
| ·毒力基因 | 第19-20页 |
| ·研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2 材料与方法 | 第21-31页 |
| ·材料 | 第21-22页 |
| ·菌株、质粒、重组蛋白 | 第21页 |
| ·实验动物 | 第21页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第21页 |
| ·主要试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-31页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第22-26页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第26-29页 |
| ·小鼠接种试验 | 第29页 |
| ·间接 ELISA 检测血清抗体水平 | 第29页 |
| ·小鼠脾脏淋巴细胞的制备 | 第29-30页 |
| ·酶联免疫斑点试验（ELISPOT） | 第30页 |
| ·流式细胞计数器检测 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-41页 |
| ·真核表达质粒构建结果 | 第31-34页 |
| ·SOD 基因的扩增及 pCAGG-SOD 酶切鉴定 | 第31页 |
| ·L7/L12 基因的扩增及 pCAGG-L7/L12 酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·OMP25 基因的扩增及 pCAGG-OMP25 酶切鉴定 | 第32页 |
| ·OMP31 基因的扩增及 pCAGG-OMP31 酶切鉴定 | 第32-34页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第34-37页 |
| ·目的基因的扩增与重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第35-37页 |
| ·间接 ELISA 检测血清抗体水平 | 第37页 |
| ·酶联免疫斑点实验 | 第37-38页 |
| ·流式细胞计数器检测结果 | 第38-41页 |
| ·CD8+T 结果 | 第38-39页 |
| ·CD4+T 结果 | 第39-41页 |
| 4 讨论 | 第41-44页 |
| ·DNA 疫苗的构建 | 第41页 |
| ·表达载体的选择 | 第41-42页 |
| ·间接 ELISA 结果分析 | 第42页 |
| ·ELISPOT 结果分析 | 第42-43页 |
| ·FCM 结果分析 | 第43-44页 |
| 5 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第51页 |
