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浒苔DMSP裂解酶L(dddL)基因的克隆与表达分析

中文摘要第1-6页
Abstract第6-10页
序言第10-12页
第一章 文献综述第12-23页
 1 大型绿藻浒苔的研究进展第12-15页
   ·浒苔的分类研究第12-13页
   ·浒苔的生理、生态学研究第13-14页
   ·浒苔生活史概览第14页
   ·浒苔的开发和利用第14-15页
   ·浒苔的开发利用前景第15页
 2 海洋中二甲基硫化物的产生与去除第15-19页
   ·海洋中 DMSP 的产生与去除第15-17页
   ·海水中 DMS 的产生与去除第17-18页
   ·海水中 DMSO 的产生与去除第18-19页
 3 DMSP 在藻细胞及浮游生物食物链中的作用第19-21页
 4 DMSP 裂解酶蛋白研究进展第21页
 5 课题的提出及研究内容第21-23页
   ·立题背景第21页
   ·研究目的第21-22页
   ·研究内容第22-23页
第二章 浒苔 DDDL 基因的克隆第23-59页
 1. 实验材料与仪器试剂第24-27页
   ·实验材料第24-25页
   ·仪器试剂第25-27页
 2 实验方法第27-42页
   ·浒苔基因组的提取第27页
   ·浒苔总 RNA 提取和 cDNA 的合成第27-30页
   ·浒苔 dddL 部分目的片段的克隆第30页
   ·目的片段的回收第30-32页
   ·PCR产物的克隆第32-34页
   ·浒苔 dddL 5′端上游序列与 3′端下游序列的克隆第34-36页
   ·RACE 扩增浒苔 dddL 全序列第36-42页
   ·序列生物信息分析第42页
 3 结果与分析第42-48页
   ·浒苔基因组 DNA 的提取第42-43页
   ·浒苔总 RNA 的提取第43页
   ·浒苔 dddL 基因部分 DNA 片段和部分 cDNA 片段的克隆第43-44页
   ·浒苔 dddL DNA 序列的染色体步移第44-46页
   ·浒苔 dddL cDNA 5’序列的克隆第46-48页
 4 浒苔 DDDL 基因序列的分析第48-56页
   ·浒苔 dddL 基因全长 cDNA 序列拼接与序列分析第48-49页
   ·浒苔 dddL 蛋白序列分析第49-51页
   ·密码子偏好性分析第51-52页
   ·浒苔 dddL 蛋白疏水性分析第52-53页
   ·同源性分析与进化树构建第53-55页
   ·蛋白质的结构预测第55-56页
 5 讨论与小结第56-59页
第三章 浒苔 DDDL 基因在表达水平研究第59-68页
 1 材料与方法第60-63页
   ·实验材料与仪器试剂第60-61页
   ·浒苔 RNA 提取及质量检测第61页
   ·定量 PCR 引物的设计和 cDNA 合成第61页
   ·定量 PCR 检测浒苔 dddL mRNA 表达水平第61-62页
   ·数据处理和分析第62-63页
 2. 结果与分析第63-65页
   ·浒苔总 RNA 的提取第63页
   ·第一链 cDNA 的合成及 PCR 测试结果第63-64页
   ·不同盐度条件处理下浒苔 dddL mRNA 表达差异第64-65页
 3 讨论与小结第65-68页
   ·mRNA 定量表达分析第65-67页
   ·浒苔 dddL mRNA 表达水平第67-68页
第四章 浒苔 DMSP 裂解酶 DDDL 基因体外表达的研究第68-76页
 1 材料和方法第68-72页
   ·实验材料与仪器试剂第68-69页
   ·浒苔 dddL 基因 ORF 的克隆第69页
   ·dddL 表达质粒的构建和鉴定第69-71页
   ·浒苔 dddL 的体外表达和电泳检测第71-72页
 2. 结果与分析第72-76页
   ·PCR 扩增浒苔 dddL ORF第72页
   ·dddL 表达质粒的鉴定第72-73页
   ·浒苔 dddL 基因体外表达第73-76页
 3 讨论与小结第76页
参考文献第76-90页
结论和创新点第90-91页
攻读学位期间公开发表的论文第91-92页
致谢第92-93页

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