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杨树C4H基因RNAi载体和UGPase基因过量表达载体的构建及其遗传转化研究

摘要第1-4页
Abstract第4-9页
1. 文献综述第9-19页
   ·杨树的简介和其在造纸工业上的应用第9页
   ·木质素简介第9-10页
   ·木质素生物合成研究进展第10-16页
     ·苯丙氨酸起始代谢途径第11-12页
     ·基因功能的新注释第12-13页
     ·参与还原反应的酶第13-14页
     ·新的代谢途径参与木质素的合成第14-15页
     ·木质素单体的聚合反应第15-16页
   ·纤维素生物合成研究进展第16-19页
     ·纤维素合酶的研究进展第17-18页
     ·尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸酶的研究进展第18-19页
2. 引言第19-21页
   ·本课题的研究意义第19页
   ·本研究的研究内容和目标第19-20页
     ·研究的内容第19页
     ·研究的目标第19-20页
   ·实验技术路线第20-21页
3. 材料和方法第21-35页
   ·实验材料第21-23页
     ·植物材料第21页
     ·质粒和菌株第21-22页
     ·引物序列第22-23页
   ·主要的设备和试剂第23-24页
     ·主要设备第23页
     ·主要试剂第23-24页
   ·实验的方法第24-35页
     ·实验室常用试剂和培养基的配置第24页
     ·杨树 DNA 的提取方法第24-25页
     ·杨树 RNA 的提取方法第25页
     ·RT-PCR第25-26页
     ·PCR 目的片段的回收和纯化第26页
     ·生物信息学分析方法第26-28页
     ·C4H RNAi 表达载体的构建第28-31页
     ·UGPase 过量表达载体的构建第31-33页
     ·农杆菌转化实验第33页
     ·农杆菌介导的遗传转化第33-34页
     ·转基因植株的 PCR 检测第34-35页
4. 结果分析第35-46页
   ·C4H RNAi 载体的构建第35-39页
     ·植物总 RNA 的提取第35页
     ·C4H 基因的克隆第35-36页
     ·pUCCRNAi+1F 载体验证第36-37页
     ·pUCCRNAi+2F 载体验证第37页
     ·pBI121+2F 载体的验证第37-38页
     ·PCR 验证 pBI121+2F 质粒成功转入农杆菌第38-39页
   ·UGPase 基因的克隆和生物信息学分析第39-43页
     ·UGPase 基因的克隆第39页
     ·蛋白质分子量、等电点及保守结构域分析第39-40页
     ·UGPase 基因功能的挖掘第40-41页
     ·UGPase 蛋白空间结构预测第41页
     ·EST 表达模式分析第41-42页
     ·UGPase 家族进化关系分析第42-43页
   ·UGPase 过量表达载体的构建第43页
   ·PCR 验证 pBI121+UGPase 质粒成功转入农杆菌第43-44页
   ·抗性愈伤的获得第44页
   ·愈伤组织增殖、诱导分化和生根第44-45页
   ·抗性植株的检测第45-46页
5. 结论第46-47页
6. 讨论第47-48页
   ·转基因植株的检测第47页
   ·下一步的工作设想第47-48页
参考文献第48-58页
附录第58-64页
致谢第64-65页
个人简介第65页
在读期间发表的学术论文第65页

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