崇安湍蛙皮肤组织抗菌肽的分离纯化、鉴定、cDNA克隆与功能分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 文献综述 | 第8-14页 |
| 1 研究背景 | 第8页 |
| 2 抗菌肽的研究进展 | 第8-11页 |
| ·抗菌肽的介绍 | 第8-10页 |
| ·抗菌机理 | 第10-11页 |
| 3 研究进展—两栖类皮肤抗菌多肽 | 第11-13页 |
| ·介绍 | 第11页 |
| ·结构特点 | 第11页 |
| ·构效关系 | 第11-12页 |
| ·功能 | 第12-13页 |
| 4 现状与展望 | 第13-14页 |
| 引言 | 第14-15页 |
| 材料与方法 | 第15-28页 |
| 1 崇安湍蛙皮肤分泌液中抗菌肽的分离纯化 | 第15-19页 |
| ·实验动物 | 第15页 |
| ·实验试剂 | 第15页 |
| ·实验仪器 | 第15页 |
| ·实验用菌种 | 第15页 |
| ·培养基 | 第15页 |
| ·皮肤分泌物的制备 | 第15-16页 |
| ·抗菌肽的纯化 | 第16页 |
| ·抗菌活性检测 | 第16-17页 |
| ·氨基酸序列分析 | 第17页 |
| ·LC-MS/MS 鉴定样品制备 | 第17-18页 |
| ·LC-MS/MS 分析 | 第18页 |
| ·蛋白鉴定和数据库搜索 | 第18-19页 |
| 2 崇安湍蛙皮肤组织 cDNA 的分子克隆 | 第19-25页 |
| ·实验试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器及器材 | 第19页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第19-21页 |
| ·cDNA 序列的文库的构建 | 第21-25页 |
| 3 崇安湍蛙皮肤抗菌肽结构与功能分析 | 第25-28页 |
| ·多肽的人工合成 | 第25页 |
| ·抗菌活性的测定 | 第25-26页 |
| ·溶血活性检测 | 第26页 |
| ·抗菌肽二级结构预测 | 第26-27页 |
| ·扫描电镜观察 | 第27-28页 |
| 结果与分析 | 第28-40页 |
| 1 抗菌肽的纯化 | 第28-29页 |
| 2 抗菌肽的序列分析 | 第29页 |
| 3 cDNA 的分子克隆 | 第29-33页 |
| ·RNA 提取及双链 cDNA 的合成 | 第29-30页 |
| ·分子克隆 | 第30页 |
| ·cDNA 序列测定 | 第30-31页 |
| ·质谱分析 | 第31-32页 |
| ·序列分析 | 第32-33页 |
| 4 二级结构的预测与分析 | 第33-34页 |
| 5 剖析理化指标 | 第34页 |
| 6 与其他抗菌肽的分子比较 | 第34-35页 |
| 7 MICs 鉴定 | 第35-36页 |
| 8 微观变化 | 第36-39页 |
| 9 溶血活性 | 第39-40页 |
| 讨论 | 第40-43页 |
| 参考文献 | 第43-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果清单 | 第49页 |
