| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 抗菌肽的研究进展 | 第9-13页 |
| ·抗菌肽的定义 | 第9页 |
| ·抗菌肽的分类 | 第9-11页 |
| ·依据抗菌肽来源分类 | 第9-10页 |
| ·从结构上对抗菌肽进行分类 | 第10-11页 |
| ·抗菌肽生物学功能及抗菌作用机制 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的生物学功能 | 第11页 |
| ·抗菌肽的抗菌作用机制 | 第11-12页 |
| ·抗菌肽的应用 | 第12-13页 |
| 2 抗菌肽的研究意义及前景 | 第13页 |
| 3 两栖类动物抗菌肽研究现状 | 第13-16页 |
| ·皮肤特点 | 第14页 |
| ·结构特点 | 第14-15页 |
| ·功能活性 | 第15-16页 |
| ·抗菌活性 | 第15页 |
| ·抗肿瘤细胞活性 | 第15页 |
| ·抗原虫活性 | 第15页 |
| ·其他活性 | 第15-16页 |
| 4 两栖类皮肤抗菌肽的应用及前景 | 第16-18页 |
| ·两栖类皮肤抗菌肽的应用 | 第16页 |
| ·食品加工的应用 | 第16页 |
| ·应用于医药临床 | 第16页 |
| ·应用于动、植物基因工程技术 | 第16页 |
| ·两栖类皮肤抗菌肽的应用前景 | 第16-18页 |
| 材料与方法 | 第18-29页 |
| 1 华南湍蛙皮肤分泌液中抗菌肽的分离纯化 | 第18-21页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·实验用菌种 | 第18页 |
| ·实验试剂和仪器 | 第18页 |
| ·华南湍蛙皮肤分泌物的收集 | 第18页 |
| ·抗菌肽的分离纯化 | 第18-19页 |
| ·抗菌活性检测 | 第19页 |
| ·氨基酸序列分析和分子量测定 | 第19页 |
| ·LC-MS/MS 鉴定样品制备 | 第19-20页 |
| ·LC-MS/MS 分析 | 第20页 |
| ·蛋白鉴定和数据库搜索 | 第20-21页 |
| 2 华南湍蛙皮肤组织 cDNA 的分子克隆 | 第21-26页 |
| ·实验试剂 | 第21页 |
| ·主要仪器及器材 | 第21页 |
| ·总 RNA 的提取和 mRNA 的纯化 | 第21-22页 |
| ·准备工作 | 第21页 |
| ·TRIZOL 法提取总 RNA | 第21-22页 |
| ·利用 mRNA 纯化试剂盒纯化 mRNA(参照试剂盒说明书) | 第22页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| ·cDNA 序列的分子克隆 | 第22-26页 |
| ·第一链 cDNA 的合成 | 第22-23页 |
| ·第二链 cDNA 的合成 | 第23页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第23页 |
| ·编码抗菌肽 cDNA 基因的克隆 | 第23-24页 |
| ·PCR 产物纯化(按试剂盒说明书进行) | 第24-25页 |
| ·质粒 DNA 连接 | 第25页 |
| ·热激转化大肠杆菌 | 第25页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第25页 |
| ·DNA 序列测定 | 第25-26页 |
| 3 华南湍蛙皮肤抗菌肽结构与功能分析 | 第26-29页 |
| ·多肽的人工合成 | 第26页 |
| ·抗菌活性的测定 | 第26页 |
| ·实验用菌种 | 第26页 |
| ·最小抑菌浓度(MIC)的测定 | 第26页 |
| ·溶血活性检测 | 第26-27页 |
| ·阿氏液(Alsever Solution)的配制 | 第26页 |
| ·兔红细胞的制备 | 第26-27页 |
| ·溶血试验 | 第27页 |
| ·编码抗菌肽的 cDNA 的检测 | 第27页 |
| ·抗菌肽的物理化学特性分析 | 第27页 |
| ·多肽的人工合成 | 第27-28页 |
| ·扫描电镜观察 | 第28-29页 |
| ·抗菌肽处理菌株 | 第28页 |
| ·扫描电镜样品处理 | 第28-29页 |
| 结果 | 第29-39页 |
| 讨论 | 第39-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 致谢 | 第46-47页 |
| 攻读学位期间科研成果 | 第47页 |