| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 英文缩略词 | 第11-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-26页 |
| 第一章 布氏杆菌病发生机理研究及其防治 | 第13-20页 |
| 1. 布氏杆菌病流行概况 | 第13页 |
| 2. 布氏杆菌的病原特点及分类 | 第13-14页 |
| 3. 布氏杆菌病的防治 | 第14-15页 |
| 4. 布氏杆菌病的发病机制 | 第15-20页 |
| 第二章 RNAi概述 | 第20-26页 |
| 1. RNAi的历史 | 第20-21页 |
| 2. RNAi的作用机制 | 第21页 |
| 3. RNAi的类型 | 第21-22页 |
| 4. RNAi的特点 | 第22-24页 |
| 5. RNAi的应用 | 第24-25页 |
| 6. 课题研究思路及技术路线 | 第25-26页 |
| 第二部分 试验研究 | 第26-73页 |
| 第三章 水牛TREM1基因shRNA筛选与病毒感染水牛单核细胞的初步研究 | 第27-60页 |
| 第一节 水牛TREM1基因克隆、融合蛋白表达载体构建 | 第27-40页 |
| 摘要 | 第27页 |
| 1. 材料与方法 | 第27-33页 |
| 2. 结果 | 第33-38页 |
| ·水牛TREM1基因克隆与测序分析 | 第33-37页 |
| ·重组质粒pDsRed-N1-TREM1的酶切鉴定结果 | 第37页 |
| ·重组质粒pDsRed-N1-TREM1表达检测结果 | 第37-38页 |
| 3. 分析与讨论 | 第38-39页 |
| 4. 结论 | 第39-40页 |
| 第二节 shRNA设计及其有效片段筛选 | 第40-52页 |
| 摘要 | 第40页 |
| 1. 材料与方法 | 第40-43页 |
| 2. 结果 | 第43-50页 |
| ·shRNA重组质粒的酶切验证和测序结果 | 第43-44页 |
| ·靶质粒与干扰质粒以1：1比例共转染抑制效率检测 | 第44-47页 |
| ·靶质粒与干扰质粒以1：3比例共转染抑制效率检测 | 第47-50页 |
| 3. 分析与讨论 | 第50-51页 |
| 4. 结论 | 第51-52页 |
| 第三节 水牛单核巨噬细胞分离与病毒感染水牛单核细胞的初步研究 | 第52-60页 |
| 摘要 | 第52页 |
| 1. 材料与方法 | 第52-55页 |
| 2. 结果 | 第55-57页 |
| ·水牛外周血单核巨噬细胞的分离与体外培养 | 第55页 |
| ·水牛单核巨噬细胞基因表达分析 | 第55-56页 |
| ·shRNA病毒包装及滴度测定 | 第56-57页 |
| ·shRNA病毒感染水牛单核巨噬细胞及基因表达分析 | 第57页 |
| 3. 分析与讨论 | 第57-59页 |
| 4. 结论 | 第59-60页 |
| 第四章 水牛LBP基因融合蛋白表达载体构建及其shRNA片段筛选 | 第60-73页 |
| 摘要 | 第60页 |
| 1. 材料与方法 | 第60-63页 |
| 2. 结果 | 第63-70页 |
| ·水牛LBP基因克隆与测序分析 | 第63-66页 |
| ·重组质粒pDsRed-N1-LBP酶切鉴定与表达检测 | 第66-68页 |
| ·水牛LBP基因shRNA重组质粒的PCR鉴定与测序结果 | 第68-69页 |
| ·shRNA抑制效率检测 | 第69-70页 |
| 3. 分析与讨论 | 第70-72页 |
| 4. 结论 | 第72-73页 |
| 全文总结 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 附录 | 第82-85页 |
| 攻读硕士期间发表论文 | 第85页 |
