中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-10页 |
序言 | 第10-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1 大型绿藻浒苔的研究进展 | 第12-15页 |
·浒苔的分类研究 | 第12-13页 |
·浒苔的生理、生态学研究 | 第13-14页 |
·浒苔生活史概览 | 第14页 |
·浒苔的开发和利用 | 第14-15页 |
·浒苔的开发利用前景 | 第15页 |
2 海洋中二甲基硫化物的产生与去除 | 第15-19页 |
·海洋中 DMSP 的产生与去除 | 第15-17页 |
·海水中 DMS 的产生与去除 | 第17-18页 |
·海水中 DMSO 的产生与去除 | 第18-19页 |
3 DMSP 在藻细胞及浮游生物食物链中的作用 | 第19-21页 |
4 DMSP 裂解酶蛋白研究进展 | 第21页 |
5 课题的提出及研究内容 | 第21-23页 |
·立题背景 | 第21页 |
·研究目的 | 第21-22页 |
·研究内容 | 第22-23页 |
第二章 浒苔 DDDL 基因的克隆 | 第23-59页 |
1. 实验材料与仪器试剂 | 第24-27页 |
·实验材料 | 第24-25页 |
·仪器试剂 | 第25-27页 |
2 实验方法 | 第27-42页 |
·浒苔基因组的提取 | 第27页 |
·浒苔总 RNA 提取和 cDNA 的合成 | 第27-30页 |
·浒苔 dddL 部分目的片段的克隆 | 第30页 |
·目的片段的回收 | 第30-32页 |
·PCR产物的克隆 | 第32-34页 |
·浒苔 dddL 5′端上游序列与 3′端下游序列的克隆 | 第34-36页 |
·RACE 扩增浒苔 dddL 全序列 | 第36-42页 |
·序列生物信息分析 | 第42页 |
3 结果与分析 | 第42-48页 |
·浒苔基因组 DNA 的提取 | 第42-43页 |
·浒苔总 RNA 的提取 | 第43页 |
·浒苔 dddL 基因部分 DNA 片段和部分 cDNA 片段的克隆 | 第43-44页 |
·浒苔 dddL DNA 序列的染色体步移 | 第44-46页 |
·浒苔 dddL cDNA 5’序列的克隆 | 第46-48页 |
4 浒苔 DDDL 基因序列的分析 | 第48-56页 |
·浒苔 dddL 基因全长 cDNA 序列拼接与序列分析 | 第48-49页 |
·浒苔 dddL 蛋白序列分析 | 第49-51页 |
·密码子偏好性分析 | 第51-52页 |
·浒苔 dddL 蛋白疏水性分析 | 第52-53页 |
·同源性分析与进化树构建 | 第53-55页 |
·蛋白质的结构预测 | 第55-56页 |
5 讨论与小结 | 第56-59页 |
第三章 浒苔 DDDL 基因在表达水平研究 | 第59-68页 |
1 材料与方法 | 第60-63页 |
·实验材料与仪器试剂 | 第60-61页 |
·浒苔 RNA 提取及质量检测 | 第61页 |
·定量 PCR 引物的设计和 cDNA 合成 | 第61页 |
·定量 PCR 检测浒苔 dddL mRNA 表达水平 | 第61-62页 |
·数据处理和分析 | 第62-63页 |
2. 结果与分析 | 第63-65页 |
·浒苔总 RNA 的提取 | 第63页 |
·第一链 cDNA 的合成及 PCR 测试结果 | 第63-64页 |
·不同盐度条件处理下浒苔 dddL mRNA 表达差异 | 第64-65页 |
3 讨论与小结 | 第65-68页 |
·mRNA 定量表达分析 | 第65-67页 |
·浒苔 dddL mRNA 表达水平 | 第67-68页 |
第四章 浒苔 DMSP 裂解酶 DDDL 基因体外表达的研究 | 第68-76页 |
1 材料和方法 | 第68-72页 |
·实验材料与仪器试剂 | 第68-69页 |
·浒苔 dddL 基因 ORF 的克隆 | 第69页 |
·dddL 表达质粒的构建和鉴定 | 第69-71页 |
·浒苔 dddL 的体外表达和电泳检测 | 第71-72页 |
2. 结果与分析 | 第72-76页 |
·PCR 扩增浒苔 dddL ORF | 第72页 |
·dddL 表达质粒的鉴定 | 第72-73页 |
·浒苔 dddL 基因体外表达 | 第73-76页 |
3 讨论与小结 | 第76页 |
参考文献 | 第76-90页 |
结论和创新点 | 第90-91页 |
攻读学位期间公开发表的论文 | 第91-92页 |
致谢 | 第92-93页 |