| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-22页 |
| 1 小菜蛾概括 | 第9-10页 |
| ·分布及危害 | 第9页 |
| ·小菜蛾的抗药性研究进展 | 第9-10页 |
| 2 Bt毒素的研究进展 | 第10-18页 |
| ·Bt毒素 | 第10-11页 |
| ·Bt毒素的作用机理 | 第11-12页 |
| ·昆虫对Bt的抗性现状 | 第12页 |
| ·Bt毒素受体的研究进展 | 第12-18页 |
| ·钙粘蛋白(Cadherin) | 第13-14页 |
| ·氨肽酶(Aminopeptidase N,APN) | 第14-16页 |
| ·碱性磷酸酶(Alkaline phosphatase,ALP) | 第16页 |
| ·糖脂类(Glycolipid) | 第16页 |
| ·ABC转运蛋白(ABC transporter) | 第16-18页 |
| 3 二代测序技术简介 | 第18-21页 |
| ·RNA-seq技术简介 | 第18-20页 |
| ·RNA-seq的应用 | 第20-21页 |
| ·基因表达水平研究 | 第20-21页 |
| ·RNA-seq在昆虫基因功能研究中的应用 | 第21页 |
| 4 本研究的总体思路和主要内容 | 第21-22页 |
| 第二章 小菜蛾抗Cry1Ac近等基因系的构建与评估 | 第22-30页 |
| 1 材料和方法 | 第23-26页 |
| ·实验种群 | 第23页 |
| ·汰选药剂 | 第23页 |
| ·生物测定 | 第23-24页 |
| ·小菜蛾的饲养与抗性汰选 | 第24页 |
| ·小菜蛾抗Cry1Ac近等基因系的建立 | 第24-25页 |
| ·ISSR分析 | 第25-26页 |
| ·DNA提取 | 第25页 |
| ·引物的筛选 | 第25-26页 |
| ·ISSR-PCR扩增 | 第26页 |
| ·数据分析 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-28页 |
| ·小菜蛾Cry1Ac抗性、敏感和混合种群生测结果 | 第26-27页 |
| ·ISSR扩增结果 | 第27-28页 |
| ·小菜蛾亲本种群和近等基因品系聚类分析 | 第28页 |
| 3 讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 小菜蛾抗性和敏感种群幼虫中肠转录组测序 | 第30-52页 |
| 1 材料和方法 | 第31-33页 |
| ·供试虫源和寄主植物 | 第31-32页 |
| ·RNA的抽提,cDNA库的构建以及solexa测序 | 第32页 |
| ·原始数据处理 | 第32页 |
| ·功能注释 | 第32页 |
| ·Gene ontology(GO)分析 | 第32-33页 |
| ·差异表达分析 | 第33页 |
| ·代谢路径分析 | 第33页 |
| 2 结果与分析 | 第33-47页 |
| ·测序饱和度分析 | 第33-35页 |
| ·GO分析 | 第35-38页 |
| ·差异表达基因的统计 | 第38-40页 |
| ·杀虫剂抗性相关DEUs鉴定 | 第40-43页 |
| ·Pathway分析 | 第43-46页 |
| ·ATP能量转运相关基因在小菜蛾抗性种群中的表达形式 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-52页 |
| ·可能的受体 | 第48-49页 |
| ·小菜蛾抗性种群的ABC transporter | 第49-50页 |
| ·适合度代价 | 第50页 |
| ·催化活性 | 第50页 |
| ·ABC transporter与其他代谢通路的关系 | 第50-52页 |
| 第四章 Cry1Ac抗性相关基因在小菜蛾体内的QPCR验证 | 第52-60页 |
| 1 材料和方法 | 第53-55页 |
| ·供试虫源 | 第53页 |
| ·RNA提取及cDNA合成 | 第53页 |
| ·实时荧光定量PCR标准曲线样品制备和检测 | 第53-54页 |
| ·Real-time qPCR结果分析 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-58页 |
| ·RNA浓度测定及质量鉴定 | 第55-56页 |
| ·不同unigene表达分析 | 第56-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 参考文献 | 第61-71页 |
| 博士后期间科研成果 | 第71-72页 |
| 作者简历 | 第72页 |
