摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-11页 |
缩略语表 | 第11-12页 |
1 前言 | 第12-20页 |
·土壤重金属污染的现状 | 第12-13页 |
·重金属污染对土壤微生物的影响 | 第13页 |
·土壤微生物多样性研究现状 | 第13-19页 |
·平板培养法 | 第14-15页 |
·Biolog微平板培养法 | 第15-16页 |
·脂肪酸分析方法 | 第16页 |
·分子生物学方法 | 第16-18页 |
·其他方法 | 第18-19页 |
·Real-time PCR技术概述 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-28页 |
·供试材料 | 第20页 |
·盆栽试验 | 第20-21页 |
·土壤样品的处理 | 第21页 |
·实验室研究材料 | 第21-23页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·抗生素 | 第22页 |
·培养基 | 第22页 |
·试剂及耗材 | 第22-23页 |
·实验方法 | 第23-28页 |
·Biolog微平板实验 | 第23-24页 |
·DGGE实验 | 第24-26页 |
·土壤总DNA的提取 | 第24-25页 |
·V6-V8区PCR扩增 | 第25页 |
·DGGE分离PCR产物 | 第25页 |
·DNA片段的回收 | 第25-26页 |
·DNA片段的克隆和测序 | 第26页 |
·构建系统发育树 | 第26页 |
·Real-time PCR实验 | 第26-28页 |
·Real-Time PCR引物设计 | 第26-27页 |
·定量标准曲线的制备及工程菌X4/pCIM的定量检测 | 第27页 |
·荧光定量PCR反应体系及扩增程序 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-41页 |
·Biolog微平板实验 | 第28-33页 |
·利用全部碳源的动力学特征 | 第28-29页 |
·微生物的多样性指数分析 | 第29-31页 |
·微生物群落的功能多样性分析 | 第31-33页 |
·DGGE | 第33-37页 |
·土壤DNA抽提 | 第33页 |
·PCR结果 | 第33-34页 |
·DGGE图谱 | 第34-35页 |
·系统发育分析 | 第35-37页 |
·Real-time PCR | 第37-41页 |
·标准样品扩增曲线 | 第37-38页 |
·熔解曲线 | 第38-39页 |
·标准曲线 | 第39页 |
·工程菌X4/pCIM检测结果 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
5 展望 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-48页 |
致谢 | 第48-49页 |
附录 | 第49-52页 |
附录1.inaX-N-mMT4a的序列 | 第49页 |
附录2.DGGE切割条带的测序结果 | 第49-52页 |